Работа 1. Изучение дозовой зависимости в содержании общего количества лейкоцитов в периферической крови у животных с острой лучевой болезнью

       Работа проводится на трех крысах или мышах, две из которых за 5 дней до занятия были подвергнуты однократному тотальному облучению в дозах 2 и 7 Гр. У здорового и подопытных животных определяется общее количество лейкоцитов в периферической крови (методику подсчета общего количества лейкоцитов смотрите в методической разработке занятие №1, работа № 2).. Полученные результаты заносят в рабочую тетрадь.

Работа 2. Подсчет лейкоцитарной формулы периферической крови у животных в ранний период развития острой лучевой болезни

Подсчет лейкоцитарной формулы проводится в мазках, окрашенных азур II-эозином, после трехминутной фиксации в метиловом алкоголе. Мазки готовят из периферической крови здоровых крыс и крыс, облученных в дозах 5 и 10 Гр. Подсчет осуществляется под микроскопом с объективом х 90, окуляром х 10, с предварительно нанесенной каплей иммерсионного масла на мазок. Продвижение по мазку производится таким образом, чтобы захватить все его части, так как клетки на мазке распределяются неравномерно, в зависимости от удельного веса. Крупные клетки (моноциты и гранулоциты) располагаются преимущественно вдоль верхнего и нижнего продольного края препарата, а более мелкие (лимфоциты) – ближе к его центру; подсчет лейкоцитарной формулы производится таким образом, чтобы захватить все его части (низ, середину, верх). Все встречающиеся лейкоциты дифференцируют и результаты подсчета (в %) заносят в таблицу учета экспериментальных данных..

Работа 3. Подсчет индекса сегментации нейтрофильных лейкоцитов на мазках периферической крови у животных с острой лучевой болезнью

В период разгара острой лучевой болезни (ОЛБ) в периферической крови человека и животных обнаруживается значительное количество гиперсегментированных форм нейтрофильных лейкоцитов (клетки с большим, чем в норме, количеством ядерных сегментов).  Наблюдается прямая зависимость между выраженностью феномена гиперсегментации и дозой облучения. Для количественной характеристики выраженности этого феномена производится подсчет индекса сегментации по следующей формуле:

_с

где И_с – индекс сегментации; А – общее количество сегментов в 100 сегментоядерных нейтрофильных лейкоцитах; 100 – количество подсчитанных клеток.

Определение индекса сегментации проводится на мазках периферической крови животных, приготовленных через 4-5 дней после тотального облучения их в дозах 5 и 10 Гр, и у здоровых животных.

 

                                                                                                           Таблица 8-1

Таблица учета экспериментальных данных

Показатель	Нейтрофилы		Эозино-филы	Базо-филы	Лимфо-циты	Моно-циты	Прочие клетки
	п/я	с/я
Мазок здорового животного   Мазок животного, облученного в дозе 5 Гр   Мазок животного, облученного в дозе 10 Гр

Вопросы для обсуждения:

1. Как изменяется содержание нейтрофильных лейкоцитов и лимфоцитов периферической крови в различные фазы острой лучевой болезни?

2. Каков механизм первоначального нейтрофильного лейкоцитоза, наблюдаемого в ранний период острой лучевой болезни?

3. В чем причина развития лейкопении в периферической крови в фазу разгара острой лучевой болезни?

4. О чем свидетельствует увеличение количества ядерных сегментов в нейтрофильных лейкоцитах при острой лучевой болезни?

5. Каков механизм фазы абортивного подъема числа клеток после облучения организма?

 

Литература

ОСНОВНАЯ:

1.  Бутомо Н.В., Гребенюк А.Н., Легеза В.И., Малаховский В.Н., Ушаков И.Б. Основы медицинской радиобиологии / Под ред. И.Б. Ушакова. – СПб: ООО Издательство Фолиант, 2004

2. Цыб А.Ф., Будагов Р.С., Замулаева И.А. и др. Радиация и патология. Учебное пособие / Под ред. А.Ф. Цыба. – М.: Высшая школа, 2005.

3. Ярмоненко С.П., Вайнсон А.А. Радиобиология человека и животных. Учебное пособие / Под ред. С.П. Ярмоненко. – М.: Высшая школа, 2004.

ДОПОЛНИТЕЛЬНАЯ:

4. Бурлакова Е.Б., Кузнецов В.М., Москаленко В.А. и др. Неизвестный Чернобыль: история, события, факты, уроки. М.: Изд-во МНЭПУ, 2006.

5.  Гольдберг Д.И., Гольдберг Е.Д. Атлас микрофотограмм костного мозга при острой лучевой болезни и действии цитостатических препаратов. – М.: Медицина, 1973.

6. Гуськова А.К., Байсоголов Г.Д. Лучевая болезнь человека. - М.: Медицина, 1971.

7. Медицинские последствия Чернобыльской аварии (научный отчет). – ВОЗ, Женева, 1996

8. Уразова О.И., Новицкий В.В. Лабораторная диагностика гематологических синдромов и болезней. Учебное пособие. – Томск: Изд-во Печатная мануфактура, 2008.

 

Занятие 9