Методы микробиологической диагностики инфекционных болезней.

Возбудитель брюшного тифа и паратифа.

Таксономия

Отдел Gracilicutes

Семейство Enterobacteriaceae

Род Salmonella

Вид S. enterica

Подвид Enterica

Серовар S.Typhi(брюшной тиф) и S.Paratyphi A,S.Paratyphi B, S.Paratyphi C (возбудители паратифов).

Морфологические:

Подвижные грамотрицательные палочки. Имеют перитрихиально расположенные жгутики. Спор не образуют. Капсулу не образуют.

Культуральные свойства:

По типу дыхания – факультативные анаэробы. Мезофилы. Не прихотливы к питательным средам. Могут расти на следующих средах:

-Мясопептонный агар

- Мясопептонный бульон

-Дифференциально-диагностические среды Эндо, Левина

-Селенитовый бульон

-Среды с содержанием желчи – элективные среды

-Среды с сердечно-мозговой вытяжкой и т.д.

На плотных средах образуют колонии в R- и S-формах. На жидких –диффузное помутнение.Колонии в S-формах гладкие,блестящие с голубоватым оттенком. S.Paratyphi B при росте на плотных средах образуют слизистые валики.

Биохимические свойства.

Обладают выраженной биохимической активностью. Основные биохимические свойства, необходимые для идентификации:

1. Продуцируют кислоту и газ при ферментации глюкозы(S.Typhi не продуцируют газ)

2.Ферментируют мальтозу до кислоты и газа.

 3.Не ферментируют лактозу

4. Продуцируют сероводород(кроме S.Paratyphi A)

5. Не образуют индол

6. Декарбоксилируют лизин(кроме S.Paratyphi A)

7. Не расщепляют мочевину

8. Отрицательный тест Фогеса-Проскауэра

Антигенная структура

1.Соматический О-антиген

2.Жгутиковый Н-антиген(двухфазный)

Имеется несколько классификаций сальмонелл, наиболее старой является классификация по Кауфману-Уайту.В основе которой лежит разделение сальмонелл на серогруппы по общности строения О-антигена и внутри серогрупп на серовары в соответствии с различиями в строении Н-антигена.

Факторы патогенности.

1.ворсинки IV типа – обеспечивают адгезию

2.эффекторные белки – разрушают клетки, в частности, макрофаги

3.эндотоксин, иногда у некоторых сероваров сальмонелл встречается еще и экзотоксин

Эндотоксин – липополисахарид клеточной стенки, который высвобождается после гибели сальмонелл. Он активирует каскад арахидоновой кислоты, в результате увеличивается синтез простагландинов и повышение цАМФ,приводящий к нарушению водно-солевого баланса кишечника и развитию диареи.

Экзотоксин – имеет белковую природу, синтезируется и секретируется микробной клеткой в процессе жизнедеятельности.

4.ферменты: гиалуронидаза, нейраминидаза. Фермент суперкапсиддисмуаза влияет на способность сальмонелл размножаться в макрофагах.

Эпидемиология:

Брюшной тиф и паратифы являются антропонозными заболеваниями. Источником инфекции являются больной или бактерионоситель,который выделяет возбудитель во внешнюю среду с испражнениями,мочой,слюной.

Резистентность:

Возбудители этих инфекций устойчивы во внешней среде,сохраняются в почве,воде. Благоприятной для их размножения средой являются пищевые продукты.Передача возбудителя –водным путем,алиментарным путем и контактно-бытовым путем.

Патогенез.

Попав в тонкую кишку, возбудители тифа и паратифов инвазируют слизистую оболочку при помощи эффекторных белков,формируя первичный очаг инфекции в пейеровых бляшках. Интенсивное размножение микробов в макрофагах, приводящее к воспалению пейеровых бляшек и развитию лимфаденита,следствием чего являются нарушение барьерной функции мезентериальных лимфатических узлов и проникновению сальмонелл в кровь,в результате чего развивается бактериемия. Это совпадает с концом инкубационного периода, который длится 10-14 суток. Во время бактериемии, которая сопровождает весь лихорадочный период,возбудители тифа и паратифов с током крови разносятся по организму,оседая в печени, селезенки, легких, а также в костном мозгу, где они размножаются в макрофагах. Из клеток печени сальмонеллы по желчным протокам попадают в желчный пузырь,где размножаются. Накапливаясь в желчном пузыре,вызывают его воспаление и с током желчи реинфицируют тонкую кишку.Повторное внедрение сальмонелл в пейеровы бляшки приводит к развитию в них гиперергического воспаления по типу феномена Артюса, их некрозу и изъявлению, что может привести к кишечному кровотечению и прободению кишечной стенки. К концу 2-й нед заболевания возбудитель начинает выделяться из организма с мочой,потом, материнским молоком.

