Общая характеристика диссертационной работы

СОДЕРЖАНИЕ

НОРМАТИВНЫЕ ССЫЛКИ

В настоящей диссертации использованы ссылки на следующие нормативные документы:

ГОСТ 7.1-2003 ГОСТ 7.32-2001 Система стандартов по информации, библиотечному и издательскому делу. Библиографическая запись. Библиографическое описание. Общие требования и правила составления. Отчет о научно-исследовательской работе

ГОСТ 7.9-95 (ИСО 214-76) Система стандартов по информации, библиотечному и издательскому делу. Реферат и аннотация. Общие требования

ГОСТ Р 7.0.12- 2011 Система стандартов по информации, библиотечному и издательскому делу. Библиографическая запись. Сокращение слов и словосочетаний на русском языке. Общие требования и правила

ГОСТ 8.417-2002 Государственная система обеспечения единства измерений. Единицы величин.

ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Технические условия

ГОСТ 3885-73 Реактивы и особо чистые вещества. Правила приемки, отбор проб, фасовка, упаковка, маркировка, транспортирование и хранение 

ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 13646-68 Термометры стеклянные ртутные для точных измерений

ГОСТ 23932- 90Е Посуда и оборудование лабораторные стеклянные

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

СТ РК ГОСТ Р 15.011-2005 Система разработки и постановки продукции на производство. Патентные исследования. Содержание и порядок проведения

ГОСТ 24104-2001 Весы лабораторные общего назначения и образцовые. Общие технические условия

СТ РК ИСО/МЭК 17025-2007 Общие требования к компетентности испытательных и калибровочных лабораторий

Кодекс РК № 193-IV Закон РК «О здоровье народа и системе здравоохранения» от 18 сентября 2009 г.

Приказ МЗ СР РК № 392 «Об утверждении надлежащих фармацевтических практик» от 27 мая 2015 г.

WHO Guidelines on Good Practice for the cultivation and harvesting (GACP) of medicinal plants. World Health Organization

CPMP/QWP/2820/00 & EMEA/CVMP/815/00: Guideline on Specifications: Test Procedures and Acceptance Criteria for Herbal Substances. Herbal Preparations and Herbal Medicinal Products/ Traditional Herbal Medicinal Products

CPMP/QWP/2819/00 & EMEA/CVMP/814/00: Guideline on Quality of Herbal Medicinal Products/Traditional Herbal Medicinal Products

CPMP/ICH/2736/99: ICH Topic Q 1 A (R2) Stability Testing of new Drug Substances and Products

Приказ МЗ СР РК от 25 августа 2015 г № 680 «Об утверждении Правил производства и контроля качества, а также проведения испытаний стабильности и установления срока хранения и повторного контроля лекарственных средств, изделий мед. назначения и медтехники»

Приказ МЗ РК от 19 ноября 2009 г № 754 «Об утверждении Правил составления, согласования и экспертизы нормативно-технического документа по контролю за качеством и безопасностью лекарственных средств»

Решение Совета Евразийской экономической комиссии от 3 ноября 2016 г № 76 «Требования к маркировке лекарственных средств для медицинского применения и ветеринарных лекарственных средств»

Решение Совета Евразийской экономической комиссии от 26 января 2018 года № 15 «Об утверждении Правил надлежащей практики выращивания, сбора, обработки и хранения исходного сырья растительного происхождения».

ОБОЗНАЧЕНИЯ И СОКРАЩЕНИЯ

В настоящей диссертации использованы следующие термины с соответствующими обозначениями и сокращениями:

ВВЕДЕНИЕ

Практическая значимость

Анализировали сырье корни ферулы заилийской (Ferula transiliensis (Herder) Pimenov). Для отечественных товаропроизводителей будет предложено стандартизированное в соответствии с требованиями Государственной фармакопеи РК лекарственное растительное сырье, которое может быть источником для создания нового лекарственного средства.

Основные положения диссертационного исследования, выносимые на защиту:

- технология заготовки и хранения отечественного лекарственного растительного сырья Ferula transiliensis (Herder) Pimenov;

- стандартизация и исследование стабильности отечественного лекарственного растительного сырья Ferula transiliensis (Herder) Pimenov.

Сведения о публикациях

      По результатам исследований опубликовано 2 научных работ, в том числе:

- статьи в журналах, рекомендованных Комитетом по контролю в сфере образования и науки Министерства образования и науки РК – 1;

- статьи на международных научно-практических конференциях (Чехия) – 1.

