Сравнительная характеристика испытаний на пирогенность и бактериальные эндотоксины.

	Испытание не пирогенность	Испытание на бактериальные эндотоксины
Область	ЛП, предназначенные для парентерального применения и фармацевтических субстанциях, используемых для их изготовления
Методика	Измеряют температуру тела у кроликов до и после инъекции ЛС	Проводят с помощью ЛАЛ- (специфический) или ТАЛ- реактива. - гель-тромб метод, основанный на образовании геля; - турбидиметрический метод, основанный на помутнении реакционной смеси после расщепления субстрата, содержащегося в ЛАЛ-реактиве; - хромогенный метод, основанный на появлении окрашивания после расщепления синтетического пептид-хромогенного комплекса.
Требования к стерильности	Посуда для разведения, шприцы и иглы для инъекций должны быть стерильными и апирогенными, что обеспечивается нагреванием при температуре 250ºС (30 мин.) или 200ºС (60 мин.)	Стеклянная и пластиковая посуда, используемая в ЛАЛ-тесте, не должна содержать бактериальные эндотоксины в количествах, определяемых в тесте.
Оценка рез-тов	Определяют макс. изменение температуры тела по сравнению с исходным, суммируют значения на разных этапах и сравнивают с таблицей в ОФС. ЛС не прошло испытание, если рез-те на 2 или последующих этапах испытания выше, чем величины, указанные в таблице, а также в том случае, если в рез-те 4 этапов испытания зарегистрировано индивидуальное повышение температуры свыше 0,5ºС более, чем у 3 кроликов из 12.	ЛС прошло испытание, если определенное в эксперименте среднее значение содержания БЭ меньше значения предельного содержания БЭ указанного в ФС.

 

Количественное определение активности антибиотиков. Область применения,

Методика выполнения испытания, оценка результатов.

Антимикробная активность антибиотиков выражается в ЕД или «мкг» на единицу объема препарата. Для большинства антибиотиков 1 ЕД или 1 мкг соответствуют 1 мкг активного вещества (кислоты или основания).

Методика выполнения испытания.

1. С использованием трехдозного варианта метода диффузии в агар.

В качестве ответа принимают диаметр зоны угнетения роста микроорганизма в мм.

2. С использованием стандартной кривой.

Закапывают р-р контрольной конц-ции в 3 лунки в 12 чашек, в 3 другие лунки закапывают р-р одной из концентраций стандартного образца, чередуя его с раствором контрольной концентрации. После инкубации в термостате измеряют диаметры зон угнетения роста тест–микробов, вычисляют среднюю величину диаметров зон для раствора контрольной концентрации стандартного образца в каждой группе из 3 чашек, затем среднюю величину диаметров зон для раствора контрольной концентрации стандартного образца из всех 12 чашек (общую среднюю из 36 зон). По разности между средней величиной зоны контрольной концентрации, установленной из 12 чашек, и средней величиной зоны контрольной концентрации, установленной из 3 чашек с каждой отдельной концентрацией, находят поправку к величине зоны данной концентрации. Найденную поправку прибавляют к средней величине диаметра зоны данной концентрации, если она положительная, и вычитают, если она отрицательная.

Оценка результатов.

Расчет антимикробной активности испытуемых образцов может быть проведен 2 способами: графическим методом или путем непосредственного расчета с использованием соответствующих формул.

 

Биологические испытания. Область применения, виды тестов.

Испытание на стерильность.

Проводят в асептических условиях двумя методами: методом прямого посева или методом мембранной фильтрации.

Область применения. Различные ЛC, которые в соответствии с НД или ФС должны быть стерильными:

- препараты для инъекций,

- инфузий,

- глазных капель,

- пленок,

- фармацевтических субстанций

- вспомогательных в-в, включая биологические лекарственные препараты и их растворители.

 

Испытание на пирогенность.

Область применения – инъекционные р-ры и фарм. субстанции, из которых они изготавливаются.

Испытуемое ЛС вводят в ушную вену кролика.