Клиническая картина: лихорадка (повышение температуры до 39-40 С),интоксикацией, появлением розеолезной сыпи,нарушениями со стороны нервной и ССС.

Иммунитет: напряженный и длительный.

Микробиологическая диагностика: Основным методом диагностики является бактериологический.Используют также серологическое исследование.На 1-й нед заболевания и в течение всего лихорадочного периода S.Typhi и возбудители паратифов выделяют из крови.С конца 2-й недели заболевания производят выделение копро-,били- и уринокультур, т.е. материалом для исследования являются испражнения,желчь,моча.В 90 % случаев возбудитель удается выделить из костного мозга.

Посев крови осуществляют 1:10 в желчный бульон или другие жидкие среды обогащения с последующим посевом на плотные дифференциально-элективные среды (Эндо, Плоскирева,Мак –Конки).Остальные материалы для исследования высевают непосредственно на плотные дифференциально-элективные среды. Выделенную культуру возбудителя идентифицируют по биохимическим свойствам и антигенной структуре, а выделенную культуру S.Typhi типируют Vi-фагами для определения источника инфекции.

Начиная со 2-й нед заболевания проводят серологическое исследование для определения наличия и типа антител с помощью РНГА с О-,Н- и Vi-диагностикумами. Положительным считают диагностический титр 1:200.Исследование проводят с использованием парных сывороток.

Профилактика и лечение. Для специфической профилактики брюшного тифа используют брюшнотифозную сорбированную и брюшнотифозную спиртовую,обогащенную Vi-антигеном вакцины.Назначают брюшнотифозный бактериофаг.Производят этиотропную антибиотикотерапию.

Неспецифическая профилактика включает санитарно-бактериологический контроль за системами водоснабжения, соблюдение санитарно-гигиенических правил при приготовлении пищи.

Возбудитель Эшерихий.

Таксономия

Отдел Gracilicutes

  Семейство Enterobacteriaceae

Род Echerichiae

Вид E.coli

 По степени патогенности кишечная палочка делится на 2 группы: 1)патогенные штаммы 2)условно-патогенные штаммы Патогенные эшерихии подразделяются на возбудителей парентеральных эшерихиозов и диареегенные

Морфология: E.coli-это мелкие прямые грамотрицательные палочки,имеют закругленные края.Подвижны за счёт перитрихиально расположенных жгутиков.Спор не образуют.Могут образовывать капсулу или микрокапсулу.

Культуральные свойства: По типу дыхания-факультативные анаэробы.Условия культивирования:pH 7,2-7,4;оптимальная температура 37 С Не требовательны к питательным средам.Хорошо растут на простых питательных средах.На плотных питательных средах образуют колонии в R и S формах.Колонии в S формах гладкие,блестящие,полупрозрачные.На жидких средах образуют диффузное помутнение и придонный осадок.

 Биохимические свойства: Обладают выраженной биохимической активностью. Биохимическими свойствами являются: 1)ферментация глюкозы с выделение кислоты и газа 2)ферментация лактозы 3)отсутствие продукции сероводорода 4)продукция индола

Антигенная структура: E.coli обладают сложной антигенной структурой В составе клеточной стенки выделяют следующие антигены: 1)Соматический O-антиген-определяет серогруппу.Известно около 171 разновидностей этого антигена. 2)Капсульный К-антиген может быть представлен 3 антигенами:А,В и L,отличающимися(друг от друга)по чувствительности к температуре и химическим веществам.Известно более 97 разновидностей этого антигена преимущественно B-типа. К-антиген обладает способностью маскировать О-антиген,вызывая феномен О-инагглютинабельности.В этом случае О-антиген можно выявить только после разрушения К-антигена кипячением. 3)Жгутиковый Н-антиген-определяет серовары,которых насчитывается более 57

Факторы патогенности: Условно-патогенные и патогенные формы отличаются друг от друга набором факторов патогенности 1)ворсинки IV типа 2)белки наружной мембраны 3)капсула или микрокапсула 4)эндотоксин и экзотоксин -эндотоксин-имеет полисахаридную природу.Обладает энтеротропным,нейротропным,пирогенным действием. -экзотоксин-степень выраженности больше обладает ещё нефротоксическим,геморрагическим действием. 5)инвазивный фактор

Резистентность: В течении нескольких месяцев сохраняется в воде и почве Быстро размножаются в пищевых продуктах,особенно молочных Погибают при нагревании при 55 С в течении 60 мин, при 60 С-в течении 15 минут.В окружающей среде способны переходить в некультивирующую форму.

