Опыт 1. Сопоставление окислительно-восстановительных потенциалов рибофлавина.

1. В пробирку с 1 мл воды добавьте 0,5 мл 0,025% раствора рибофлавина и по каплям 0,01% раствор метиленового синего до появления сине-зеле­ного окрашивания.

2. Внесите в пробирку кусочек цинка и 2-3 капли концентрированной соляной кислоты. Отметьте постепенное изменение окраски.

3. Жидкость бледно-желтого цвета слейте в другую (желательно широкую) пробирку. Оцените цвет жидкости в пробирке через 20-25 минут.

 

Объясните наблюдаемые явления.

 

Опыт 2. Открытие активности альдегиддегидрогеназы в молоке.

1. Налейте в две пробирки по 3 мл молока из пронумерованных колбочек. В одной из них молоко кипяченое, в другой - нет.

2. В обе про­бирки внесите по 6 капель 0,4%-ного раствора формальдегида и несколько капель 0,01%-ного раствора метиленовой сини (до появления голубого окрашивания).

3. Пробирки встряхните и быстро закройте пробками для того, чтобы создать относительно анаэробные условия.

4. Поместите пробирки в водяную баню (37^оС) и отметьте постепенное обесцвечивание метиленовой сини через 10-15 минут в одной из пробирок.

5. После обесцвечивания содержимое пробирки несколько раз встряхните и наблюдайте за изменением цвета.

 

Определите, в какой пробирке содержалось некипяченое молоко? Объясните, почему Вы сделали такой вывод? Почему после встряхивания обесцвеченной пробирки произошло изменение цвета?

 

 

Опыт 3. Качественная реакция определение креатинина в мышцах.

1. Разотрите в ступке 5 грамм мышечной ткани.

2. Добавьте примерно 20 мл воды, через 15 минут экстрагирования, отфильтруйте через бумажный фильтр.

3. К полученному прозрачному фильтрату мышечной ткани добавьте 1 мл трихлоруксусной кислоты до выпадения осадка белков и вновь отфильтруйте раствор через бумажный фильтр.

4. К 1-2 мл фильтрата мышечной ткани, свободного от белков, добавьте 3 капли насыщенного раствора пикриновой кислоты (ядовита!).

5. Проведите подщелачивание раствора добавлением нескольких капель 10%-ного гидроксида натрия. Через несколько минут появляется оранжево-красная окраска. (Температура ускоряет реакцию.)

6. Проделайте этот опыт с фильтратами красных и белых мышечных волокон.

7. Сделайте вывод о содержании креатинина в разных мышцах и причинах, обуславливающих это различие.

 

Задание 1. Заполните таблицу:

Комплекс дыхательной цепи	Название фермента	Участвует ли в переносе:		Кофермент (название)	Акцептор электронов	Донор электронов
		электронов	протонов
I
II
III
IV

 

Дата выполнения ________ Балл ____ Подпись преподавателя ____________

Занятие № 12. «Цикл трикарбоновых кислот»

 

ВОПРОСЫ К КОНТРОЛЬНОЙ РАБОТЕ:

1. Окислительное декарбоксилирование пирувата как предварительный этап цикла лимонной кислоты. Перечислите витамины и коферменты, задействованные в этом процессе.

2. Реакции цикла лимонной кислоты. Что определяет общее направление реакций в цикле? В какой части клетки протекает этот процесс? Почему?

3. Какие коферменты и витамины участвуют в цикле Кребса? Объясните, как они работают, с указанием конкретных реакций.

4. Расскажите о реакциях цикла Кребса, в результате которых образуются НAДH₂ и ФAДН₂. Какова дальнейшая судьба этих соединений?

5. Функции цикла трикарбоновых кислот. Объясните, какое значение для цикла лимонной кислоты имеет анаплеротическая реакция?

6. Энергетический выход цикла трикарбоновых кислот. Сколько молекул ATФ образуется в ходе оборота через цикл одной молекулы лимонной кислоты? Все ли молекулы ATФ, образующиеся при полном окислении активного ацетила, синтезируются путем окислительного фосфорилирования. Как регулируется скорость цикла?

 

Дата выполнения ________ Балл ____ Подпись преподавателя ____________

Экспериментальная работа.