Работа 9. Определение рибофлавина в поливитаминных

Препаратах.

Принцип метода

Основан на способности рибофлавина давать в ультрафиолетовых лучах желто-зеленую флюоресценцию, интенсивность которой зависит от концентрации рибофлавина.

Ход работы

Экстракт готовится как в предыдущей работе.

В 3 пробирки добавить:

1. Контроль - 7 мл воды.

2. Опыт - 2 мл экстракта из драже + 5 мл воды.

3. Стандарт - 1 мл стандартного р-ра + 5 мл воды.

Помещают пробирки в штатив флуороскопа и сравнивают флюоресценцию в 3-х пробирках.

Работа 10. Количественное определение аскорбиновой кислоты

В растениях по Тильмансу.

 

Принцип метода

Метод основан на способности аскорбиновой кислоты восстанавливать 2,6-дихлорфенолиндофенол, который в кислой среде имеет красную окраску, а при восстановлении обесцвечивается; в щелочной среде окраска синяя. Реакцию проводят в кислой среде для предотвращения разрушения витамина С.

Техника выполнения работы

На аптечных весах берут навески лекарственного сырья по 0,5 г (шиповник, очищенный от семян – 0,2 г). Исследуемый материал растирают в ступке с 5 мл 2% раствора НС1. Вытяжку фильтруют через тонкий слой ваты в мерную колбу на 100 мл. Извлечение витамина С из той же навески повторяют 3 раза с 5 мл соляной кислоты, фильтруя каждый раз полученную вытяжку в ту же мерную колбу. Содержимое колбы доводят до метки дистиллированной водой. Для титрования отбирают 10 мл вытяжки в стаканчик и титруют 0,001 н раствора 2,6-дихлорфенолиндофенола до розовой окраски, сохраняющейся в течение 30 сек.

 

Содержание витамина С в растительном сырье (мг/кг) производят по формуле:

(0,088 ´А´100´1000) / 10´В,

где 0,088 – масса аскорбиновой кислоты, соответствующая 1 мл 0,001н раствора 2,6-ДХФИФ, мг;

А – результат титрования 0,001 н раствором 2,6-дихлорфенолиндофенолом, мл;

В - навеска исследуемого материала, г;

100- разведение взятой пробы;

1000 – коэффициент пересчета на 1 кг сырья;

10 – объем жидкости, взятый на титрование, мл.

Оформление работы

Результаты исследования оформите в виде таблицы и сделайте вывод о значении исследованного растительного материала как источника витамина С. В выводе указать, целесообразно ли применение данного лекарственного растения с целью профилактики С-витаминной недостаточности:

 

Материал	Навеска, г	Объем 2,6-ДХФИФ	Содержание аскорбиновой кислоты, мг/кг

Эталоны ответов к тестовым заданиям

1.1. – а

1.2. – а

2.1. – 1-г; 2-а; 3-е; 4-д; 5-в; 6-б;7-з; 8-ж; 9-к

2.2. – 1-ж; 2-а; 3-г; 4-б; 5-е; 6-в; 7-д

3.1. – 2, 3

3.2. – 2, 4

4.1. – А(+ + +)

4.2. – С(+ - -)

Эталоны ответов на ситуационные задачи

Задача 1.

Препараты витамина К используются как средства, предупреждающие кровотечения, поскольку витамин К относится к непрямым коагулянтам, участвующим в образовании в печени факторов свертывания II, VII,IX X. Участие заключается в g-карбоксилировании остатков глутаминовой кислоты в ходе постсинтетического «дозревания» белков свертывания крови. Дополнительная карбоксильная группа необходима для взаимодействия с ионами Са⁺⁺ (факторы II, VII, IX, X являются Са⁺⁺-зависимыми).

Задача 2.

В основе ренального рахита лежит снижение способности вырабатывать активную форму витамина Д₃ – 1,25-диоксихолекальциферол [1,25(ОН)₂D₃], так как 1α-гидроксилирование протекает именно в ткани почек. Наиболее эффективным в данном случае является применение не самого холекальциферола, а его активного метаболита – [1,25(ОН)₂D₃].