Экология и особенности распространения: Эшерихиоз-зооантропонозное заболевание Источник инфекции:больные люди и животные

 Пути передачи: водный,пищевой,контактно-бытовой,через насекомые Механизм передачи: фекально-оральный Эшерихиозы протекают по типу пищевой токсикоинфекции

 Диареегенные эшерихии подразделяются на 5 групп: I.ЭПКП-энтеропатогенная кишечная палочка II.ЭТКП-энтеротоксигенная III.ЭИКП -энтероинвазивная IV.ЭГКП-энтерогеморрагическая V.ЭАКП-энтероадгезивная Патогенез. Полость рта. Попадает в тонкую кишку, адсорбируется в клетках эпителия с помощью пилей и белков наружной мембраны. Бактерии размножаются, погибают, освобождая эндотоксин, который усиливает перистальтику кишечника, вызывает диарею, повышение температуры тела и другие симптомы общей интоксикации. Выделяет экзотоксин - тяжелая диарея, рвоту и значительное нарушение водно-солевого обмена. Клиника. Инкубационный период составляет 4 дня. Болезнь начинается остро, с повышения температуры тела, болей в животе, поноса, рвоты. Отмечаются нарушение сна и аппетита, головная боль. При геморрагической форме в кале обнаруживают кровь. Иммунитет.После перенесенной болезни иммунитет непрочный и непродолжительный

Диагностика: Материал для исследований:

•испражнения

•рвотные массы

•дуоденальное содержимое

•кровь,моча,гной •спинномозговая жидкость

Основной метод —бактериологический. Определяют вид чистой культуры и принадлежность к серогруппе, что позволяет, отличить условно-патогенные кишечные палочки от диареегенных. Внутривидовая идентификация, имеющая эпидемиологическое значение, заключается в определении серовара с помощью диагностических адсорбированных иммунных сывороток. Микробиологическая диагностика иногда сложна, поэтому (особенно для эпидемиологических исследований) нередко приходится пользоваться ретроспективным диагнозом, т. е. исследовать сыворотку переболевшего с выделенной от него культурой в реакциях агглютинации и реакциях пассивной гемагглютинации (РПГА).

Профилактика:

•Специфическая отсутствует

•Неспецифическая профилактика(санитарный контроль,поддержание мер индивидуальной защиты и т.д. Лечение:антибиотикотерапия и симптоматическое лечение.

Возбудитель шигеллеза.

Таксиономия. отдел  Gracilicutes, семейство Enterobacteriaceae, Род Shigella включает 4 вида: S. dysenteriae — 12 сероваров, S.flexneri — 9 сероваров, S. boydii — 18 сероваров, S. sonnei — 1 серовар.

Морфология. Шигеллы представлены неподвижными палочками. Спор и капсул не образуют.

Культуральные свойства. Хорошо культивируются на простых питательных средах. На плотных средах образуют мелкие гладкие, блестящие, полупрозрачные колонии; на жидких — диффузное помутнение. Жидкой средой обогащения является селенитовый бульон. У S. sonnei отмечена при росте на плотных средах S R-диссоциация.

Биохимическая активность: слабая; отсутствие газообразования при ферментации глюкозы, отсутствие продукции сероводорода, отсутствие ферментации лактозы.

Резистентность. Наиболее неустойчив во внешней среде вид S. dysenteriae. Шигеллы переносят высушивание, низкие температуры, быстро погибают при нагревании. S. sonnei в молоке способны не только длительно переживать, но и размножаться. У S. dysenteriae отмечен переход в некультивируемую форму.

Антигенная структура. Соматический О-антиген, в зависимости от строения которого происходит их подразделение на серовары, a S. flexneri внутри сероваров подразделяется на подсеровары. S. sonnei обладает антигеном 1-й фазы, который является К-антигеном.

Факторы патогенности. Способность вызывать инвазию с последующим межклеточным распространением и размножением в эпителии слизистой толстого кишечника. Функционирование крупной плазмиды инвазии, которая имеется у всех 4 видов шигелл. Плазмида инвазии детерминирует синтез белков, входящих в состав наружной мембраны, которые обеспечивают процесс инвазии слизистой. Продуцируют шига и шигаподобные белковые токсины. Эндотоксин защищает шигеллы от действия низких значений рН и желчи.

