Получение тирозиназы и окисление тирозина в присутствии кислорода

В организме человека и животных фермент тирозиназа катализирует превращение адреналина в физиологически неактивный красный пигмент адренохром. Последний, конденсируясь, превращается в бурый пигмент меланин. Если к раствору тирозина прибавить вытяжку из картофеля, содержащую фермент тирозиназу, и смесь для контакта с воздухом встряхивать, то жидкость через некоторое время постепенно окрашивается в розовый, бурый и, наконец, в черный цвет.

Принцип метода. Реакция обусловлена окислением тирозина кислородом воздуха и протекает благодаря каталитическому действию тирозиназы. В процессе окисления тирозина образуется красный пигмент галахром и затем темный пигмент меланин:

 

 

 

Исследуемый материал и реактивы

1. Клубень сырого картофеля. 2. Вода. 3. Раствор тирозина (0,1%) или раствор адреналина (0,1%). 4. Марля.

 

Ход работы

А. Получение тирозиназы из картофеля. 1г картофеля растирают в ступке с 3 мл воды и процеживают через двойной слой марли.

Б. Окисление тирозина кислородом воздуха в присутствии тирозиназы. В две пробирки наливают по 1 мл вытяжки из картофеля, содержащей фермент тирозиназу. Содержимое одной пробирки кипятят 1-2 мин и охлаждают в стакане с холодной водой. В обе пробирки добавляют по 5-10 капель 0,1% раствора тирозина, перемешивают и обе пробирки помещают в баню при 40-45⁰С. Каждые 5 мин пробирки вынимают и содержимое их сильно встряхивают. Жидкость в пробирке с активной вытяжкой постепенно принимает сначала розовую, затем бурую и черную окраску. В контрольной пробе с прокипяченной вытяжкой цвет жидкости не изменяется.

Аналогичную работу можно проделать, взяв вместо тирозина 0,1% раствор адреналина.

Указания к оформлению лабораторной работы

В тетради для лабораторных работ запишите ход работы, зарисуйте полученные окраски проб, запишите химизм реакции и сделайте выводы.

 

Контрольные вопросы

1. К какому классу ферментов относится тирозиназа?

2. Какова биологическая роль фермента тирозиназы у человека?

 

Обмен углеводов

Углеводы наряду с белками – наиболее распространенные соединения, участвующие в построении клетки и используемые в процессе её жизнедеятельности. Углеводами называют полигидроксикарбонильные соединения, содержащие альдегидную или кетонную группу либо образующие их при гидролизе.

Углеводам в организме принадлежат разнообразные функции: энергетическая, структурная, опорная, защитно-механическая, гидроосмотическая, кофакторная.

С углеводами связаны многие эффекты лекарственной терапии. В медицинской практике углеводы и их производные широко используют как фармпрепараты, как вспомогательные вещества при приготовлении различных лекарственных форм (глюкоза, фруктоза, сахароза, лактоза, крахмал, пектины, целлюлоза и др.) и как плазмозаменяющие растворы на основе декстрана (полиглюкин, реополиглюкин, реоглюман, рондекс и др.).

 

Лабораторная работа №16