Учет и интерпретация результатов испытания

Наличие роста микроорганизмов определяют визуально в проходящем свете:

- если испытуемое ЛС вызывает помутнение питательной среды и визуально нельзя определить наличие микробного роста, то через 14 сут. после начала испытания переносят помутневшую среду в пробирки с аналогичной стерильной средой и инкубируют исходные и повторные посевы.

- при отсутствии роста микроорганизмов, считают, что испытуемый ЛП соот-ет требованиям испытания на стерильность.

- при обнаружении роста МО (визуально по наличию мутности, осадка, хлопьев и подтверждаемого микроскопическим исследованием) ЛП не соот-ет требованиям испытания на стерильность.

 

Испытание на пирогенность. Область применения, методика выполнения

Испытания, оценка результатов.

Область применения – инъекционные р-ры и фарм. субстанции, из которых они изготавливаются.

Методика выполнения.

Испытуемое ЛС вводят в ушную вену кролика, если в ФС не указан другой путь введения. Испытание проводят на группе из 3 кроликов, измерения температуры после введения ЛС проводят с интервалом не более 30 минут на протяжении трех часов. При других путях парентерального введения – на протяжении пяти часов.

Учет результатов.

По окончании каждого из этапов испытания определяют макс. изменение температуры тела каждого кролика по сравнению с исходным значением. Изменение температуры тела животного ниже исходной величины принимают за нулевое и не учитывают.

Определяют сумму индивидуальных максимальных повышений температур, полученные на разных этапах испытания, последовательно суммируют, и рез-ты сравнивают с уровнями, указанными в таблице ФС.

ЛС признают пирогенным, если рез-т на втором или последующих этапах испытания выше, чем величины, указанные в таблице, а также если в рез-те четырех этапов испытания зарегистрировано индивидуальное повышение температуры свыше 0,5ºС более, чем у трех кроликов из двенадцати.

 

Испытание на аномальную токсичность. Область применения, методика

Выполнения испытания, оценка результатов.

Область применения – в-ва природного происхождения, ЛС, получаемые из крови, органов, тканей человека или животного, растительного сырья, микроорганизмов и продуктов их жизнедеятельности при производстве из них готовых ЛФ, в основном, для парентерального применения.

 

Позволяет определить повышенную токсичность ЛС за счет появления продуктов разложения или нежелательных примесей при изменении процесса производства, не предусмотренных регламентом производства, транспортирования или хранения.

 

Методика испытания. Испытания проводят на 5 здоровых белых мышах. ЛС растворяют или разводят NaCl и вкалывают в хвостовую вену животного. (2 особи морских свинок, вводят максимальную разовую дозу).

Оценка результатов. Если погибает 1 животное, опыт повторяют ещё на 5 особях (4 – на морских свинках). Если умирает больше 1 животного - ЛС не прошло испытание.

 

При испытании ИБП имеют значения также: потеря массы тела (не должно быть), признаки интоксикации (не должно быть).

 

Испытание на микробиологическую чистоту. Область применения, методика

Выполнения испытания, оценка результатов.

Область применения – нестерильные ЛС (таблетки, капсулы, гранулы, растворы, суспензии, сиропы, мази, суппозитории и др., а также вспомогательные вещества), в т.ч. в ЛС, содержащих живые микроорганизмы, а также вспомогательные вещества и полупродукты.

 

В нестерильных ЛС допускается лимитированное кол-во микроорганизмов при отсутствии определенных видов, представляющих опасность для здоровья человека.

 

Методика испытания.

1. Метод посева на питательные среды

2. Метод мембранной фильтрации

3. Метод наиболее вероятного числа

Инкубируют и подсчитывают выросшие колонии, выявляют специфические микроорганизмы.

Оценка результатов. После окончания времени инкубации просматривают посевы и отмечают появление типичного роста тест-микроорганизмов в контрольных чашках и пробирках (без препарата) и испытуемых (с различными разведениями препарата).

- если учет затруднен (помутнение или изменение окраски жидкой среды в результате взаимодействия ЛС с питательной средой), делают пересевы на агаризованные среды.

- при наличии роста E. coli, S. abony, P. aeruginosa, S. аureu s на питательных средах делают вывод об отсутствии антимикробного действия ЛП, обозначают знаком «+».

- при уменьшении кол-ва колоний на чашках или отсутствие роста тест-микроорганизмов, делают заключение о наличии у ЛП антимикробного действия, знаком «–».