Виявити та описати колонії лактозопозитивних і лактозонегативних ентеробактерій на поживних середовищах. Інтерпретувати результат досліджень

Середовище Ендо. Свіже середовище – слабкорожеве. При рості лактозопозитивних м/о – колонії забарвлюються у темно-червоний колір з металевим блиском. Колонії лактозонегативних – безбарвні.

Середовище Левіна. Нативне середовище – фіолетовий колір. Колонії лактозопозитивних бактерій – темно-синє забарвлення, а лактозонегативні – рожевий відтінок.

Сухий бактоагар Плоскирєва. Готове середовище прозоре, має рожево-жовтувати й колір. М/о, що розщеплюють лактозу, - колонії рожевого кольору, протилежні – безбарвні.

Середовища Гісса – Середовища з різними вуглеводами розливають в окремі пробірки, в які встановлюють поплавок – запаяну з одного кінця скляну трубочку довжиною 3 см з відкритим кінцем донизу. Після посіву, якщо ферментують вуглеводи – червоне забарвлення – зміна рН у кислу сторону, деколи з поплавка витісняється рідина – утворення газу. Три варіанти: не ферментують субстрату/ бактерії розкладають вуглеводи з утворенням кислоти без газу чи кислоти і газу.

Середовище Ресселя. Вихідний колір – зелений. Якщо бактерії ферментують лактозу і глюкозу, спостерігають зміну кольору (підкислення) всього середовища на синій. Якщо мікроби здатні метаболізувати тільки глюкозу – колір стовпчик середовища. За умови утворення газу спосте-рігають за появою його бульбашок або розривами агару.

Трицукровий агар із сечовиною Олькеницького. Блідо-рожевий колір.

Розщеплення цукрів – жовтий колір. Глюкоза наявна в невеликих концентраціях (0,1 %), в аеробних умовах (скошена поверхня) бактерії повністю утилізують її за перші години росту. Через 18-24 год вони споживають і пептони як білкову живильну основу. При цьому утворюється аміак, який робить середовище лужним, надаючи йому червоного кольору. Однак у стовпчику агару жовтий колір залишається, тому що там зберігаються кислі кінцеві продукти, які забезпечують низький рівень рН. Ентеробактерії, які розкладають лактозу й глюкозу, підкислюють середовище в усій пробірці (жовтий колір стовпчика та скошеної поверхні). Оскільки лактози (1 %) в 10 разів більше, ніж глюкози, через 18-24 год інкубації її запаси ще невичерпані, зберігається жовтий колір середовища. Через 48 год – почервоніння (зсув рН у лужну сторону).

Якщо бактерії утворюють газ (вуглекислий, водень) при ферментації цукрів, з'являються розриви середовища або відбувається скупчення газу на дні, що піднімає агар у пробірці.

Сірководень мікроби утворюють з неорганічних сполук, завдячуючи ферменту тіосульфатредуктазі. Взаємодіють із сірководнем солі заліза, які, вступаючи з ним у реакцію, утворюють сульфід заліза у вигляді нерозчинного преципітату чорного кольору в стовпчику.

Уреаза руйнує сечовину з виділенням великої кількості аміаку, під впливом якого все середовище червоніє. При наявності уреазопозитивних штамів провести облік ферментації цукрів неможливо –використовують інші середовища.

Провести облік біохімічних властивостей ентеробактерій на середовищах ряду Гісса. Інтерпретувати результат досліджень

Середовища Гісса – дослідження ферментації декількох цукрів – рідкі та напіврідкі.

Основа рідкого середовища – 1 % лептонна вода з 0,5 % натрію хлориду, 1 % вуглеводів (глюкози, мальтози, лактози, сахарози, манніту та ін.), додають індикатор Андреде (кислий фуксин він розчині NaOH). Встановлюють рН 7,2 – жовтий колір. Середовища з різними вуглеводами розливають в окремі пробірки, в які встановлюють поплавок – запаяну з одного кінця скляну трубочку довжиною 3 см з відкритим кінцем донизу. Стерилізують парою під тиском 0,5 атм 15 хв.

Після посіву, якщо ферментують вуглеводи – червоне забарвлення – зміна рН у кислу сторону, деколи з поплавка витісняється рідина – утворення газу. Три варіанти: не ферментують субстрату/ бактерії розкладають вуглеводи з утворенням кислоти без газу чи кислоти і газу.