Исследования фекалий и их клиническое значение

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА И ПРОДОВОЛЬСТВИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Уральская государственная сельскохозяйственная академия

ИССЛЕДОВАНИЯ ФЕКАЛИЙ И ИХ КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ

Методические указания

Екатеринбург, 2007

ББК 48р У745 УДК 591Л49.1

Исследование фекалий и их клиническое значение.

Методические указания. /Составила доцент кафедры внутренних незаразных болезней, канд. вет. наук В.МУсевич - Екатеринбург, Уральская ГСХА, 2007, 32

Утверждено методической комиссией факультета ветеринарной медицины

2007 г.

Издание второе исправленное и дополненное

В методических указаниях показано значение исследований фекалий для диагностики различных заболеваний животных. Подробно описана методика исследования и показатели кала. В сводных таблицах даны нормативные показатели лабораторных исследований и приведено клиническое значение изменений всех показателей кала.

Методические указания предназначены для студентов факультета ветеринарной медицины, а также могут быть полезны молодым специалистам ветеринарных и научно-исследовательских лабораторий.

ЛР № 020769 © Уральская государственная

сельскохозяйственная академия, 2007

Введение

При проведении диспансеризации и клинических исследовании животных большое диагностическое значение приобретают лабораторные методы исследования. К ним относится и исследование фекалии, которое позволяет в комплексе с гематологическими, исследованиями мочи и другими общими, специальными и дополнительными исследованиями диагностировать болезни органов пищеварительной системы, выявить нарушения обмена веществ в организме, ферментативную недостаточность, нарушения моторной, секреторной, всасывательной и других функций органов пищеварения, печени и поджелудочной железы, определить возникшие осложнения, дифференцировать сходные заболевания, судить о тяжести болезни, о функциональном состоянии органов, следить за эффективностью лечения, прогнозировать заболевание Особенно большое значение исследование фекалий имеет для диагностики заболеваний печени, поджелудочной железы и функционального состояния различных отделов пищеварительной трубки. А также проведение гельминтокопроскопии имеет первостепенное значение в постановке диагноза при инвазионных болезнях человека и животных

Кал (kopros, faeces) - конечный продукт пищеварения, состоящий из остатков непереваренного корма, воды, служенного эпителия, минеральных веществ, ферментов, микроорганизмов. Анализ его - важнейшая составная часть общего обследования пациента. По данным исследования представляется возможным сделать существенные выводы о моторной, секреторной и всасывательной функциях желудочно-кишечного тракта. Эти данные небезразличны также при постановке диагноза на некоторые другие болезни (паратиф, туберкулез, дизентерия, сальмонелле, паратуберкулез, чума, кокцидиоз и др), выработке прогноза и обосновании терапии.

Следует помнить, • что функциональные расстройства пищеварительной системы наблюдаются при всех вообще тяжелых заболеваниях. Нарушая питание, ослабляя самозащиту и борьбе с обусловившей заболевание причиной, они, вместе с тем. вызывают общий упадок сил больного, что очень неблагоприятно отражается на течении основной болезни. Кроме того, заболевания пищеварительного аппарата очень часто развиваются в качестве осложнений при поражении других органов, например, сердца, печени, почек.

 

Кроме того, успех оздоровительной работы в хозяйствах зависит от своевременного распознавания инвазировнных животных осуществления лечебно-профилактических мероприятий в комплексе с исследованиями и дезинвазией объектов окружающей среды. Этим определяется и необходимость знания и применения специальных методов копроскопии.

Диагностические обследования животных с этой целью проводят в порядке плановых мероприятий в рациональные сроки, чтобы решить вопрос о благополучии стада, фермы, комплекса, а также с целью контроля и проведения оздоровительной работы.

Чтобы определить патологические изменения, необходимо
составить себе ясно представление о свойствах кала здоровых
животных. Анализ кала включает, макроскопическое,

микроскопическое, химическое, а при подозрении на инфекционные кишечные заболевания также бактериологическое, а на инвазионные -гельминтокопроскопические исследования.

Физические свойства

Макроскопическое исследование. Определяют количество выделенных фекалий за одну дефекацию и за сутки, консистенцию и форму, цвет, запах, наличие в них примеси.

