Пояснити принципи проведення серодіагностики про спірохетозах. Пояснити механізм реакції Вассермана та принцип її постановки, провести облік реакції та проінтерпретувати результати обліку

Серологічна діагностика здійсюється шляхом постановки реакції Вассермана, осадових реакцій (Кана і Закса-Вітебського), реакції іммобілізації блідих трепонем (РІБТ), РІФ, ІФА.

Реакція Вассермана відноситься до групи реакцій зв'язування комплементу, в якій використовують неспецифічний кардіоліпідний антиген. Вона заснована на здатності сироватки крові хворого утворювати комплекс з відповідними антигенами.

Кров для реакції Вассермана необхідно брати натщесерце або через 6 годин після прийому їжі.

Для постановки реакції необхідні наступні інгредієнти: 1) досліджувана сироватка, 2) антигени, 3) комплемент, 4) гемолітична сироватка, 5) еритроцити барана. Перед постановкою реакції Вассермана досліджувану сироватку необхідно прогріти на водяній бані при 4° 56° протягом 30 хв. з метою інактивації власного комплементу і стабілізації глобулінів. Антигени для реакції Вассермана випускають в готовому вигляді з зазначенням титру і способу розведення.

Всі інгредієнти для реакції Вассермана беруть в однаковому обсязі - 0,5 або 0,25 мл З метою міцної фіксації комплементу на специфічному комплексі суміш досліджуваної сироватки, антигену і комплементу поміщають у термостат при t° 37° на 45-60 хв. (I фаза реакції), після чого вносять гемолітичну систему, що складається з баранячих еритроцитів і гемолітичної сироватки (II фаза реакції), і пробірки знову поміщають у термостат на 30-60 хвилин до настання гемолізу в контролі, де: 1) антиген замінюють фізіологічним розчином, 2) замість досліджуваної сироватки вносять фізіологічний розчин. Існує ряд модифікацій реакції Вассерман

Ступінь позитивності реакції Вассермана прийнято позначати кількістю плюсів: + + ++ повна затримка гемолізу, рідина не пофарбована, всі еритроцити в осаді; + + + виражена затримка гемолізу, рожева рідина, еритроцити в осаді; + + часткова затримка гемолізу, рідина інтенсивно забарвлена, осад еритроцитів ясно видно; + слабка затримка гемолізу, рідина інтенсивно забарвлена, осад незначний, слабо помітний; - повний гемоліз, рідина інтенсивно забарвлена, осаду немає.

Реакція Кана - тест на наявність спірохетозів, в якому визначення характерних для цього захворювання антитіл в крові обстежуваного проводиться за допомогою реакції преципітації. Даний тест є менш доступним, ніж деякі інші.

Реакція Закса-Вітебського - метод серодіагностики спірохетозів, заснований на реакції преципітації, що розвивається в сироватці хворого при додаванні цитохолевого антигену; протікає повільно.

Пояснити принцип проведення серологічної діагностики при черевному тифі і паратифах. Провести облік реакції Відаля та проінтерпретувати отриманий результат

Починаючи з 2 тижня захворювання роводять серологічне дослідження з метою визначення наявності і типу антитіл. Дослідження проводять постановкою РНГА, яку ставлять з О-, Н-, і Vі-діагностикумами, ІФА, реакції аглютинації Відаля.

Реакція Відаля - реакція аглютинації, що застосовується для діагностики черевного тифу і деяких тифо-паратифозними захворювань. До різних розведень сироватки крові хворого додають змив культур збудника (черевного тифу, паратифів) або діагностикуми - стандартні розчини антигенів. Після витримування в термостаті наступає аглютинація у вигляді зерен, пластівців, що випадають в осад. Реакція Відаля зручна, проста, але має невисоку специфічність: при важких формах захворювання або при застосуванні антибіотиків результати можуть бути негативними внаслідок втрати здатності утворювати антитіла. Навпаки, позитивна реакція Відаля іноді виявляється у перенесли черевний тиф або паратиф, а також після щеплень (щеплення реакція). Реакцію Відаля слід ставити багаторазово (починаючи з 6-9-го дня захворювання), так як діагностичне значення має наростання титру аглютинінів в період захворювання.