Определение кальция в моче трилонометрическим методом

Принцип метода: мурексид образует с ионами Са в щелочной среде комплексное соединение красно-фиолетового цвета. При титровании трилоном Б (более сильный комплексообразователь) этот комплекс разрушается,

что приводит к появлению сине-фиолетовой окраски (мурексид в свободном виде).

Определение кальция в моче

Ход работы: 1 мл мочи + 10 мл бидист. воды + 5 мл 10% NаОН + несколько кристаллов мурексида до красно-фиолетовой окраски. Содержимое колбы титровать 0,01Н раствором трилона Б, постоянно перемешивая раствор до сине-фиолетового окрашивания.

Расчет производим по формуле:

С(Са) = 0,01 х А х Д (ммоль/сут), где

0,01 - концентрация трилона Б

А - количество трилона Б, пошедшего на титрование

Д - суточное количество мочи (1500 мл)

НОРМА: 2,5 -10 ммоль/сут (муж) 2,5 - 6,25 ммоль/сут (жен)

Результат:

Вывод:

Определение общего кальция в сыворотке крови

Ход работы: В две колбы налить по 25 мл 1% NаОН + несколько кристаллов мурексида. 0,002Н трилоном Б оттитровать содержимое обеих колб до сиреневого цвета. В одну колбу + 1 мл центрифугата сыворотки. Цвет

переходит в розовый. Титровать опытную пробу 0,002Н трилоном Б до цвета контрольной пробы.

 

А х 0,002 х 1000 х 0,2495

С(Са) = --------------------------- (ммоль/л)

0,5

А - количество трилона Б, пошедшего на титрование

0,002 - концентрация трилона Б

1000 - коэффициент пересчета на 1 л.

0,5 - количество сыворотки в 1 мл центрифугата

0,2495 - коэффициент пересчета мг% в ммоль/л

 

НОРМА: 2,25 - 2,64 ммоль/л

Результат:

Вывод:

 

 

ПРИЛОЖЕНИЕ ДЛЯ ПЕДИАТРИЧЕСКОГО ФАКУЛЬТЕТА

Причины гиперкальциемии в детском возрасте:

1.Идиопатическая первичная гиперкальциемия

- наследственно повышенная чувствительность к витамину Д. Один из признаков - раннее закрытие родничка.

2.Приобретенная повышенная чувствительность к витамину Д, возникающая при гипотиреозе или длительной иммобилизации ребенка с лечебной целью.

Неонатальная гипокальциемия (гипопаратиреоз). Через 48 часов после рождения концентрация Са в сыворотке падает 2,04 - 2,77 до 1,42 - 2,42 ммоль/л. Позднее концентрация Са восстанавливается, а содержание фос-

атов стойко повышено. То же наблюдаетсяч при кормлении новорожденных неразведенным коровьим молоком из-за избытка фосфатов.

6. ПРИЛОЖЕНИЕ ДЛЯ ЛЕЧЕБНОГО И МЕДИКО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКОГО ФАКУЛЬТЕТОВ

Химический состав живых клеток более чем на 90% представлен четырьмя элементами – углеродом, водородом, кислородом и азотом. Более 9% веса тела представлено элементами, которые в изобилии находились в воде первичного океана, где зародилась жизнь, это натрий, хлор, фосфор, кальций, магний, калий, сера (макроэлементы). Их суточная потребность составляет более 100 мг. Оставшиеся элементы, суммарная доля которых составляет 1%, чрезвычайно важны для организма. Это т.н. микроэлементы. Расстройства их метаболизма либо повсеместно распространены (например, железодефицитная анемия или кариес), либо крайне тяжелы, например миксидема, селензависимая миокардиодистрофия.

К микроэлементам относятся металлические и нематаллические элемантарные составляющие организма, содержание каждого из которых не превышает 1 мкг на г веса живой ткани. Некоторые авторы выделяют еше группу ультрамикроэлементов, которые можно обнаружить в организме лишь в следовых количествах.

Биологическая роль основных четырех элементов изучается в курсе биологической химии, т.к. эти элементы – составные компоненты белков, липидов, углеводов, нуклеиновых кислот.

Биологическа роль макроэлементов: металлы этой группы слабо связываются с отрицательно заряженными лигандами и существуют в виде катионов, относительно легко переносимых через клеточную мембрану. Их клетки используют для создания электрических биопотенциалов и биотоков, а также в качестве «спусковых крючков», опосредующих передачу сигналов.

Роль серы, которой взрослый человек потребляет в сутки не менее 1г, в жизнедеятельности организма выяснена недостаточно. Какие либо специфические расстройства, связанные с ее дефицитом не описаны. Однако сера является структурным компонентом аминокислот метионина и цистеина, а дисульфидные связи имеются практически во всех белках (в т.ч. гормонах, ферментах и т.д.). Сера имеется в сруктуре многих витаминов (тиамин, биотин, липоевая кислота). Богатейшие источники серы – сыры (263 мг/100г), яйца и мясо (230 мг/100г). Серосодержащие аминокислоты в норме служат источником сульфат – аниона (антитоксическое действие).

- Натуральная еда содержит, как правило, достаточные и сбалансированные самой природой количества микроэлементов. В течение многих лет медицина сталкивалась только с эндемическими проявлениями их дефицита и дисбаланса. В последнее время частота встречаемости расстройств обмена микроэлементов увеличилась из-за расширения применения в практике полного парентерального питания.