Количество фекалий. Выделяемое за одну дефекацию и за сутки количество их зависит от состава и объема принятого корма и состояния пищеварительный системы. Количество фекалий увеличивается при понижении всасывающей способности кишечной стенки и при воспалительной экссудации в просвет кишечника. При длительных запорах объем фекалий может быть незначительным вследствие большего, чем в норме, всасывания в кишечнике.

Консистенция и форма. У взрослого крупного рогатого скота фекалии кашицеобразной консистенции, при падении на землю принимают вид "волнистой лепешки". У новорожденных телят меконий представляет неоформленную, густую, клейкую и вязкую массу, а в возрасте 2-15 дн. он неоформленной, гомогенный, мазевидной или кашицеобразной консинстенции. У мелкого рогатого скота фекалии имеют продолговато-овальную форму, у новорожденного молодняка они в первые дни в виде однородной густой массы, а в последующие дни имеют мазевидную или кашицеобразную консистенцию. К 15 -20-му дню фекалии новорожденных приобретают внешние свойства, присущие для данного вида животных. У лошадей они представляют собой плотноватые, обычно продолговато-овальные скибалы. У свиней и собак чаще имеют цилиндрическую форму.

У больных животных фекалии могут быть плотными, порой твердыми или кашицеобразными, полужидкими, жидкими, даже водянистыми, а при усиленном процессе брожения в кишечнике приобретают пенистую консистенцию.

Цвет фекалий. У здоровых животных цвет их зависит от желчных пигментов и от свойств корма. У травоядных животных при пастбищном содержании фекалии зеленоватого цвета с различными оттенками, при кормлении грубыми кормами - желто-бурого; зерновые корма, особенно кукуруза, придают им сероватый оттенок. У свиней фекалии глинисто-желтого цвета, после дачи зеленого корма - буровато-зеленого. У плотоядных после кормления мясом они приобретают темно-коричневый цвет. У молодняка в первые дни жизни желто-зеленый цвет мекония бывает от наличия в нем билирубина, в последующие дни темно-желтый цвет его зависит от стеркобилина, а затем цвет зависит от состава кормов.

При патологии фекалии приобретают сероватый или глинистый цвет вследствие угнетения секреторной функции печени, особенно при обтурации желчных путей, ахоличные фекалии хорошо определяют у молодняка раннего возраста. При ускоренной перистальтике кишечника, при приеме внутрь антибиотиков и других средств, подавляющих жизнедеятельность кишечной микрофлоры, восстановление билирубина может осуществляться лишь частично, в таких случаях фекалии имеют золотисто-желтую окраску, которую особенно хорошо определяют у молодняка раннего возраста. При кровотечениях в отделе толстых кишок несвернувшаяся кровь придает фекалиям вишнево-красный цвет; при кровотечениях в тонких кишках - темно-коричневый. Небольшие кровотечения могут быть обнаружены только химическим исследованием. При гнилостных воспалительных процессах в кишечнике фекалии приобретают землистую окраску.

Запах фекалий. У травоядных животных он своеобразно кисловатый; у свиней и особенно собак, пушных зверей и кошек при кормлении их мясом - зловонный.

При превалировании в кишечнике гнилостных процессов (гнилостная диспепсия, "щелочной" катар кишечника, распад опухоли) запах становится гнилостным, а при преобладании бродильных процессов (бродильная диспепсия, "кислый" катар кишечника) - кислым.

Остатки непереваренного корма можно найти в фекалиях любого животного, патологическим является нахождение значительного количества остатков такого корма, который в норме почти полностью переваривается, например, зерна овса, кукурузы.

Примеси. В качестве примесей о фекалиях иногда удается обнаружить песок, конкременты, безоары, металлические предметы, кровь, гной, пузырьки газов, кишечных паразитов и др.

Постоянной примесью фекалий является слизь. В норме она имеется в небольшом количестве, в виде малозаметного блестящего налета. При воспалительных процессах, илеусах слизь выделяется обильно, иногда о виде тяжей и комков. Количество слизи можно учитывать о пятибалльных плюсовых единицах (см. табл. 1,2).

 

 

Таблица № 1.

Таблица № 2.

Методика

Для микроскопического исследования фекалий приготовляют по специальной методике ряд препаратов.