Эпидемиология: Заболевания - шигеллезы, антропонозы с фекально-оральным механизмом передачи. Заболевание, вызываемое S. dysenteriae, имеет контактно-бытовой путь передачи. S. flexneri — водный, a S. sonnei — алиментарный.

Патогенез и клиника: Инфекционные заболевания, характеризующиеся поражением толстого кишечника, с развитием колита и интоксикацией.

Шигеллы взаимодействуют с эпителием слизистой толстой кишки. Прикрепляясь инвазинами к М-клеткам, шигеллы поглощаются макрофагами. Взаимодействие шигелл с макрофагами приводит к их гибели, следствием чего является выделение ИЛ-1, который инициирует воспаление в подслизистой. При гибели шигелл происходит выделение шига токсинов, действие которых приводит к появлению крови в испражнениях.

Иммунитет. Секреторные IgA, предотвращающие адгезию, и цитотоксическая антителозависимая активность лимфоцитов.

Возбудитель сальмонелеза.

Сальмонеллы

Таксономия

Отдел	Gracilicutes
Семейство	Enterobacteriaceae
Род	Salmonella
Вид	S. enterica
Подвид	Enterica

 

В составе данного рода выделяют более 2000 сероваров.

В составе подвида Enterica выделяют более 100 сероваров сальмонелл, которые вызывают салмонеллез.

Основными являются:

1. S. enteritidis
2. S. typhimurium
3. S. dublin
4. S. choleraesuis
5. S. derbi
6. S. virhov

Сальмонеллез – острая кишечная инфекция, преимущественно зоонозная. Но есть исключение, человек иногда тоже является источником инфекции. Может протекать в локализованной форме в виде гастроэнтерита, реже, где-то в 5-10 % случаев – генерализовано, по типу септикопиемии.

 

Морфология

Подвижные грамотрицательные палочки. Имеют перитрихиально расположенные жгутики. Спор не образуют. Могут образовывать капсулу или микрокапсулу.

 

Культуральные свойства

По типу дыхания – факультативные анаэробы. Мезофилы. Не прихотливы к питательным средам. Могут расти на следующих средах:

✔ Мясопептонный агар

✔ Мясопептонный бульон

✔ Дифференциально-диагностические среды Эндо, Левина

✔ Селенитовый бульон

✔ Среды с содержанием желчи – элективные среды

✔ Среды с сердечно-мозговой вытяжкой и т.д.

 

Биохимические свойства

Обладают выраженной биохимической активностью. Основные биохимические свойства, необходимые для идентификации:

1. Продуцируют кислоту и газ при ферментации глюкозы
2. Не ферментируют лактозу
3. Продуцируют сероводород
4. Не образуют индол
5. Декарбоксилируют лизин
6. Не расщепляют мочевину
7. Отрицательный тест Фогеса-Проскауэра

 

Антигенная структура

1.Соматический О-антиген

2.Жгутиковый Н-антиген

3.Капсульный К-антиген

 

Факторы патогенности

1.ворсинки IV типа – обеспечивают адгезию

2.эффекторные белки – разрушают клетки, в частности, макрофаги

3.эндотоксин, иногда у некоторых сероваров сальмонелл встречается еще и экзотоксин

Эндотоксин – липополисахарид клеточной стенки, который высвобождается после гибели сальмонелл.

Экзотоксин – имеет белковую природу, синтезируется и секретируется микробной клеткой в процессе жизнедеятельности.

4.ферменты: гиалуронидаза, нейраминидаза.

 

Патогенез

Источник инфекции – больные животные и птицы.

Человек заражается алиментарным путем, т.е. при употреблении инфицированной пищи животного происхождения (мясо, молоко, яйца).

Возбудитель попадает через рот в ЖКТ. Достигает тонкого кишечника, колонизирует и проникает в подслизистый слой. Здесь он захватывается макрофагами. Эффекторные белки разрушают эти макрофаги. Макрофаги погибли, и из них выделились провоспалительные цитокины, в частности, интерлейкин-8 (хемокин), интерлейкин-1В и др. Провоспалительные цитокины привлекают в очаг инфекции другие клетки, в частности, нейтрофилы. Нейтрофилы синтезируют и секретируют простагландины. Простагландины увеличивают уровень цАМФ. цАМФ приводит к гиперсекреции клетками тонкого кишечника ионов натрия и хлора. Эти ионы тянут за собой воду из клеток.