- В физиологичесеких условиях микроэлементы образуют прочные комплексы с белками организма. В составе этих комплексов они и выполняют свои биологические функции:

1. Входят в состав прогормонов (цинк, гормонов (иод)

2. Осуществляют транспорт веществ (железо)

3. Входят в состав активных центров ферментов (железо, медь).

4. Входят в состав окислительно-восстановительных систем.

С учетом этих аспектов, 15 микроэлементов считаются незаменимыми для человека. В эту группу включаются 5 неметаллов – йод, селен, фтор, кремний, возможно – мышьяк, а также 10 металлов – железо, медь, цинк, кобальт, марганец, никель, хром, ванадий, молибден, олово.

Заболевания, связанные с нарушением метаболизма микроэлементов могкт быть вызваны: 1. дефицитом микроэлементов; 2. дисбалансом микроэлементов; 3. токсичностью микроэлементов.

Дефицит микроэлементов может быть как эндогенным, так и экзогенным.

- Экзогенный дефицит может быть эндемическим или вследствие несбалансированного питания.

Примеры: селеновый дефицит в Восточной Финляндии, в китайской провинции Гень-Су, йода – Южный Урал, горные районы.

Железодефицитная анемия при квашиоркоре.

- Эндогенный дефицит может наступать как следствие: нарушения всасывания из ЖКТ, наследственных дефектов белков – транспортеров, наличие в пище компонентов, препятствующих абсорбции микроэлемента, потери микроэлемента с мочой, слущиванием эпителия, кровью и др.

- Дисбаланс в обеспечении микроэлементами состоит в том, что значительное превышение концентрации некоторых микроэлементов над оптимумом ведет к возникновению дефицита других микроэлементов. Это может быть обусловлено конкуренцией между элементами при всасывании и реабсорбции, а также при включении их в белки. Например, избыток цинка и молибдена способствует дефициту меди.

Токсические эффекты микроэлементов разнообразны и зависят от формы, в которой микроэлемент поступает в организм и от количества ядовитого вещества. Отравления могут быть острыми и хроническими.

Механизмы токсичности, при всем разнообразии, включают:

- ингибирование ферментов, путем связывания с аминокислотами их активных центров (свинец блокирует дельта- аминолевулинат синтазу), мышьяк – пируваткиназу

- повреждения микроэлементами нуклеиновых кислот.

- Нарушения синтеза белка (тяжелые металлы),

- Нарушения фосфорилирования (фтор),

- Нарушения мембранной проницаемости (ртуть).

- Гаптенная активность некоторых микроэлементов, провоцирующих при попадании в легкие, в эпидермис тяжелые гиперэргические реакции замедленного типа (никелевый и йодный контактный дерматит, бериллиевый аллергический альвеолит и дерматит),

- Нарушения продукции гормонов (свинец угнетает синтез тиреоидных гормонов, тропных гормонов аденогипофиза, гормонов надпочечников и гонад).

Токсичность микроэлементов, попадающих в тело человека в ультрамикромалых дозах наиболее значимо для здоровья пациентов, неспособных экскретировать их из организма. Алюминий – это металл, который очень распространени в земной коре. Но живые клетки избегают алюминия. При хронической почечной недостаточности алюминий не выводится и накапливается в мозге, костях. Это ведет к инвалидизирующим расстройствам (апатия, потеря памяти, деменция, дезориентирование в пространстве, судороги, миалгия, астения, анемия).

Профессиональные болезни. Токсический энцефалит у производителей свинцовых аккумуляторов. Марганцевый паркинсонизм у сварщиков. Бериллиоз у производителей катодных трубок.

Адресная инкорпорация радиоактивных изотопов. Стронций и цезий задерживаются в костях. Иод – в щитовидной железе.

 

Домашнее задание

Решить ситуационные задачи:

1. Вы провели у больного операцию резекции щитовидной железы по поводу ее опухолевого поражения. Уже в первые трое суток у больного развился угрожающий жизни судорожный синдром. Какие изменения ионного состава плазмы можно обнаружить у этого больного? Чем эти изменения можно объяснить?

2. Почки способны концентрировать Nа в моче до уровня 340 мг. В морской воде его содержание может быть вдвое больше. Длительное потребление морской воды приводит к повреждению клеток мозга и смерти. В чем причина такого исхода?

3. На производстве в горячих цехах рабочие обеспечиваются не пресной, а слегка подсоленной водой. Чем объясняется эта профилактическая мера?

СПИСОК ОСНОВНОЙ ЛИТЕРАТУРЫ:

1. Лекции по биохимии.

2. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия, 1982

3. Строев Е.А. Биологическая химия. 1982.

4. Николаев А.Я. Биологическая химия. 1982.

5. Северин Е.С. Биохимия. М. 2003

 

СПИСОК ДОПОЛНИТЕЛЬНОЙ ЛИТЕРАТУРЫ:

 

1. Маршалл В.Дж. Клиническая биохимия. 1999

2. Уильямс Д. Металлы жизни. 1975.

3. Велла Ю.М., Лившиц В.М. Микроэлементы в гематологии и кардиологии. 1965.

4. Лосев Н.И., Вайнов Б.И. Физико-химический гемостаз.

5. Козинец Г.И. Интерпретация анализов крови и мочи. Клинические значения

результатов.

6. Зайчик, Чурилов Основы патохимии

7. Марри Р. Греннер Д. Биохимия человека, 1993

 

Занятие 8