Первый (нативный) препарат готовят следующим образом. На предметное стекло наносят 1—2 капли воды и растирают в ней с помощью стеклянной палочки небольшой комочек фекалий до получения равномерной эмульсии, которую покрывают покровным стеклом. Этот препарат рассматривают сначала под малым, а затем под средним, иногда под большим увеличением микроскопа. В препарате можно дифференцировать большинство элементов фекалий: растительную клетчатку, мышечные волокна, нейтральный жир, жирные кислоты, мала, лейкоциты, эритроциты, кишечный эпителий, слизь, кристаллы, яйца гельминтов простейшие.

Второй препарат готовят аналогичным образом, но комочек фекалий растирают на предметном стекле не с водой, а с люголевским раствором двойной крепости. В таком препарате можно обнаружить крахмал, йодофильную микрофлору.

Третий препарат готовят в виде эмульсин смешиванием комочка фекалий на предметном стекле с реактивом Саатгофа (10 мл спирта, 90 мл ледяной уксусной кислоты, Судана III для получения ярко-красной окраски). Этот препарат служит для обнаружения жира и продуктов его расщепления. Для дифференциации жировых элементов применяют также окраску препарата реактивом Гехта (смешивают перед употреблением равные объемы 1%-ного раствора нейтрального красного и 0,2%-ного раствора бриллиантового зеленого).

Четвертый препарат готовят из видимых примесей, если они есть (слизистые образования, пленки и др.).

До изучения первого препарата рекомендуется просмотреть препарат, изготовленный из комочка фекалий величиной с горошину, раздавленного до тонкого слоя между двумя предметными стеклами. В этом препарате сначала определяют количество кормовых остатков, состав которых зависит от отдельных компонентов корма и функционального состояния органов пищеварения, и также детрита.

Из остатков растительного корма в кале можно распознать растительную клетчатку и крахмал. Различают два вида клетчатки -переваримую и непереваримую. Переваримая клетчатка содержится во всяком растительном корме, она состоит из клеток, имеющих нежное строение и тонкую оболочку, а после переваривания крахмала от клеток остаются только слабые очертания. В кале здоровых животных переваримая клетчатка отсутствует или содержится в виде единичных клеток или клеточных групп, наличие большого количества

переваримой клетчатки в кале свидетельствует о недостаточности пищеварения.

Непереваримая клетчатка под микроскопом распознается легко благодаря своим резким очертаниям, толстым двухконтурным оболочкам клеток, толстым межклеточным перегородкам.

Анализ кала на присутствие о нем крахмала производится в препарате, обработанном люголевским раствором. Под влиянием йода крахмальные зерна в зависимости от стадии их переваривания окрашиваются по-разному: неизменный крахмал приобретает сине-черный цвет; продукты постепенного его расщепления — амилодекстрин — фиолетовый; эритродекстрин — красно-бурый; дальнейшие стадии расщепления, начиная с ахродекстрина, уже не окрашиваются йодом. Крахмал может находиться внутри клеток переваримой клетчатки и внеклеточно в виде зерен или осколков. При нормальном пищеварении крахмал в кале отсутствует; его присутствие в кале указывает на недостаточность пищеварения, что бывает преимущественно при заболеваниях тонкого отдела кишечника, протекающих с признаками ускоренной эвакуации его содержимого и при недостаточности поджелудочной железы.

Из остатков мясного корма плотоядных и всеядных могут быть распознаны мышечные волокна и соединительная ткань. Мышечные волокна или их обрывки, не подвергшиеся действию пищеварительных ферментов, имеют поперечную исчерченность; по мере переваривания они теряют свою структуру. Появление большого количества мышечных волокон, особенно сохранивших поперечную исчерченность, свидетельствует о ферментативной недостаточности желудочного или панкреатического переваривания; то же относится и к соединительной ткани, которая обнаруживается в виде полупрозрачных волокнистых тяжей с нечеткими контурами.

Нейтральный жир и продукты его расщепления отыскиваются как в нативных препаратах, так и в обработанных реактивом Саатгофа, а также реактивом Гехта. Нейтральный жир при нормальном пищеварении усваивается почти полностью. Неусвоенная часть жира выделяется преимущественно в виде мышц. Появление большого количества нейтрального жира в кале (стеаторея) может быть при недостатке липазы (нарушение функции поджелудочной железы), а также при недостаточном поступлении желчи в кишечник, которая активирует липазу, переводит жир в состояние тонкой эмульсин, более доступно действию ферментов. Обнаружение большого количества кристаллов жирных кислот в кале наблюдается при недостатке желчи, когда расщепление жиров происходит, но всасывание уменьшается.

