Підрахунок кількості лейкоцитів та лейкоцитарна формула

Система організму, яка захищає його від живих тіл та речовин, що несуть на собі ознаки чужорідної генетичної інформації, називається імунною системою. Вона являє собою всі типи лейкоцитів: лімфоцитів, моноцитів, нейтрофілів, базофілів, еозинофілів, а також представлена органами, у яких відбувається їх розвиток: кістковий мозок, тімус, лімфатичні вузли, селезінка.

За нормальних умов кількість лейкоцитів складає 4 - 9×10⁹/л. Зменшення кількості лейкоцитів у крові називається лейкопенія, збільшення – лейкоцитоз. Розрізняють фізіологічний (перерозподільний) та реактивний лейкоцитоз. Лейкоцитарна формула, тобто відсотковий склад/вміст окремих форм лейкоцитів у крові, постійна: 2 – 4% – еозинофіли, 0 – 1 % – базофіли, 1 – 5 % – палочкоядерні нейтрофіли, 50 -70 % – сегментоядерні нейтрофіли, 20 – 40 % – лімфоцити, 2 – 10% – моноцити. Відхилення від норми вказує на наявність патології та служить важливою діагностичною ознакою при різних захворюваннях.

Мета заняття: оволодіти методом підрахунку кількості лейкоцитів та лейкоцитарної формули.

Оснащення заняття: щур, штатив, пробірки, предметне та покривне скельця, ракета, склянка, цитрат натрію, йод, мікроскопи, камера Горяєва, прилад Панченкова, бинт, спирт, набір інструментів, розчин Тюрка, кедрове масло.

Х І Д Р О Б О Т И

Завдання 1. Підрахунок кількості лейкоцитів

Провести забір крові щура. У пробірку налити 0,4 мл розчину Тюрка (5% розчин оцтової кислоти, забарвлений метиленовою синькою) та додати 0,02 мл крові. Кислота руйнує оболонки еритроцитів та лейкоцитів, фарба забарвлює ядра лейкоцитів, при цьому еритроцити стають непомітними і не заважають підрахунку лейкоцитів. Заповнити розбавленою у 20 разів кров’ю камеру Горяєва. Для одержання задовільних результатів підрахунок провести у 25 великих квадратах при малому збільшенні.

Формула для підрахунку лейкоцитів у 1 мм³ цільної крові:

,

де Л – сума еритроцитів у 400 маленьких квадратах, 4000 – об’єм простору над одним маленьким квадратом, 20 – розбавлення крові.

Завдання 2. Підрахунок лейкоцитарної формули

На чотири крайних ділянки мазка нанести кедрове масло. Мазок крові дослідити за допомогою мікроскопа під імерсією. Кожний виявлений лейкоцит (Рис. 4) відмітити у відповідній графі лічильника лейкоцитарної формули. Після підрахунку 25 або 50 лейкоцитів на одній ділянці мазка поле зору перенести на іншу ділянку. Таким чином у чотирьох ділянках буде підраховано 100 або 200 лейкоцитів.

 

 

Рис. 4. Форми лейкоцитів: А – мієлоцит, Б – юний нейтрофіл, В – палочкоядерний нейтрофіл, Г і Д – сегментоядерний нетрофіл, Є і Ж – моноцити, З – еозинофіл, І – базофіл, К – лімфоцит

 

Порівняти отримані дані лейкоцитарної формули крові щура з табличними. Зробити висновки.

Таблиця

	Кількість лейкоцитів, тис/мкл	Лейкоцитарна формула, %
еозинофіли	базофіли	нейтрофіли	лімфоцити	моноцити
палочко ядерні	сегменто ядерні
Щур	10-30	0-1	0-3	0-2	13-60	50-73	0-10

 

Контрольні питання:

1. Функції лейкоцитів, їх кількість у крові людини.

2. Що називається лейкоцитозом та лейкопенією, причина їх виникнення?

3. Характеристика зернистих та незернистих лейкоцитів.

4. Що називається лейкоцитарною формулою? Яке її значення?

Лабораторне заняття №5

ВИЗНАЧЕННЯ КІЛЬКОСТІ ГЕМОГЛОБІНУ ЗА МЕТОДОМ САЛІ. РОЗРАХУНОК КОЛЬОРОВОГО ПОКАЗНИКА КРОВІ. ОДЕРЖАННЯ КРИСТАЛІВ ГЕМІНУ

Гемоглобін являється найбільш розповсюдженим кров’яним пігментом, до складу якого входять білок глобін та гем. Гем – двовалентне залізо, з’єднане з протопорфіріном. Глобін складається з 4 ланцюгів – доменів (2α- та 2γ - ланцюгів для гемоглобіну F, 2α - та 2β - ланцюгів для гемоглобіну А). Він може легко приєднувати (бути акцептором) кисень за високих концентрацій О₂ у середовищі та легко віддавати (бути донором) при низькому напруженні або тиску О₂.

У нормі рівень гемоглобіну у чоловіків 130-160 г/л, у жінок 115-145 г/л. Починає синтезуватися гемоглобін на стадії базофільних еритробластів, а закінчується - у ретикулоцитах кров’яного русла. Суттєву роль у біосинтезі гемоглобіну відіграють вітамін В₁₂, фолієва кислота, Fe²⁺. У зрілому еритроциті вміст гемоглобіну постійний.

Мета заняття: оволодіти методом кількісного визначення гемоглобіну за Салі, освоїти розрахунок кольорового показника крові і методику одержання кристалів геміну.

Оснащення заняття: щур, штатив, пробірки, предметне та покривне скельця, ракета, склянка, цитрат натрію, йод, мікроскопи, камера Горяєва, бинт, спирт, набір інструментів, гемометр Салі, 0,1 н розчин соляної кислоти, дистильована вода.

Х І Д Р О Б О Т И