После гибели сальмонеллы выделяется эндотоксин, который активирует арахидоновую кислоту в стенках клеток кишечника. Это приводит опять же к росту простагландинов, а это приводит к увеличению цАМФ. Т.е. у человека усугубляется понос.

Экзотоксин непосредственно активирует фермент – аденилатциклазу, что опять же приводит к росту цАМФ и состояние больного еще в большей степени ухудшается.

При нарушении сопротивляемости организма человека страдает барьерная функция лимфатической системы кишечника и сальмонеллы свободно проходят через стенку кишечника и попадают в кровь.

 

Клиническая картина

Инкубационный период – от 12 до 72 часов.

Салмонеллез – пищевая токсикоинфекция.

Заболевание начинается остро. У больного повышается температура до 38-39. Появляется понос, рвота, интоксикация, боли в животе, обезвоживание, нарушается водно-солевой баланс.

Заболевание может протекать в легкой, средней, тяжелой форме.

Методы диагностики

           Бактериологический метод:

           1.Материал для исследования:

           •при жизни – кал, сыворотка крови;

           •посмертно – трупы мелких животных и птиц, паренхиматозные органы, мезентеральные лимфатические узлы, абортированный плод.

           2.Микроскопия:

           a)методы окраски: 
простой метод, по Граму;

           b)микрокартина: 
палочки с закругленными концами до 4 мкм, располагаются одиночно или попарно;грамотрицательные;спор и капсулу не образуют;подвижны (за исключением S.pullorum).

           3.Культивирование:

           •посев на питательные среды: 
МПА, МПБ, дифференциально-диагностические – Эндо, Левина и др, накопительные;

           Кровь засевают в желчный бульон или среду Рапопорт в соотношении 1:10 (чтобы уменьшить бактерицидные свойства белков крови). На 2-й день проводят пересев на среду Эндо или Левина, или висмут-сульфит агар.
Все сальмонеллы имеют сходные культуральные признаки

           •на МПБ – интенсивное помутнение, образование легко разбивающегося осадка,

           •на МПА – круглые с ровными краями серо-белого цвета колонии,

           •на среде Эндо – бесцветные или розоватые колонии, на среде Левина – светло-фиолетовые колонии.
После выделения чистой культуры лактозоотрицательных бактерий устанавливают их родовую принадлежность, затем дифференцируют до вида и серовара. С этой целью изучают их биохимические свойства и антигенное строение путем постановки пластинчатой реакции агглютинации (серологическая дифференциация).

           Биохимические свойства:

           •обладают высокой сахаролитической активностью; для установления родовой принадлежности проводят посевы на короткий «цветной ряд» (среды Гисса) при этом сальмонеллы ферментируют глюкозу и маннит с образованием кислоты и газа, не расщепляют лактозу и сахарозу;

           •дальнейшее изучение для установления видовой принадлежности проводят путем посевов на длинный «цветной ряд», в состав которого входят углеводы, и другие тесты;

           •сальмонеллы не разжижают желатин, образуют сероводород, не образуют индол;

           4.Биопроба:

в необходимых случаях заражают подкожно белых мышей.

           Серологический метод:

           ◦используют РА с сывороткой крови (кровью)

           ◦используют РА для дифференциации выделенной культуры сальмонелл с целью определения их вида и серовара;

           -РИФ.,также ПЦР и т.д.

Постинфекционный иммунитет

Нестойкий, непродолжительный. Возможно повторное заболевание. Иммунитет не вырабатывается.

 

Лечение

Этиотропное – антибиотики

Симптоматическое – борьба с обезвоживанием, лечение дисбактериоза.

 

Профилактика

Специфическая профилактика среди людей не вырабатывается. Животным и птицам проводят вакцинацию.

Неспецифическая профилактика заключается в соблюдении санитарно-гигиенических правил, мытье рук, выявлении больных, носителей и их лечении, изоляции.

 

!!! Сальмонеллез еще рассматривается как внутрибольничная инфекция. В данном случае источником инфекции является больной человек или носитель.

Путь передачи: воздушно-капельный, контактно-бытовой, алиментарный.

Инкубационный период – от 8 суток до 43 дней.

Сальмонеллы, циркулируя в медицинских учреждениях, приобретают антибиотикорезистентность.

Может протекать в бессимптомной, легкой, локальной, системной форме. Иногда заканчивается летальным исходом.

Иммунитет

Нестойкий. Не вырабатывается.

Лечение

Этиотропное – антибиотики

Симптоматическое – борьба с обезвоживанием, лечение дисбактериоза.

 

Профилактика

Для экстренной профилактики можно назначить поливалентные бактериофаги.