Наконец, обнаружение большого количества кристаллов жирных кислот и их мыл указывает на то, что процесс эмульгирования и переваривания жиров не нарушен, по нарушено всасывание, что наблюдается при энтеритах. Количественную оценку содержания всех жировых элементов в кале можно производить с реактивом Саатгофа в подогретом препарате, а отдельных видов жировых элементов - после остывания препарата. Те капли, которые в остывшем препарате не изменяют свою форму, относятся к нейтральным жирам (капли округлой формы, с гладкими очертаниями, оранжево-красного цвета), а те капли, которые после охлаждения сморщились и стали бугристыми, а также бесцветные кристаллы о виде тонких игл, заостренных с обоих концов, относятся к жирным кислотам. Мыла образуют мелкие ромбические кристаллы и желто-коричневые глыбки, не окрашивающиеся Суданом до нагревания препарата. По данным кафедры клинической диагностики Ленинградского ветеринарного института, у здоровых телят и поросят в возрасте 2—10 дней жировые элементы в подогретом препарате (с реактивом Саатгофа) представлены единичными жировыми каплями не в каждом поле зрения микроскопа; в остывшем препарате нейтральный жир отсутствует или содержится в очень небольшом количестве; жирные кислоты и мыла также содержатся в небольшом количестве (А. М. Смирнов, И. В. Никишина, В. П. Лаухин). У телят и поросят более старшего возраста количество жировых элементов заметно уменьшено. При диспепсии и гастроэнтероколите особенно при тяжелом их течении у телят и поросят, количество жировых элементов в кале резко возрастает, появляется в большом количество нейтральный жир, увеличивается содержание жирных кислот и мыл. У взрослых животных показатели количества жировых элементов в кале малоизученны.

Методика.

Жир в фекалиях выявляют в виде нейтрального жира, жирных кислот и мыл (соли жирных кислот), Жировые элементы определяют следующим образом: на предметном стекле небольшую частицу фекалий тщательно смешивают с реактивом Саатгофа краем покровного стекла. Препарат накрывают покровным стеклом и просматривают для определения нейтрального жира, который обнаруживают в виде оранжево-красных капель разного размера с гладкими краями. Затем препарат нагревают на спиртовке до кипения. После этого немедленно снимают пинцетом покровное стекло, собирают им на середину расплавившиеся капли, снова накрывают тем же покровным стеклом и исследуют под микроскопом в горячем виде и после остывания.

В теплом препарате хорошо видны окрашенные в красный цвет жировые капли. Количественную оценку жировых элементов проводят в теплом препарате при малом увеличении (от 80 до 112 раз) по пятибалльной системе, огромное количество жировых капель во всех полях зрения оценивают пятью крестами (+++++).

Количество жировых капель в теплом препарате характеризует содержание жировых элементов вообще. Отдельные их виды определяют в том же препарате, но после его остывания. Те капли, которые в остывшем препарате не изменяют свою форму, относятся к нейтральным жирам (капли округлой формы, или «лужицы», с гладкими очертаниями, оранжево-красного цвета), а те капли, которые после охлаждения сморщиваются и становятся бугристыми, а также остроконечные бесцветные кристаллы относятся к жирным кислотам и мылам.

Кристаллы жирных кислот имеют форму тонких игл, заостренных с обоих концов, часто они группируются по 2-3-4 вместе, образуя небольшие кучки. Иногда такие иглы, располагаясь радикально, как бы венчиком, окружают капли жира или жирных кислот.

Мыла обнаруживают в виде кристаллов и желто-коричневых глыбок, не окрашивающихся Суданом III до нагревания препарата. Кристаллы мыл короткие, по форме они напоминают вытянутые маленькие ромбики.

Для более точной дифференциации вида жиров применяют также окраску препаратов реактивом Гехта, при этом нейтральный жир и жирные кислоты окрашиваются в коричневато-красный, а мыла - в зеленый цвет-Количественную оценку жировых элементов (нейтрального жира, жирных кислот и мыл) можно также производить в плюсовых единицах, т.е. учитывать, сколько из общего количества жира в препарате приходится на нейтральный жир, кислоты и мыла.

У здоровых телят в возрасте от 2 до 10 дн. жировые элементы в теплом препарате (с реактивом Саатгофа) представлены единичными жировыми каплями, до 10 в поле зрения, нейтральный жир отсутствует или содержится в малом количестве, жирные кислоты и мыла имеются от небольших до средних количеств (А. М. Смирнов, И В. Никишина).

