Определение общей бактерицидной активности сыворотки крови

Приложение 5

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОБЩЕЙ БАКТЕРИЦИДНОЙ АКТИВНОСТИ СЫВОРОТКИ КРОВИ

Определенный объем сыворотки крови смешивают с тест – культурой S.flexneri и E. coli (опыт). В контрольную пробу в таком же объеме вместо сыворотки крови вносят стерильный 0,85 % раствор поваренной соли и одну из тест – культур.

Посев инкубируют в термостате при +37С º. Последующая оценка бактерицидной активности может быть определена одним из следующих способов:

а) Путем высева из опытных и контрольной проб на чашки с МПА и инкубирования последней при +37С° 18-24 час., подсчетом колоний на опытных и контрольных чашках с их сопоставлением.

б) Методом фотонефелометрической оценки бактерицидной активности сыворотки крови (Смирнова, Кузьмина, 1966), при котором сопоставляются показатели оптической плотности опытных и контрольных проб и определяется бактерицидная активность в % по формуле:

в) Путём учёта просветления в опытных пробах в результате проявления бактерицидности.

Приложение 6

ПУТИ АКТИВАЦИИ КОМПЛЕМЕНТА

Многочисленные функции комплемента могут быть реализованы только после его активации, которая осуществляется двумя путями: классическим (каскадным) способом и альтернативным способом.

                                 Этапы классического пути активации комплемента

1. Начало - связывание антител с клеточной поверхностью микроорганизма, чужеродной клетки, ткани и т.д.

2. Распознавание антител и связывание их с 1 компонентом комплемента (С'₁).

З. Прикрепление С'₂ компонента к этому сессильному (прикрепленному) антителу.

4. Последовательная активация С'₁, С'₄, С'₂ компонентов.

5. Включение в процесс С'₃, С'₅, С'₆, С'₇ компонентов. Их активация сопровождается привлечением лейкоцитов к мембране связанной клетки.

б. При участии С'₈ С'₉, лейкоцитов происходит лизис клетки (цитолиз).

Этапы альтернативного пути активации комплемента

1. Инициатор процесса активации комплемента здесь не антитело. Начинают процесс активации С' полисахариды, эндотоксины микробов, они активируют пропердин.

2. У пропердина активируются факторы Д и В (аналоги С'₁, С'₂ компонентов комплемента).

З. Активация центрального звена комплемента - С'₃.

4. От С'3 по принципу обратной связи - активация Д, В компонентов пропердина.

5. Импульс от Д, В компонентов и С'₃ далее идет по цепи к С'₅, С'₆, С'₇, затем — С'₈ С'₉, что завершается лизисом клетки.