 

Холера

Отдел ​ Gracilicutes

Семейство ​ Vibrionaceae

Род ​ Vibrio

Вид ​ Vibrio cholerae 

Внутри вида ​ Vibrio cholerae различают 2 основных биовара:

1)Vibrio cholerae classic (открыл Кох)

2)Vibrio cholerae El-Tor 

И серовар Vibrio cholerae Bengal (O139)

 

Холера ​ -антропонозная острая инфекционная болезнь,характеризующаяся поражением тонкой кишки,нарушением водно-солевого баланса и интоксикацией.

 

Морфология

 

Холерный вибрион-грамотрицательные мелкие изогнутые палочки,в форме запятой.Не образуют спор и капсулы,монотрих,чрезвычайно подвижен.

 

Культуральные свойства

Является факультативным анаэробом,но больше предпочитает аэробные условия роста,поэтому на поверхности жидкой питательной среды образует пленку.Мезофилы

(37С) рН 8,5-9,0

Для оптимального роста требует присутствие в среде 0,5 NaCl.

Не требовательны к питательным средам,могут расти на простых питательных средах.

Средой накопления является 1% щелочная пептонная вода.

Элективной средой является тиосульфат-цитратный агар,на котором образует колонии желтого цвета.

 

Биохимические свойства

Биохимически активен 

•Оксидазоположителен 

•Обладает протеолетическими и сахоролитическими свойствами:

1)продуцирует индол 

2)разжижает желатин 

3)не продуцирует сероводород 

•Расщепляет углеводы:глюкозу,сахарозу,лактозу,маннозу,крахмал •Не расщепляет некоторые углеводы:рамнозу,инсулин и арабинозу т.д. Триада Хейберга ​:сахароза(+)

                            манноза (+)                             арабиноза (-)

 

 

Антигенная структур ​а

 

В составе клеточной стенки выделяют следующие антигены:

1)соматический О-антиген 

2)жгутиковый Н-антиген 

В зависимости от строения О-антигена различают более 200 серогрупп 

О1 и О139-истинные холерные вибрионы 

Внутри серогруппы О1 в зависимости от сочетания А,В и С субъединиц происходит подразделение на серовары:

1)Огава (АВ)

2)Инаба (АС)

3)Гикошима (АВС)

 

Факторы патогенности

1)ворсинки IV типа или токсин-коррегулируемые пили 

 

Они обеспечивают 

1)колонизацию микроворсинок тонкой кишки 

2) учавствуют в образовании биоплёнки на поверхности панциря гидробионтов 

3)являются рецепторами для конвертирующего бактериофага СТХ

4)эндотоксин и экзотоксин 

Экзотоксин ещё называют холерогеном.Он состоит из 2-х субъединиц -А и В.

Субъединица А обеспечивает активацию фермента-аденилатциклазу. Субъединица В обеспечивает взаимодействие экзотоксина с клетками тонкого кишечника.

 

3)фермент -нейроминидаза 

4)эндотоксин активирует арахидоновую кислоту -секреция простагландинов 

 

Патогенез ​.

Заражение происходит перорально. Большинство вибрионов гибнет в кислой среде желудка. Однако при снижении желудочной секреции вибрионы проходят через желудок, попадают в тонкую кишку, где прикрепляются к энтероцитам, размножаются и поражают их ферментные системы без развития воспалительного процесса. Ведущую роль в патогенезе играет холероген, который нарушает водно-солевой обмен, приводит к резкому обезвоживанию организма и ацидозу.

 

Клиника ​:

Заболевание развивается стадийно(3 стадии,и с каждой происходит нарастание тяжести заболевания)

Инкубационный период от нескольких часов до 5 суток. Заболевание начинается остро, часто внезапно, повышение температуры,появляется рвота,понос,боли в животе,тенезмы,стул имеет вид рисового отвара.

 

Иммунитет ​:непрочный,непродолжительный Профилактика ​:

Специфическая:убитая холерная вакцина и комплексный препарат,состоящий из холерогена-анатоксина 

Неспецифическая:проведение карантинных мероприятий,санитарно/гигиеническая правила.

 

Лечение

1)антибиотики

2)симптоматическое

 

Стафилококки.

Таксономия

Отдел ​ Firmicutes

Семейство ​ Micrococcaceae

Род ​ Staphylococcus 

Вид ​ S.aureus 

    S.epidermidis

    S.saprophyticus 

    S.intermidius 

    S.haemolyticus 

 

Стафилококки-грамположительные кокки,которым в чистой культуре свойственно скопление в виде гроздьев винограда (характерно деление в разных плоскостях).Неподвижны,спор не образуют,могут образовывать микрокапсулу.