У здоровых поросят до 10-дневного возраста жировые элементы в теплом препарате (с реактивом Саатгофа) обычно обнаруживают по 1-2-4 капли не в каждом поле зрения микроскопа, нейтральный жир отсутствует или содержится в небольшом количестве (В.П. Лаухин).

К элементам, отделяемым кишечной стенкой, относятся, кроме слизи, лейкоциты, эритроциты, клетки кишечного эпителия и др, Слизь микроскопически представляется в виде гомогенной прозрачной массы или тяжей, о которой заложены различные форменные элементы (лейкоциты, эпителий и др.). Наличие большого количества слизи является признаком воспаления слизистой оболочки кишечника. Единичные клетки кишечного эпителия могут встречаться в нормальном кале, наличие больших групп этих клеток, обычно расположенных в слизи, является признаком воспаления слизистой оболочки кишечника. Лейкоциты в нормальном кале встречаются в единичных экземплярах, большие скопления лейкоцитов, лучше определяемые в слизи, свидетельствуют о воспалительном процессе о кишечнике. Эритроциты в норме в кале не встречаются, они обнаруживаются при язвах, кровотечениях, воспалениях.

Элементы слизистой оболочки кишечника - слизь, эритроциты, лейкоциты, эпителиальные клетки, макрофаги, клетки злокачественных опухолей. Клеточные элементы обнаруживают в слизи. Для этого отобранные кусочки слизи ополаскивают в физиологическом растворе и готовят препараты. В препаратах, приготовленных из каловых масс, среди детрита трудно выявить клеточные элементы, так как многие полиморфные частицы детрита имеют сходство с лейкоцитами, эритроцитами и эпителиальными клетками. При недостаточном опыте нередко по таким препаратам дают ошибочное заключение о наличии клеточных элементом там, где их нет.

Слизь имеет вид светлых тяжей, клеточные элементы на фоне ее хорошо различимы.

В норме при микроскопии редко обнаруживается связь с единичными эпителиальными клетками и лейкоцитами. Количество слизи увеличивается при заболеваниях кишечника (колит, дизентерия, язвенные процессы и др).

Клетки цилиндрического эпителия имеют удлиненную фор), несколько расширенную с одного конца, с овальным крупным ядром. Клетки располагаются в слизи в виде одиночно рассеянных экземпляров или же скоплениями и пластами. В них почти всегда выражены дегенеративные изменения: зернистость, вакуолизация, разбухание, в результате чего клетки округляются.

В большом количестве они обнаруживаются при острых воспалительных процессах, особенно катаральных, полилозе кишечника, опухолевых процессах.

Лейкоциты, расположенные и СЛИЗИ группами и тяжами, большими скоплениями, указывают на воспалительные процессы кишечника. Обнаруживаются при дизентерии, амебиозе, язвенном колите, туберкулезе кишечника. Чаше лейкоциты представлены нейтрофилами. Эозинофилы в виде единичных клеток могут находиться среди нейтрофилов. Различают их по обильной равномерной зернистости, занимающей всю клетку, и более темной окраске. Эозинофилы, если их много, как правило, распределяются в слизи неравномерно, скоплениями. Они в больших количествах обнаруживаются при амебиозе и балантидиозе (наряду с кристаллами Шарко—Лейдена), гельминтозах и инвазиях другими кишечными простейшими, при аллергических состояниях.

Макрофаги, полибласты, плазматические клетки различить в нативном препарате невозможно. При необходимости цитологического исследования дифференцировка их производится в препаратах, приготовленных в виде тонких мазков-отпечатков со слизистой оболочки и окрашенных по Романовскому. При цитологическом исследовании препаратов можно судить о наличии острого воспалительного процесса (в препаратах нейтрофилы и эритроциты, макрофаги) и хронического воспалительного процесса (лимфоциты, нейтрофилы, полибласты, плазматические клетки).

Эритроциты неизменные в виде желтоватых дисков в норме не встречаются. Обнаруживаются в кале при язвенных, воспалительных процессах, распаде опухолей и прочих поражениях толстого кишечника. При кровотечениях из более высоких отделов кишечника эритроциты разрушаются. В таких случаях вопрос о присутствии эритроцитов (крови) решается путем химической реакции на скрытую кровь.