Ботаническое описание

Стебли в числе нескольких, 40–70 см высотой, круглые, гладкие, как и листья, сизые и голые, вверху немного ветвящиеся. Прикорневые листья собраны по нескольку, черешковые, черешки круглые, около пластинки сочлененные, последняя в очертании широкоромбическая, многократно перисто-рассечённая на мелкие ланцетовидные или ланцетовидно-яйцевидные, толстоватые, 3–10 мм длиной, дольки, иногда надрезанные на несколько лопастей. Стеблевые листья с уменьшенной пластинкой сидят на ланцетовидных влагалищах, верхние без пластинок. Зонтики 10—18-лучевые, без обвёрток и обвёрточек, лучи неравные, до 8 см длинной, растопыренные, зонтики 10–20 цветковые. Лепестки 1мм длинной. Плоды эллиптические, сизоватые, 6–7 мм длинной, спинные ребра их нитевидные, едва выдающиеся. Фаза бутонизации происходит с мая по июль, цветение - в июле, плодоношение - в августе [27-29].

Рисунок 2 - Ферула заилийская (Ferula transiliensis (Herder) Pimenov)

Химический состав Ферула заилийская (Ferula transiliensis (Herder) Pimenov )

Растение содержит эфирное масло (2,54–19,6%), флавоноиды (2,44–2,88%), фенолкарбоновые кислоты [30]. В массивных корнях содержатся ароматические смолы, большая часть которых состоит из сложных эфиров кислоты феруловой и камеди. Эфирное масло содержит соединения серы, некоторое количество терпенов, сесквитерпены, кумарины, карбоновые кислоты (уксусную и ундециловую) и сульфаниловую кислоту [7]. Резкий запах обусловлен содержанием 2-бутил-1-пропенил дисульфида и некоторых других дисульфидов, которые разрушаются при тепловой обработке [8, 9]

1.2 Современные аспекты создания растительных лекарственных препаратов: требования к качеству

На сегодняшний день во всем мире фармацевтический рынок является наиболее динамичным и быстрорастущим. Повышение благосостояния населения, экологическая обстановка в современном мире, рост численности, старение населения и ожирение способствуют росту спроса на лекарственные препараты, в том числе на фитопрепараты. Популяризация и развитие фитотерапии содействовали расширению значительной доли рынка лекарственных средств. По данным ВОЗ около 60 % мирового населения использует ЛР и растительные ЛП для лечения различных заболеваний [97]. Широкий спектр фармакологической активности, возможность длительного применения у всех возрастных групп и безопасность при достаточной эффективности и доступности обусловливают широкое применение фитопрепаратов.

В условиях импортозависимости фармацевтического рынка Казахстана создание новых лекарственных средств на основе отечественного ЛРС является актуальной задачей фармацевтической отрасли. Территориально-географическое положение Казахстана располагает огромным запасом лекарственных растений, которые широко используются в народной медицине. Проведенный анализ фармацевтического рынка фитопрепаратов РК показывает, что около 56 % фитопрепаратов ввозятся из зарубежья [98].

Изучением дикорастущих лекарственных растений Казахстана занимались и в настоящее время занимаются ученые КазНУ им. аль-Фараби, КазНМУ им. С.Д. Асфендиярова, АО «Международный научно-производственный холдинг «Фитохимия» и Института химических наук им. А.Б. Бектурова.

Производство фитопрепаратов в Казахстане напрямую связано с обеспеченностью фармацевтической промышленности растительным сырьем. Обеспечение производства стабильной сырьевой базой, а также обеспечение качества лекарственного растительного сырья возможно путем выращивания лекарственных растений в культуре с выдерживанием требований GACP.

Вопросы совершенствования лекарственной политики страны для обеспечения высокого качества жизни населения отражены в Кодексе о здоровье народа и системе здравоохранения, в Стратегии развития РК до 2050 года и Стратегическом плане МЗ РК на 2017-2021 гг. ГФ РК устанавливает показатели качества и безопасности лекарственных средств, которые государство гарантирует своим гражданам.

Согласно Стратегическому плану развития РК поставлена задача внедрения до 2025 года на всех фармацевтических предприятиях международных стандартов качества, перехода от системы контроля качества готового продукта к системе, обеспечивающей качество в процессе разработки и производства.

В официальной медицине растительные ЛП широко используются для лечения болезней сердечно-сосудистой, дыхательной, центральной нервной систем, ЖКТ и других заболеваний. Перспективны растительные ЛП, в частности, при терапии хронических заболеваний, в том числе при желудочно-кишечных патологиях. В лечении функциональных нарушений пищеварительной системы широко используются слабительные средства растительного происхождения на основе антраценпроизводных [99, 100].

В связи с этим, изучение новых отечественных видов ЛРС произрастающих на территории Казахстана является перспективной задачей.