 

Культуральные свойства:

Стафилококки растут на простых питательных средах(МПА,МПБ)однако являются галофильными:хорошо размножаются при высоких концентрациях NaCl(10-15%),что используется при изготовлении элективной среды-желточно-солевого агара.Стафилококки чувствительны к анилиновым красителям.

 

Биохимические свойства

1)стафилококки продуцируют ​ каталазу ​,которая обеспечивает защиту от губительного действия производных кислорода.

2)синтезирует каротиноидные пигменты(определяют золотистый,белый и другие цвета),которые также защищают от оксидантов.

3)множественная устойчивость к антибиотикам:в-лактамам,эритромицину,тетрациклину и т.д.(синтез в-лактамаз)

 

Антигены

1)соматический О-антиген

2)капсульный К-антиген

 

Антигенными свойствами обладают структуры клеточной стенки:тейхоевые кислоты,пептидогликан и белок А. Капсульный антиген находится в микрокапсуле.

 

Факторы патогенности ​:

1)адгезины (прикрепление к различным веществам и клеткам организма)

2)тейхоевые кислоты ответственны за адгезию к эпителиальным клеткам.Из

S.epidermides выделен специфический полисахарид,обеспечивающий прикрепление стафилококка к протезам,ортопедическим стержням и другим трансплантатам.

3)микрокапсула подавляет фагоцитоз и способствует адгезии.

4)белок А-связывает Fc-фрагменты антител,блокируя их опсоническую активность.

5)медиаторы межмикробного взаимодействия

(бактериоцины,бактериолизины,феромоны -сигнальные белковые молекулы,регулирующие плотность популяции)

 

Обладает

•Антилизоцимной активностью 

•Антиинтерфероновая активность 

•Антикомплементарная активность 

•Антиоактоферриновая активность 

•Антигемоглобиновая активность 

 

Экзотоксины ​:

•Гемолизины альфа,Бетта,гамма и сигма(знакомо написать)-образуют каналы в ЦПМ форменных элементов,нарушая осмотическое давление и приводя к лизису.

•Энтеротоксин (A-F)вызывают пищевую интоксикацию.

•Экзотоксин,вызывающий синдром токсического шока.

•Эксфолиативный токсин -разрушает межклеточные контакты в эпидермисе и образование изъязвляющихся пузырей -синдром «ошпаренной кожи»

 

Ферменты патогенности:

Экзоферменты защиты и агрессии:

1)плазмокоагулаза 

2)катализа

3)гиалуронидаза 

4)ДНКаза 

5)мурамидаза 

6)нейроминадаза 

7)уреаза,которой обладает S.saprophyticus 

 

Патогенез

Стафилококки поражают любые органы и системы организма,вызывают сепсис,септикопиемию,токсинемию.

 

Лабораторная диагностика

 

Материал -мокрота,кровь,моча,рвотные массы, гнойное отделяемое.

1)Основным методом является ​ бактериологический  

 

При постановке бактериологического метода основное внимание уделяется патогенности стафилококков 

Иммунитет

Нестойкий.Возможно повторное заражение 

  Лечение ​:

1)антибиотики 

2)готовые антитела 

3)стафилококковые бактериофаги 

  Профилактика ​:

Для экстренной профилактики назначают готовые антитела Есть специфическая и неспецифическая профилактика.

 

 

Менонгококки.

Менингококковая инфекция — острая инфекционная болезнь, характеризующаяся поражением слизистой оболочки носоглотки, оболочек головного мозга и септицемией; антропоноз. Таксономия: возбудитель Neisseria meningitidis (менингококк) относится к отделу Gracilicutes, семейству Neisseriaceae, роду Neisseria.

Морфологические свойства. Мелкие диплококки. Характерно расположение в виде пары кофейных зерен, обращенных вогнутыми поверхностями друг к другу. Неподвижны, спор не образуют, грамотрицательные, имеют пили 4 типа, капсула непостоянна.

Культуральные свойства. Относятся к аэробам, культивируются на средах, содержащих нормальную сыворотку или дефибринированную кровь лошади, растут на искусственных питательных средах, содержащих специальный набор аминокислот. Элективная среда должна содержать ристомицин. Повышенная концентрация СО2 в атмосфере стимулирует рост менингококков.