Клетки злокачественных опухолей находят в препаратах, приготовленных с тампона или смывов со стенки кишечника, взятых при ректороманоскопии. Необходимо также использовать для цитологического исследования материал (слизисто-кровянистые массы), оставшийся на ректоскопе или на пальцах перчаток при пальцевом обследовании кишечника. Если свежевыделенный кал доставлен с примесью слизисто-кровяных масс, то его промывают в физиологическом растворе и готовят нативные препараты.

Тканевые обрывки иногда встречаются при хронической инвагинации кишечника, дифтеритическом и крупозном его воспалении. Из кристаллических образований в кале встречаются трипельфосфаты, оксалаты, холестерин, кристаллы билирубина и др.

Кристаллические образования. Кристаллы трипельфосфатов (фосфорно-кислая аммиак-магнезия).

Образование их связано с распадом лецитина, нуклеина, в присутствии аммиака как продукта гниения белков и солей пищевого магния.

Щавелевокислая известь (оксалаты кальции) встречается в кале при употреблении в пишу большого количества овощей. В норме соляная кислота желудка превращает оксалаты кальция в хлористый кальций. Присутствие их в кале может служить признаком понижения кислотности желудочного сока.

Кристаллы Шарко-Лейдена имеют форму вытянутого ромба. В кале могут служить указанием на наличие гельминтов и кишечных простейших (при амебиозе, балантидиозе и др.). Чаще встречаются в слизи в сочетании с эозинофилами. Обнаружение их указывает также на аллергический процесс в кишечнике.

Кристаллы билирубина могут быть в сличи жидких испражений при профузных поносах.

Кристаллы гематоидина встречаются в кале после кровотечений и могут быть обнаружены в некротизированных тканевых клочках, например, при язвенных колитах.

Нерастворимые лекарственные препараты в кале: 1) сернокислый барий - мельчайшие крупинки серого цвета; 2) висмут -темно-бурые; почти черные прямоугольники, ромбы и бруски, 3) карболен - черные, угловатой неправильной формы частицы.

Методика

Элементы, отделяемые стенкой кишечника (слизь, эритроциты, лейкоциты, эпителиальные клетки и др.), определяют также микроскопически, при этом их лучше обнаруживают в слизи. Для их определения слизь ополаскивают в изотоническом растворе NaCl и готовят препараты.

Микроскопически слизь представлена в виде гомогенной прозрачной массы или тяжей, в которых заложены различные форменные элементы (лейкоциты, эпителий и др.) Большое количество слизи является признаком воспалительного процесса слизистой оболочки кишечника.

Клетки кишечника эпителия во многих случаях находят вкрапленными в комочки слизи. В большом количестве их обнаруживают при воспалении слизистой оболочки кишечника.

Кристаллические образования, в частности кристаллы триппельфосфатов, напоминающие по форме «гробовые крышки», встречают при усилении гнилостных процессов в кишечнике. Щавелевоуксусный кальций в виде октаэдров, похожих на почтовые конверты, выявляют при понижении кислотности желудочного сока. Кристаллы билирубина в виде очень мелких ромбических или игольчатых образований или зерен оранжевого цвета содержится в норме в меконии новорожденных, фекалиях молодняка в первые дни жизни, а у взрослых животных регистрируют при быстром прохождении химуса и фекалий по кишечнику. Кристаллы гематоидина находят в фекалиях после кровотечений, форма их игольчатая или ромбическая, цвет красновато-коричневый (см. таб. 3, 4).

 

 

Рис. 1. Микроскопия фекалий:

1-переваримая клетчатка. 2 - непереваримая клетчатка. 3 - растительный сосуд, 4 крахмал внеклеточный. 5 - крахмал внутриклеточный, 6 - мышечные волокна неизмененные, 7 - мышечные волокна измененные, 8 - нейтральный жир, 9 -кристаллы жирных кислот. 10 - мыла, 11 - эритроциты. 12 -лейкоциты, 13 – йодофильная флора.

Рис. 2. Микроскопия фекалий:

1-мышечные волокна в испражнениях (нативный препарат, ув.140)сс поперечной (1), продольной (2) исчерченностыо и без нес (3): 11 - нейтральный жир в испражнениях (окраска Суданом-3.ув.140).

Таблица № 3.

