Заглавная страница Избранные статьи Случайная статья Познавательные статьи Новые добавления Обратная связь FAQ Написать работу КАТЕГОРИИ: АрхеологияБиология Генетика География Информатика История Логика Маркетинг Математика Менеджмент Механика Педагогика Религия Социология Технологии Физика Философия Финансы Химия Экология ТОП 10 на сайте Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрацииТехника нижней прямой подачи мяча. Франко-прусская война (причины и последствия) Организация работы процедурного кабинета Смысловое и механическое запоминание, их место и роль в усвоении знаний Коммуникативные барьеры и пути их преодоления Обработка изделий медицинского назначения многократного применения Образцы текста публицистического стиля Четыре типа изменения баланса Задачи с ответами для Всероссийской олимпиады по праву Мы поможем в написании ваших работ! ЗНАЕТЕ ЛИ ВЫ?
Влияние общества на человека
Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрации Практические работы по географии для 6 класса Организация работы процедурного кабинета Изменения в неживой природе осенью Уборка процедурного кабинета Сольфеджио. Все правила по сольфеджио Балочные системы. Определение реакций опор и моментов защемления |
Механизм, ингредиенты иммуноблоттингаСодержание книги
Поиск на нашем сайте
Иммуноблоттинг (ИБ) — высокочувствительный метод, основанный на сочетании электрофореза и ИФА. Смесь антигенов микроорганизма (родовых, видовых, групповых) разделяют на фракции, содержащие отдельные антигены с помощью электрофореза в полиакриламидном геле. Затем переносят его (блоттинг - от англ. blot, пятно) из геля на нитроцеллюлозную мембрану и проявляют с помощью ИФА. Фирмы выпускают такие полоски с «блоттами» антигенов. На эти полоски наносят сыворотку больного. Затем после инкубации отмывают от несвязавшихся антител больного и наносят сыворотку против иммуноглобулинов человека, меченую ферментом. Образовавшийся на полоске комплексы антиген + антитело больного + антитело против Ig человека, меченое ферментом, выявляют добавлением субстрата и хромогена, изменяющих окраску под действием фермента. ИБ используют как диагностический метод при ВИЧ-инфекции, сифилисе, листериозе и других инфекциях. 6. Механизм, ингредиенты иммунной электронной микроскопии (ИЭМ) Иммунная электронная микроскопия - электронная микроскопия микробов, чаще вирусов, обработанных соответствующими антителами. Вирусы, обработанные иммунной сывороткой, образуют иммунные агрегаты (микропреципитаты). Вокруг вирионов образуется "венчик" из антител, контрастированный фосфорно-вольфрамовой кислотой или другими электронно-оптически плотными препаратами. То есть этот метод представляет собой непосредственную визуализацию взаимодействия антигена и антител методом электронной микроскопии. Методически тест ИЭМ выполняется в следующей последовательности: 1. материал, в котором предполагается наличие искомого вируса, смешивается и инкубируется со стандартной иммунной сывороткой; 2. комплекс вирус-антитело осаждается центрифугированием в подходящих для него режимах; 3. к ресуспендированному осадку добавляется контрастирующее вещество, и полученный препарат исследуется под электронным микроскопом. В качестве данного вещества используется ферритин – белок, содержащий до 23 % железа, хорошо контрастирующий и поэтому применяющийся в качестве метки. После обработки мечеными АТ изучаемых объектов (вирусов, бактерий, срезов инфицированных клеток) они становятся электронноплотными и могут быть выявлены при электронной микроскопии. В случае положительной реакции выявляются характерные агрегаты, состоящие из вирусных частиц, соединенных между собой мостиками из антител. Порог чувствительности ИЭМ невысок: надежное выявление вируса осуществимо, когда его концентрация в исходном материале составляет 104 — 106 частиц в мл. Преимуществом метода является возможность оценивать не только исход серологической реакции, но и идентифицировать ее морфологический субстрат, т. е. определить форму и размер вирусных частиц. При наличии препаратов вируса с известным содержанием частиц ИЭМ может применяться и для количественного определения антител в сыворотках, для чего предложена специальная система учета интенсивности взаимодействия вируса и антител. Современные тест-системы для серологической диагностики дают возможность определять не только суммарные антитела (антитела одной специфичности, принадлежащие к разным классам иммуноглобулинов), но и отдельно специфические IgG, IgM, IgA. Таблица 28. Интерпретация результатов, основанных на определении комбинации IgG, IgM, IgA
Рис. 26. Типичная динамика гуморального ответа на первичное и повторное инфицирование Занятие № 4 ТЕМА: Оценка иммунного статуса человека. Иммунопрофилактика и иммунотерапия: вакцины, сыворотки, иммуноглобулины, бактериофаги. Иммунодиагностика: диагностикумы, аллергены, бактериофаги. Медицинская биотехнология. ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ: знать тесты оценки иммунного статуса человека: клеточных и гуморальных факторов врожденного и приобретенного иммунитета; методы их определения; механизм, технику постановки и учёт реакции Манчини; механизм, технику постановки и учёт теста определения титра комплемента, методы получения биологических препаратов: вакцин, сывороток, иммуноглобулинов, аллергенов, диагностикумов, бактериофагов; сроки плановой вакцинации и ревакцинации; биотехнологические методы. уметь учитывать реакцию Манчини; учитывать тест 1. Вопросы для самоподготовки 1. Иммунный статус человека. Понятие, уровни, тесты оценки 2. Тесты оценки иммунного статуса человека I уровня и методы их определения 3. Тесты оценки иммунного статуса человека II уровня и методы их определения 4. Реакция Манчини: цель, механизм и ингредиенты реакции Манчини 5. Механизм, ингредиенты, постановка реакции определения титра комплемента 6. Понятие об иммунопрофилактике и иммунотерапии. Показания к вакцинации и противопоказания 7. Виды и методы получения вакцин 8. Метод получения, цель применения анатоксинов 9. Природа, цели применения адьювантов 10. Виды, методы получения, цели применения иммунных сывороток 11. Цели применения бактериофагов 12. Иммунологические препараты для диагностики инфекционных заболеваний 13. Виды, методы получения и цели применения диагностикумов 14. Аллергены, методы получения и цель использования 2. Контрольные вопросы: 1) Выписать определение «иммунный статус человека» тесты оценки иммунного статуса человека ____________________________________________________________________ __________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ 2) Выписать уровни оценки иммунного статуса человека, назвать их различия _______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ 3) Реакция Манчини: а) выписать цель ___________________________________________ __________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ б) выписать название механизма реакции _________________________________________ _____________________________________________________________________________ в) выписать ингредиенты ______________________________________________________ __________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ 4) Выписать ингредиенты реакции титрования комплемента _______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ 5) Выписать название показателей иммунограммы и их значение у здоровых лиц
6) Выписать методы получения вакцин: ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ 7) Выписать виды вакцин: __________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ 8) Выписать методы получения а) сывороток: ____________________________________ _____________________________________________________________________________ 9) иммуноглобулинов___________________________________________________________ _____________________________________________________________________________ 10) Выписать виды сывороток: __________________________________________________ __________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ 11) Выписать цели использования аллергенов ______________________________________ 13) Выписать цель использования бактериофагов __________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ 1. Записать тесты для оценки иммунного статуса человека и методы их определения.
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Последнее изменение этой страницы: 2017-01-19; просмотров: 665; Нарушение авторского права страницы; Мы поможем в написании вашей работы! infopedia.su Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Обратная связь - 3.145.202.60 (0.01 с.) |