Антигенная структура: Имеет несколько АГ: родовые, общие для рода нейссерии (белковые и полисахаридные, которые представлены полимерами аминосахаров и сиаловых кислот); видовой (протеиновый); группоспецифические (гликопротеидный комплекс); типоспецифические (белки наружной мембраны), которые разграничивают серотипы внутри серогрупп В и С. По капсульным АГ выделяют девять серогрупп (А, В, С, D, X, Y, Z, W135 и Е). Капсульные АГ некоторых серогрупп иммуногенны для человека. Штаммы серогруппы А вызывают эпидемические вспышки. В, С и Y - спорадические случаи заболевания. На основании различий типоспецифических АГ выделяют серотипы, которые обозначают арабскими цифрами (серотипы выявлены в серогруппах В, С, Y, W135). Наличие АГ серотипа 2 рассматривается как фактор патогенности. Во время эпидемий преобладают менингококки групп А и С, которые являются наиболее патогенными.

Биохимическая активность: низкая. Разлагает мальтозу и глк. До кислоты, не образует индол и сероводород. Ферментация глк. и мальтозы – диф.-диагностический признак. Не образует крахмалоподобный полисахарид из сахарозы. Обладает цитохромоксидазой и каталазой. Отсутствие β-галактозидазы, наличие γ-глютаминтрансферазы.

Факторы патогенности: капсула – защищает от фагоцитоза. AT, образующиеся к полисахаридам капсулы, проявляют бактерицидные свойства. Токсические проявления менингококковой инфекции обусловлены высокотоксичным эндотоксином. Для генерализованных форм менингококковой инфекции характерны кожные высыпания, выраженное пирогенное действие, образование AT. Пили, белки наружной мембраны, наличие гиалуронидазы и нейроминидазы. Пили являются фактором адгезии к слизистой оболочке носоглотки и тканях мозговой оболочки. Менингококки выделяют IgA-протеазы, расщепляющие молекулы IgA, что защищает бактерии от действия Ig.

Резистентность. Малоустойчив во внешней среде, чувствителен к высушиванию и охлаждению. В течение нескольких минут погибает при повышении температуры более 50 °С и ниже 22 °С. Чувствительны к пенициллинам, тетрациклинам, эритромицину, устойчивы к ристомицину и сульфамидам. Чувствительны к 1 % раствору фенола, 0,2 % раствору хлорной извести, 1 % раствору хлорамина.

Эпидемиология, патогенез и клиника. Человек — единственный природный хозяин менингококков. Носоглотка служит входными воротами инфекции, здесь возбудитель может длительно существовать, не вызывая воспаления (носительство). Механизм передачи инфекции от больного или носителя воздушно-капельный.

Инкубационный период составляет 1—10 дней (чаще 2—3 дня). Различают локализованные (назофарингит) и генерализованные (менингит, менингоэнцефалит) формы менингококковой инфекции. Из носоглотки бактерии попадают в кровяное русло (менингококкемия) и вызывают поражение мозговых и слизистых оболочек с развитием лихорадки, геморрагической сыпи, воспаления мозговых оболочек. Иммунитет. Постинфекционный иммунитет при генерализованных формах болезни стойкий, напряженный.

Микробиологическая диагностика: Материал для исследования - кровь, спинномозговая жидкость, носоглоточные смывы.

Бактериоскопический метод – окраска мазков из ликвора и крови по Граму для определения лейкоцитарной формулы, выявления менингококков и их количества. Наблюдают полинуклеарные лейкоциты, эритроциты, нити фибрина, менингококки – грам «-», окружены капсулой.

Бактериологический метод – выделение чистой культуры. Носоглоточная слизь, кровь, ликвор. Посев на плотные, полужидкие питательные среды, содержащие сыворотку, кровь. Культуры инкубируют в течение 20 ч. При 37С с повышенным содержанием СО2.Оксидазаположительные колонии – принадлежат в данному виду. Наличие N.meningitidis подтверждают образованием уксусной кислоты при ферментации глк. и мальтозы. Принадлежность к серогруппам – в реакции агглютинации (РА).

Серологический метод – используют для обнаружения растворимых бактериальных АГ в ликворе, или АТ в сыворотке крови. Для обнаружения АГ применяют ИФА,РИА. У больных, перенесших менингококк – в сыворотке специфические АТ: бактерицидные, аггютинины, гемаггютинины.

Лечение. В качестве этиотропной терапии используют антибиотики - бензилпенициллин (пенициллины, левомицетин, рифампицин), сульфамиды.

Профилактика. Специфическую профилактику проводят менингококковой химической полисахаридной вакциной с