Выводы по первому разделу

С устойчивым увеличением интереса потребителей к фармацевтической продукции растительного происхождения за последние десятилетия, возрастает актуальность разработки и выпуска оригинальных фитосубстанций для производства отечественных конкурентноспособных лекарственных средств. Несмотря на развитие отечественной фармацевтической промышленности, которое имеет большое стратегическое, социальное и экономическое значение для Республики Казахстан, по-прежнему значимой проблемой остается импортозависимость.

Проведенный анализ научно-литературных данных показал, что растения рода Ferula L. имеют большой потенциал в применении не только для лечения туберкулёзе лёгких, но и для борьбы с такими заболеваниями, как сифилис, сахарный диабет, болезнях печени и злокачественных опухолях.

На территории Казахстана произрастает 51 официальных видов рода Ферула (Ferula L.), 15 видов применяются в народной медицине: F. assa-foetida, F. caspica, F. diversivittata, F. furulaeoides, F. iliensis, F. karelinii, F. pallid, F. penninervis, F. sumbul, F. songorica, F. schair, F. teterrima, F. transiliensis, F. tschimganica, F. tenuisecta. Из перечисленных видов в качестве объектов исследования наибольший научно-практический интерес представляет ферула заилийская (Ferula transiliensis (Herder) Pimenov) поскольку данный вид является малоисследованным.

 В современных реалиях постоянных внешних вызовов укрепление фармацевтического сектора позволит обеспечить лекарственную безопасность страны. Создание конкурентоспособных лекарственных препаратов путем полномасштабного изучения и внедрения новых видов лекарственного растительного сырья и разработки фитопрепаратов на их основе является актуальным. Таким образом, изучение перспективных отечественных видов растений в качестве лекарственного растительного сырья, а также применение международных стандартов и практик для их прозводства и стандартизации – одна из значимых задач фармацевтической отрасли [8].

Объекты исследования

Объекты исследования:

– подземная часть ферулы заилийской (Ferula transiliensis (Herder) Pimenov) дикорастущего (Рисунок 3), собранные с ранней весны и до поздней осени 2020 года на горных склонах Заилийского Алатау.

Рисунок 3 – Внешний вид ферулы заилийской (Ferula transiliensis (Herder) Pimenov) дикорастущей

- основным объектом исследования является растительное сырье - корень ферулы заилийсой (Ferula transiliensis (Herder) Pimenov ) (Рисунок 4), собранные с ранней весны и до поздней осени 2020 года на травянистых горных склонах Заилийского Алатау.

Растения идентифицированы специалистами РГП «Института ботаники и фитониринга» Республики Казахстан справка (Приложение А).

Рисунок 4 – Высушенный корень ферулы заилийской (Ferula transiliensis (Herder) Pimenov)

Методы исследования

Выводы по третьему разделу

В целях получения качественного лекарственного растительного сырья для применения в фармацевтической отрасли, была проведена разработка технологии заготовки растений ферулы заилийской. на основе руководящих принципов GACP и «Правил надлежащей практики выращивания, сбора, обработки и хранения исходного сырья растительного происхождения» Совета Евразийской экономической комиссии.

Результаты исследования влияния режима сушки на сохранение биологически активных веществ в лекарственном растительном сырье показали, что при воздушно-теневой сушке теряется их большая часть, а наиболее рациональным режимом является сушка при температуре 18-25 ^оС.

Согласно результатам исследования разработана оптимальная технология сбора, обработки и хранения лекарственного растительного сырья ферулы заилийской, которая включает в себя сбор подземной части Ferula transiliensis (Herder) Pimenovс начала созревания плодов и после цветения, выкопыванием подземной части растения; сушку собранных растений в нормальных условиях до остаточной влажности в лекарственном растительном сырье – не более 13 %; оценку качества высушенного сырья в соответствии с нормативными документами и упаковку 50 г растительного сырья надлежащего качества.

Разработанная технология заготовки корня ферулы заилийскойбыла успешно валидирована. Данные по всем контрольным показателям находятся в диапазоне 6σ на контрольных картах параметров, значения индексов возможности процесса выше 1 (Ср ≥ 1, Срk ≥ 1), что свидетельствует о статистической управляемости процесса. Тест нормальности Андерсона-Дарлинга на всех критических точках выше 0,05, то есть выборки нормально распределены и отсутствуют особые случаи вариации. Значительных отклонений в процессе не обнаружено, процесс стабилен во времени и находится в пределах регламентируемых норм.

На основе результатов валидационных исследований были разработаны и утверждены отчеты валидации, а также лабораторные регламенты на технологию заготовки лекарственного растительного сырья ферулы заилийской.