Микроскопия кала травоядных

Кормовые остатки	Нормативы
Детрит	в небольшом количестве
Слизь	в небольшом количестве
Форменные элементы крови: - лейкоциты • эритроциты	единичные в поле зрения отсутствуют
Эпителиальные клетки	единичные в поле зрения
Крахмал	отсутствует
Переваримая клетчатка	отсутствует
Непереваримая клетчатка	в умеренном количестве

Таблица № 4.

Кормовые остатки	Нормативы
Мышечные волокна	в небольшом количестве
Соединительная ткань	в небольшом количестве
Нейтральный жир	отсутствует
Мыла	отсутствуют
Кристаллы жирных кислот	отсутствуют
Слизь	скудно
Форменные элементы крови: - лейкоциты - эритроциты	единичные в поле зрения отсутствуют
Клетки эпителия	единичные в поле зрения

Методика

Определение реакции фекалий. Красную и синюю лакмусовую бумагу, а лучше универсальную индикаторную бумагу смачивают дистиллированной водой и прикладывают к фекальным массам. При кислой реакции синяя бумажка краснеет, при щелочной - красная синеет, при нейтральной - обе бумажки не изменяют цвета. Изменение цвета универсальной индикаторной бумаги сравнивают с цветной шкалой, имеющей цифровые обозначения рН.

Наиболее точно реакцию фекалий можно определить с помощью рН-метра (разводят фекалии дистиллированной водой в соотношении 1:10).

Ферменты.

В кале содержится ряд ферментов. Наибольшее практическое значение имеет определение энтерокиназы и щелочной фосфотазы, количественное определение которых используется как биохимический тест для оценки деятельности кишечника.

Определение щелочной фосфатазы (по Фоминой, Михлину, Шлыгину). Щелочная фосфатаза - характерный кишечный фермент, присутствующий в ферменте и слизистой оболочке тонкой кишки в больших количествах. В других пищеварительных секретах фермента содержится мало.

Принцип. В качестве субстрата используют фенолфталеинфосфат натрия, при инкубации которого с ферментом освобождается фенолфталеин, дающий красную окраску в щелочной среде. Появившаяся окраска визуально сравнивается с окраской стандартного щелочного раствора фенолфталеина. Определение проводится в условиях, оптимальных для действия щелочной фосфотазы в присутствии активатора (0,001 М Мg+, при температуре 37° и при рН 10,0).

Реактивы. 1. 0,1% раствор фенолфталеинфосфата натрия в 0,1 н аммиачном буфере рН 10,1. Для приготовления буфера смешивают 1 объемную часть 0,1 н раствора хлорида аммония (NH4Cl) и 4 части 0,1 н раствора аммиака (проверенного титрометрически). Исходные для буферной смеси растворы удобнее приготовлять и сохранять в виде 1 н концентрации и перед употреблением разбавлять в 10 раз. 2. 1,5% раствор сульфата магния, 3. Стандартный раствор фенолфталеина: смесь 1 мл 0,05% полуспиртового раствора (50 частей спирта + 46 частей воды) фенолфталеина, 1 мл 0,1 н раствора аммиака и 4 мл 0,1 н раствора хлорида аммония. Степень окраски раствора проверяют в фотоэлектроколориметре. Оптическая плотность при зеленом светофильтре и толщине слоя 1 см должна быть 0,17-0,19. Стандартный раствор сохраняют в темном месте в посуде, не подвергшейся выщелачиванию, в течение 1-2 нед. 4. Этиловый спирт.

Оборудование. 1. Термостат на 37-38°. 2. Центрифуга на 2500-3000 об/мин, с центрифужными стаканами емкостью 10-25 мл. 3.Ступки фарфоровые емкостью 50-100 мл. 4. Градуированные пипетки емкостью 2,5 и 10 мл. 5. Пробирки и штативы, 6. Кварцевый песок. 7.Фотоэлектроколориметр.

Ход определения. Готовят вытяжку из фекалий 1:10 (см. определение энтерокиназы). Степень разведения вытяжки зависит от ожидаемых результатов анализа. При исследовании фекалий взрослых берут разведение 1:30 (1 часть вытяжки и 2 части дистиллированной воды). При исследовании фекалий детей первых 2-3 лет жизни разведение 1:200 или 1:1000, т. е. Вытяжку дополнительно разводят в 20 или 100 раз. Определение начинают с ориентировочной пробы: к 0,5-1 мл вытяжки добавляют равный объем раствора фенолфталеинфосфата в аммиачном буфере (реактив № 1). Если в течение 2 мин появляется значительное розовое окрашивание то вытяжку разводят дополнительно в 10 раз и снова испытывают тем же образом. В случае появления розовой окраски разводят вновь. Отсутствие окраски в течение 2 мин свидетельствует о достаточной степени разведения материала (исходное разведение).

