Метод Къельдаля (обратное титрование).

Отличия от метода 1: выделившийся аммиак улавливают избытком титрованного раствора хлороводородной/серной кислоты, остаток кислоты титруют раствором натрия гидроксида в присутствии смешанного индикатора (из красно-фиолетовой в зеленую). Параллельно проводят контрольный опыт.

NH₃ + HCl → NH₄Cl

Избыток HCl + NaOH → NaCl + H₂O

  Уравнения для расчета.

где: V 0 – объем 0,1 М раствора натрия гидроксида, израсходованный на титрование контрольного раствора, мл;

V 1 – объем 0,1 М раствора натрия гидроксида, израсходованный на титрование испытуемого раствора, мл;

K – поправочный коэффициент к титру раствора натрия гидроксида;

Т – 1,401 мг/мл – титр 0,1М раствора гидроксида натрия по азоту;

а – навеска образца лекарственного средства, г;

Определение воды по К. Фишеру, значение метода для фармацевтического анализа.

Преимущества, ограничения и разновидности метода. Состав реактива, химизм

Взаимодействия с водой.

Немногие органические реакции способны протекать в водной среде. Более того, вода способна оказывать разрушающее действие на многие органические соединения, приводить к побочным реакциям в химических процессах. Т.о. необходимо точное определение воды в используемых реагентах и/или растворителях. (по Фишеру определяется как гигроскопическая, так и кристаллизационная вода)

Реактив К. Фишера представляет собой раствор серы диоксида, йода и пиридина в метаноле (должны быть безводными). Взаимодействие реактива с водой протекает в две стадии стехиометрически по уравнениям:

 

 

 

В качестве спирта обычно используется метанол, реже диэтиленгликоль.

В качестве основания – пиридин, но чаще имидазол или первичные амины.

Типы титрования по Фишеру

Метод А

Точную навеску испытуемого вещества, содержащую приблизительно от 30 до 50 мг воды, помещают в сосуд для титрования, в который предварительно внесено 5,0 мл метанола безводного. Титруют. КТТ по окраске титруемой жидкости (от желтой до красновато-коричневой)

Параллельно проводят контрольный опыт (титруют 5,0 мл метанола безводного).

Метод В

Около 20 мл метанола безводного титруют реактивом К. Фишера, определяя конечную точку титрования амперометрически. Затем вносят точную навеску(по гф) испытуемого вещества. Титруют, определяя конечную точку титрования амперометрически.

Метод С

Около 10 мл метанола безводного титруют йодсернистым реактивом, определяя конечную точку титрования амперометрически.

Затем быстро вносят точную навеску и точно отмеренный объем йодсернистого реактива, взятый с избытком приблизительно на 1 мл или объем, указанный в фармакопейной статье. Сосуд закрывают пробкой, выдерживают в защищенном от света месте в течение 1 мин или в течение времени, указанного в фармакопейной статье, периодически перемешивая содержимое сосуда.

Избыток йодсернистого реактива титруют до первоначального значения силы тока, используя метанол безводный или растворитель, указанный в фармакопейной статье.

Преимущества

● Высокая точность и воспроизводимость

● Селективность по воде

● Малые количества необходимых образцов

● Малое время анализа

● Практически неограниченный диапазон измерения (1ppm миллионная доля до 100 %)

● Пригоден для анализа:

○ Твердых веществ

○ Жидкостей

○ Газов

Ограничения

1. Реагент Фишера неустойчив к действию света и влаги. Его стандартизация должна проводиться перед каждым использованием.

2. Рабочий интервал pH для определения воды по Фишеру между 5 и 8, в противном случае высоко кислотные или основные соединения рекомендуется буферизовать.

3. Плохо растворимые в метаноле соединения (например, жиры, углеводороды) следует растворять в высших спиртах или хлороформе, возможны также добавки формамида (для полярных веществ).

4. Следует избегать титрования веществ, которые способны реагировать с компонентами реактива Фишера (например, альдегиды и кетоны, сильные кислоты и основания, окислители и восстановители, соединения, реагирующие с компонентами реактива Фишера с образованием воды).

 

3. Определение азота аминокислот методами формольного и йодометрического