Вывод по стабильности

Промежуточные результаты долгосрочных испытаний стабильности лекарственного растительного сырья ферулы заилийской показали, что за исследуемый период качественный и количественный состав биологически активных веществ находится в пределах регламентиремых норм. Кроме того, при помощи регрессионного анализа данных был установлен предварительный срок хранения для лекарственного растительного сырья в вакумной упаковке – не менее 12 месяцов.

Таким образом, в ходе установления наиболее рациональной упаковкой для хранения лекарственного растительного сырья корни ферулы заилийской, при условиях 25 ± 2°C и 50 ± 5% RH, было определено, что, пакеты из краф-бумаги и вакуумная упаковка, являются приемлемыми. Кроме того, установлен предварительный срок хранения для корня ферулы заилийской (12 месяца) в течение которого ЛРС соответствует показателям качества спецификации стабильности.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Диссертационная работа посвящена изучению и стандартизации лекарственного растительного сырья ферулы заилийской, разработке надлежащей технологии его сбора, обработки и хранения в соответствии с требованиями международных стандартов и нормативных документов.

В современных реалиях постоянных внешних вызовов укрепление фармацевтического сектора позволит обеспечить лекарственную безопасность страны. Создание конкурентоспособных лекарственных препаратов путем полномасштабного изучения и внедрения новых видов лекарственного растительного сырья и разработки фитопрепаратов на их основе является актуальным.

Растения рода Ferula L. имеют большой потенциал как источников биологически активных веществ для разработки лекарственных средств со спазмолитическим, антиоксидантным, противомикробным, противоопухолевым действием.

На территории Казахстана распространены 51 официальных видов рода Ферулы (Ferula L.), из которых наибольший научно-практический интерес представляют эндемический многолетний вид ферула заилийская (Ferula transiliensis (Herder) Pimenov).

С целью обеспечения надлежащего качества растительного сырья впервые разработана надлежащая технология сбора, обработки и хранения корня ферулы заилийской в соответствии с руководящими принципами стандарта «Надлежащая практика культивирования и сбора исходного сырья растительного происхождения». Разработанная технология заготовки успешно прошла валидацию на всех критических точках, регламентируемые контрольные показатели находятся в диапазоне 6σ на контрольных картах и свидетельствуют о статистической управляемости процесса.

Разработанная технология заготовки и определень оптимальный период сбора растительного сырья. Способ заготовки апробирована на предприятии ТОО «ФитОлеум», на ее основе разработан лабораторный регламент.

На основании сравнительного анализа частных статей фармакопей мира частных фармакопейных статей на ферулу составлены проекты спецификации качества ЛРС ферулы заилийской (Ferula transiliensis (Herder) Pimenov). Определены фармакопейные методики для апробации на объектах исследования, из которых отобраны наиболее оптимальные и влючены в спецификации качества. Методики идентификации и количественного определения суммы эфирных масел успешно валидированы, согласно фармакопейным валидационным характеристикам.

Проведена стандартизация лекарственного растительного сырья ферулы заилийской, в ходе которой разработаны спецификации качества на соответствующие объекты и проекты аналитических нормативных документов.

В рамках установления срока хранения лекарственного растительного сырья ферулы заилийской (Ferula transiliensis (Herder) Pimenov) провели исследования стабильности на протяжении 12 месяцев в условиях долгосрочных испытаний 25 ± 2°C и 50 ± 5% RH. Промежуточные результаты долгосрочных испытаний стабильности лекарственного растительного сырья ферулы заилийской показали, что за исследуемый период качественный и количественный состав биологически активных веществ находится в пределах регламентиремых норм. Кроме того, при помощи регрессионного анализа данных был определен предварительный срок хранения для лекарственного растительного сырья ферулы заилийской (не менее 24 месяца в вакумной упаковке).

Таким образом, в результате последовательного решения поставленных задач впервые проведена разработка технологии заготовки лекарственного растительного сырья ферулы заилийской в рамках GACP, а также стандартизация и исследование стабильности в рамках расширения номенклатуры растительных субстанций для производства конкурентоспособных отечественных лекарственных средств.

Приложение А

Растения идентифицированы специалистами РГП «Института ботаники и фитониринга» Республики Казахстан, справка № 01-08/172 от 01.07.2020 г.

Приложение Б

Отчет валидации технологического процесса сбора, обработки и хранения

 корня Ферулы заилийской

Приложение В

Лабораторный регламент по сбору, обработке и хранению корня Ферулы заилийской

Приложение Г

Спецификация качества на лекарственное растительное сырье корни Ferula transiliensis (Herder) Pimenov

 Приложение Д

Результаты испытаний стабильности лекарственного растительного сырья корня ферулы заилийской (Ferula transiliensis (Herder) Pimenov), серия 1 (собранные ранней весной)

Показатели