Для исследования берут 8-10 пронумерованных пробирок из бесцветного стекла одинакового диаметра. В каждую пробирку, за исключением первой, наливают по 1 мл дистиллированной воды. В первую пробирку наливают 1 мл исследуемого раствора в исходном разведении, установленном в ориентировочной пробе. Во вторую пробирку наливают 2 мл исследуемого раствора и хорошо перемешивают с водой, набирая в пипетку жидкость и выдувая обратно. После этого 2 мл смеси из второй пробирки переносят в третью и т.д. до конца ряда. Из последней пробирки 2 мл жидкости отбрасывают. Таким образом, получают ряд разведений с уменьшением количества ферментного материала в каждой пробирке на 1/3. Во все пробирки добавляют по капле 1,5% раствора МgSO4 (реактив № 2), служащего активатором, и по 1 мл реактива № 1. Пробирки закрывают пробками. перемешивают и помещают в термостат при 37а С на час. По истечении времени наблюдается постепенное изменение окраски от интенсивно-красной на одном краю до полного отсутствия красного окрашивания на другом. Поднося пробирку со стандартным раствором фенолфталеина (2 мл), нахолят степень окраски в ряду, равную стандартной.

Количество фермента, вызывающее в описанных выше условиях появление такой окраски, принято за единицу фосфатазы.

Расчет. Количество единиц фосфатазы в 1 г исследуемого материала по формуле: Е=Р/а, где а - количество разведенной вытяжки в пробирке со стандартной окраской, Р - предварительное разведение материала.

Клиническое значение. В фекалиях здоровых взрослых людей щелочная фосфатаза содержится в количестве до 450 ед/г. Увеличение ее в фекалиях, так же как и увеличение содержания энтерокиназы, связано с изменением функции толстых кишок и деятельности микрофлоры. При кишечных заболеваниях иногда отмечают 1500-3000 ед/г щелочной фосфатазы. Повышение количества этих ферментов указывают на более тяжелые нарушения функции кишечника. У детей содержание щелочной фосфатазы в фекалиях выше, чем у взрослых. У новорожденных оно составляет в среднем 4500 ед/г, у детей в возрасте около года - 5000-20000, в среднем 12000 ед/г, далее оно уменьшается и в возрасте 10-12 лет находится на том же уровне, что и у взрослых.

Органов пищеварения

При нарушении функции различных отделов желудочно-кишечного тракта появляются характерные изменения кала, получившие название копрологических синдромов, которые приводятся ниже

Недостаточность жевания проявляется наличием в кале большого количества непереваренных частиц корма (зерна овса, стебли растений у травоядных; куски мяса, жира, пленки соединительной ткани у плотоядных животных).

Недостаточность желчеотделения проявляется следующими признаками: цвет кала белый, глинистый, серовато-белый, что особенно хорошо заметно у молодняка молочного возраста, при этом реакция на билирубин и стеркобилин отрицательная или слабоположительная; в кале у телят молочников в большом количестве появляются жирные кислоты; мыла и нейтральный жир обнаруживаются в небольшом количестве; количество же аммиака увеличивается примерно в два раза при нормальном содержании органических кислот; консистенция кала чаще мазевидная, его запах зловонный, реакция кислая, часто щелочная вследствие вторичных гнилостных процессов.

Недостаточность панкреатического сокоотделения характеризуется тем, что кал у телят - молочников неоформленный, чаще мазевидной консистенции; запах кала гнилостный, реакция чаще щелочная. Из жировых элементов резко увеличено количество нейтрального жира; жирные кислоты и мыла содержатся в незначительном количестве или отсутствуют. Количество аммиака в кале резко увеличено при незначительном повышении органических кислот в нем.

Недостаточность переваривания в тонком кишечнике сопровождается следующими признаками: консистенция кала у телят жидкая, его цвет желтый, запах слабогнилостный, реакция слабощелочная; в кале в большом количестве обнаруживаются нейтральный жир, жирные кислоты и мыла; количество аммиака и органических кислот в кале может быть не увеличено при диарее, но соотношение между ними изменено в сторону щелочности.