Иммунный статус человека. Понятие, уровни, тесты оценки

Иммунный статус – это количественные и функциональные характеристики факторов иммунитета организма, определенные в конкретный момент времени.

Функции иммунной системы снижают различные факторы — несбалансированное питание, инфекции, ионизирующее излучение, химические вещества. Подобные нарушения — иммунодефициты — разделяют на первичные (врождённые) и вторичные (приобретённые). Врождённые дефекты иммунной системы встречают сравнительно редко и обусловлены генными дефектами. Вторичные нарушения часто представляют звенья патогенеза многих патологических состояний (например, болезней злокачественного роста, эндокринных расстройств). Особенно часто вторичные расстройства развиваются при бактериальных и вирусных инфекциях, обычно нося временный характер (транзиторные иммунодефициты). Дефекты могут затрагивать различные компоненты иммунной системы. Выделяют Т-клеточные, В-клеточные и комбинированные (Т-В-клеточные) иммунодефициты. Также возможны расстройства гуморальных и клеточных факторов неспецифической защиты организма.

Для выявления иммунодефицитных состояний возникает необхо­димость оценки показателей функциональной активности им­мунной системы, т. е. иммунного статуса. С 1987 года для изучения иммунного статуса используют принцип двухэтапной оценки иммунологического статуса.

2. Тесты оценки иммунного статуса человека I уровня и методы их определения

На первом (скрининговом) этапе выявляют грубые дефекты в системе гуморального и клеточного иммунитета, всистемах комплемента и фагоцитоза с помощью наиболее простых, но точ­ных, так называемых ориентировочных методов, которые могут охарактеризовать функцию основных компонентов иммунного ответа организма. Этим требованиям отвечают иммунологи­ческие тесты первого уровня, включающие всебя следующие основные тесты: определение общего и относительного числа лимфоцитов; основных субпопуляций (Т- и В-клетки); фагоцитарной активности лейкоцитов; концентрации иммуноглобулинов разных классов в сыворотке крови (табл. 29).

Общее (абсолютное) и относительное число лимфоцитов опре­деляют по данным клинического анализа крови. Содержание Т- и В-лимфоцитов подсчитывают в реакции иммунофлюоресценции, используя меченые моноклональные флюоресцирую­щие сыворотки к специфическим поверхностным антигенным маркерам, обозначаемым символами CD (claster differentiation – кластеры дифференцировки). Таких антигенных маркеров известно несколько десятков, но отдельные из них характерны для того или иного типа клеток:

· рецептор CD3⁺ — всех Т-лимфоцитов;

· рецепторы CD19⁺, 20, 21, 72 — В-лимфоцитов;

· рецепторы CD4⁺ — Т-хелперы и Т-клетки памяти;

· рецепторы CD8⁺ — Т-супрессоры и Т-киллеры;

· рецепторы CD16⁺ — NK-клетки (натуральные киллеры).

В настоящее время популяции и субпопуляции лимфоцитов определяют с помощью специфических моноклональных AT к различным поверхностным маркерам посредством проточной цитофлюориметрии или с помощью иммунолюминесцентноймикроскопии.

Более доступным и простым, но менее точным и устаревший является метод розеткообразования. Он основан на том, что В-лимфоциты могут адсорбировать на своей поверхности эрит­роциты мышей, а Т-лимфоциты — эритроциты барана (их также могут образовывать NK-клетки). Лимфоцит с прилип­шими к нему эритроцитами — это и есть розетка, их подсчи­тывают в окрашенных по Романовскому-Гимзе мазках из смеси лимфоцитов и соответствующих эритроцитов.

Для оценки фагоцитарной активности нейтрофилов крови оп­ределяют процент фагоцитирующих клеток и фагоцитарный по­казатель (среднее количество микробных клеток, поглощен­ных одним лейкоцитом).

Концентрацию (уровень) иммуноглобулинов разных классов G, М, А и Е в сыворотке крови определяют в реакции преципитации в геле (радиальная иммунодиффузия по Манчини) с анти-глобулиновыми сыворотками к IgG, IgM, IgA, IgE, но этот метод дает достаточно большую ошибку при определении: ±15%.

Таблица 29. Тесты оценки иммунного статуса I уровня

Тест	Метод определения
Лейкоцитарная формула (относительное и абсолютное количество нейтрофилов, эозинофилов, базофилов, моноцитов и лимфоцитов)	Световая микроскопия мазка крови, окрашенного по Романовскому-Гимзе
Относительное и абсолютное количество Т-лимфоцитов (CD3^+ клеток)	Проточная цитофлюориметрия
относительное и абсолютное количество Т-лимфоцитов (Т-хелперов (CD4^+ клеток), Т-киллеров (CD8^+ клеток), индекса соотношения CD4/CD8)	Проточная цитофлюориметрия
Относительное и абсолютное количество В-лимфоцитов (CD20^+ клеток)	Проточная цитофлюориметрия
Концентрация иммуног­лобулинов А, М, G	Реакция Манчини; ИФА
Показатели фагоцитоза (фагоцитарный индекс, фагоцитарное число, коэффициент завершенности фагоцитоза)	Световая микроскопия мазков крови, окрашенных по Романовскому-Гимзе; расчет показателей активности фагоцитоза.
Титр комплемента	Реакция иммунного гемолиза
Количество иммунных комплексов	Турбидиметрия (метод анализа мутных сред, основанный на измерении интенсивности поглощённого ими света).

3. Тесты оценки иммунного статуса человека II уровня и методы их определения

При наличии отклонений вориентиру­ющих тестах более тщательный анализ иммунологического статуса рекомендуется проводить с помощью аналитических тестов вто­рого уровня. Для установления выраженности и уровня иммуно­логического дефекта, определения механизмов функциональных нарушений звеньев иммунитета изучают следующие показатели (табл. 30).

Таблица 30. Тесты оценки иммунного статуса II уровня

Тест	Метод определения
Относительное и абсолютное количество Т-хелперов 1 и 2 типов	Проточная цитофлюориметрия
Относительное и абсолютное количество натуральных киллеров (NK-клеток, CD16^+, 56^+ клеток)	Проточная цитофлюориметрия
Относительное и абсолютное количество активированных Т-лимфоцитов (несущих HLA-DR)	Проточная цитофлюориметрия
Относительное и абсолютное количество популяций В-лимфоцитов (наивных, памя­ти, иммунных, синтезирующих разные классы иммуноглобули­нов)	Проточная цитофлюориметрия
Активность спонтанной и активированной бластной трансформации лимфоцитов	Реакция бластной трансформации лимфоцитов (РБТЛ)
Определение уровеней цитокинов (интерлейкинов (ИЛ)-1, 2, 4, 5, 6, 8, 10; интерферонов (ИФН) α- и γ) в крови	ИФА
Определение бактерицидности нейтрофилов в тестах хемилюминисценции и восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест)	Реакция хемилюминесценции; Световая микроскопия мазков крови, окрашенных нейтральным красным
Количество компонентов комплемента (С3, С1, С3а, С5а и др.)	ИФА
Определение специфических онкомаркеров	ИФА
Определение уровней специфических аутоантител.	ИФА