Определение групповой принадлежности крови по системе аво

(по стандартным сывороткам)

Группу крови определяют обязательно двумя се­риями стандартных изогемагглютинирующих сывороток.

Определение группы крови производят при температуре от +15 до +20°С на планшетах. На левой стороне планшета надписывают О (I), в середине А (II), а на правой стороне - В (III). По середине верхнего края планшета отмечают фамилию донора или номер исследуемой крови. Ис­пользуют стандартные сыворотки трех групп (О, А, В) с титром не ниже 1: 32, двух серий.

Для дополнительного контроля ставят ампулу с сывороткой АВ (IV).

Сыворотка 0(1) - бесцветная, А(П) - голубая, В(Ш) - розовая, АВ(1У) - жёлтая.

Последовательность действий:

1. На верхней части планшета пишут ФИО пациента, которому определяют группу крови.

2. На планшет наносят по одной капле стандартных сывороток разных серий сыворотку группы О (I) - слева, сыворотку группы А (II) - в середи­ну, сыворотку группы В (III) - справа.

3. Капли крови из пальца или пробирки наносят пипеткой или стеклян­ной палочкой около каждой капли сыворотки и смешивают палочкой. Соотношение крови и сыворотки должно быть 1:10.

4. Затем осторожно покачиваем планшетку или тарелку.

5. По мере наступления агглютинации, но не ранее чем через 3 минуты, к каплям сыворотки с эритроцитами, где наступила агглютинация, добав­ляют по одной капле 0,9% раствора натрия хлорида и продолжают наблю­дение до истечения 5 мин.

6. Через 5 мин. смотрим результат по отсутствию в каплях агглютинации.

Оценка результата реакции

1. Отсутствие агглютинации во всех трех каплях указывает на то, что в исследуемой крови нет агтлютиногенов, то есть кровь относится к группе О(I).

2. Наступление агглютинации в каплях с сыворотками О (I)и В (III) указывает на то, что в крови имеется агглютиноген А, то есть кровь относится к группе А (II).

3. Наличие агглютинации в каплях с сыворотками группы О (I) и А (II) указывает на то, что в исследуемой крови имеется агглютиноген В, то есть кровь группы В (III).

4. Агглютинация во всех трех каплях указывает на наличие в исследуемой крови агтлютиногенов А и В, то есть кровь относится к группе АВ (IY). В этом случае на планшет или тарелку наносят две - три капли стандартной сыворотки группы АВ (IY) и добавляют к ним 1 каплю исследуемой крови. Сыворотку и кровь перемешивают и реакцию наблюдают в течении 5 минут. Если агглютинация не наступила, то исследуемая кровь относится к группе АВ (IY).

Определение групповой принадлежности крови с использованием цоликлонов анти-А и aнти-B.

Цоликлоны анти-А и анти-В предназначены для определения группы крови системы АВО человека взамен стандартных изогемагглютинирующих сывороток. Для каждого определения группы крови применяют по одной серии реагента анти-А и анти-В. Цоликлоны готовятся из асцитической жидкости мышей и по антигенным свойствам сходны с человеческими агглютинами альфа и бетта.

Цоликлоны анти-А (розового цвета) и анти-В (синего цвета)

Последовательность действии:

1. На верхней части планшета пишут ФИО пациента, которому определяют группу крови.

2. На планшет (пластинку) наносят по одной большой капле цоликлона анти-А и анти-В (0,1 мл) под соответствующими надписями: "Анти-А" или "Анти-В".

3. Рядом помещают по одной маленькой капле исследуемой крови (со­отношение кровь: реагент - 1: 10).

4. Затем реагент и кровь смешивают и наблюдают за ходом реакции при легком покачивании планшета или пластинки.

5. Агглютинация с цоликлонами анти-А и анти-В обычно наступает в первые 5 секунд. Наблюдение следует вести 2,5 мин, ввиду возможности более позднего наступления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов А и В.

Оценка результатов.

1. Оценка результата проводят по наличию в каплях агглютинации.

1. Отсутствие реакции агглютинации с цоликлонами анти-А и анти-В свидетельствует о том, что кровь относится к О(I) группе крови.

2. Наличие реакции агглютинации с цоликлоном анти-А и отсутствие ее с цоликлоном анти- В свидетельствует о том, что кровь относится к А(II) группе крови.

3. Наличие агглютинации с цоликлоном анти-В и отсутствие ее с цоликлоном анти- А свидетельствует о том, что кровь относится к В(III) группе крови.

4. Наличие агглютинации с цоликлонами анти-А и анти-В свидетельствует о том, что кровь относится к АВ (IY) группе крови.

Определение резус-фактора.

Резус-принадлежность крови больного определяют с помощью универсальной антирезус сыворотки или с помощью цоликлона анти-Д-супер.