Окраска мазков методом Ожешки

На нефиксированный мазок нанесите 0,5% раствор соляной кислоты и подогрейте на пламени спиртовки 2 – 3 минуты. Кислоту слейте, препарат промойте водой, высушите и фиксируйте над пламенем.

Далее препарат окрасьте по методу Циля-Нильсена.

Споры прочно удерживают карболовый фуксин и окрашиваются в красный цвет, цитоплазма бактерий обесцвечивается 5% серной кислотой и после докрашивания метиленовым синим приобретает синий цвет.

 

8. Контроль освоения заданий по самостоятельной контактной работе.

8.1. Выполнить тестовые задания.

8.1.1. Выберите один наиболее правильный ответ.

 

1. Способны образовывать споры

1) стафилококки

2) сарцины

3) бациллы

4) хламидии

 

2. Грамположительные бактерии

1) бациллы

2) менингококки

3) кишечные палочки

4) вибрионы

 

3. Для окраски спор используется

1) окраска по Циль-Нильсену

2) метод Романовского-Гимза

3) метод Нейссера

4) метод Ожешки

 

4. В окрашенных мазках из мокроты больного воспалением легких обнаружены ланцетовидной формы попарно расположенные кокки фиолетового цвета с неокрашенной каймой вокруг. Что представляет собой эта кайма?

1) споры

2) капсулу

3) цитоплазматическую мембрану

4) жировосковые вещества

 

8.1.2. Установите соответствие.

 

5. Установите соответствие между химическими компонентами бактерий и их функциями: к каждой позиции, данной в первом столбце, подберите соответствующую позицию из второго столбца.

функции структур бактерии

структуры бактерий

А) входят в состав различных клеточных структур; необходимы для регулирования осмотического давления, рН, окислительно-восстановительного потенциала, для активации ферментов Б) компоненты плазмалеммы и клеточной стенки; у некоторых бактерий выполняют роль запасных питательных веществ В) входят в состав структур клетки; выполняют пластическую, энергетическую и запасающую функции Г) обеспечивают хранение, передачу и реализацию наследственной информации Д) большая часть их выполняет каталитическую функцию Е) является средой для протекания биохимических реакций

1) Вода 2) Белки 3) Нуклеиновые кислоты 4) Углеводы 5) Липиды 6) Минеральные вещества

 

 

6. Установите соответствие между структурами бактерий и их функциями: к каждой позиции, данной в первом столбце, подберите соответствующую позицию из второго столбца.

функции структур бактерии	структуры бактерий
А)  выполняют функцию движения Б) выполняют функцию адгезии В) подавляют фагоцитоз Г) трофическая функция Д) повышают устойчивость во внешней среде	1) Споры 2) Капсулы 3) Зерна валютина 4) Жгутики 5) Пили

 

8.1.3. Для каждого вопроса один или несколько ответов являются правильными. Выберите ответ:

Верно	1, 2, 3	1, 3	2, 4	1, 2, 3, 4
Ответ	А	Б	В	Г

 

7. Окраска по Циль-Нильсену определяется

1) высоким содержание липидов

2) капсулой

3) высоким содержанием миколовой кислоты

4) внутриклеточными включениями

 

8. Главную массу клеточной стенки грамположительных бактерий составляет

1) углеводы

2) пептидогликан

3) липиды

4) тейхоевые кислоты

 

9. Протопласты это

1) бактерии, полностью лишенные клеточной стенки

2) бактерии, частично лишенные клеточной стенки

3) возникают при нерациональном использовании антибиотиков

4) микроорганизмы, не имеющие клеточной стенки, но окруженные трехслойной липопротеидной цитоплазматической мембраной

 

10. Функции цитоплазматической мембраны

1) осуществляет транспорт растворенных веществ в клетку

2) является местом локализации ферментов

3) образует мезосомы, принимающие участие в делении клетки

4) защищает бактерии от неблагоприятных внешних воздействий

 

8.2. Решить ситуационные задачи.

Задача 1. При окраске методом Грама препарата, приготовленного из культур стафилококка, обесцвечивание 96% спиртом проводилось в течении 3-х минут. Какая ошибка была допущена в технике окраски по Граму? Как будет выглядеть препарат микроскопически?

 

Задача 2. В лабораторию поступил исследуемый материал (мокрота) от больного Н. с подозрением на туберкулез. Необходимо провести микроскопическое исследование материала. Назовите метод выявления кислотоустойчивых бактерий. Опишите тинкториальные свойства кислотоустойчивых и некислотоусточивых бактерий. Объясните причину кислотоустойчивости бактерий.

 

Задача 3. У культуры бактерий, выделенной из мокроты больного пневмонией, необходимо определить наличие капсулы. Выберите метод окраски для выявления капсул бактерий. Перечислите реактивы, необходимые для этого метода. Опишите технику приготовления и окраски мазка.

 

Задача 4. Микроскопия окрашенных мазков выявила наличие в них шаровидных фиолетовых бактерий, расположенных в виде цепочек. Перечислите микроорганизмы, имеющие такие характеристики. Назовите систему светового микроскопа, которая могла быть использована для микроскопии и её назначение. Укажите методы окраски, которые могли быть использованы.

 

 

Практическое занятие № 3