Оценка микрофлоры полости рта.

Кариесогенность микрофлоры зубного налета связывают с его кислотообразующими свойствами (В.А.Филиппов,1978; В. Климм с соавт.,1980; В.Ф. Кускова, 1981; VanHoute, Duchin.1975).

Исследование микробного состава зубного налета проводится в условиях микробиологических лабораторий. Один из методов изучения микробного состава описан Г.Д. Овруцким с соавт. (1987). Он заключается в получении мягкого зубного налета с исследуемой поверхности зуба стерильной бактериологической иглой спустя 1.5-3 ч после приема пищи. Проба помещается в ампулу гомогенизатора с 2мл пептоно-солевого раствора и суспензируется в течение 1 мин. Затем готовятся последовательные десятикратные разведения исследуемого материала в 2 рядах пробирок с Хоттингеровскимм бульоном, содержащим 5% сахарозы, до разведения 10 в минус 10 степени. Один ряд пробирок инкубируется в условиях анаэростата, другой – в аэробных условиях в течение 24 ч при 37градуссах С. По истечении срока инкубации из каждого разведения первого ряда делается пересев на кровяной Хоттингеровский агар с 5% сахарозы ми готовятся мазки для контроля состава высеваемой флоры. Посевы выдерживаются в анаэростате с газовой смесью 95% СО2 и 5% О2 в течение 28 ч при температуре 37 град. С. Затем изучается морфология колоний и производится их микроскопия, кокковая флора исследуется на каталазную активность. Не менее 10 колоний каталазоотрицательных стрептококков, обнаруженных в пересевах из наибольших разведений исследуемого материала, отсеивают в пробирки с Хоттингеровским бульоном, содержащим 5% сахарозы. Посевы инкубируются в течение 24-48 ч. в тех же условиях анаэростата. Чистота высеваемых культур контролируется микроскопией. Видовая идентификация выдеенных штаммов стрептококков производится по тестам, рекомендованным Karger, Basel(1968), Bergy(1979).

Немалое распространение получило определение числа лактобактерий полости рта, которые предлагается использовать для прогнозирования кариеса зубов (Г.А. Кожанова, 1970; З.П. Масный, 1976; Geddes, 1972; Skinner, Naylor, 1972; Rodriguez, Carcis, 1979).

С этой целью использется подсчет колоний лактобактерий в посевах ротовой жидкости на специальных агаризированных средах. Число данных колоний составляет лактобациллен-индекс. Определенную информативность имеет титр лактобактерий- предельное разведение исследуемого материала, давшего рост лактобактерий в жидкой среде (Л.В. Морозова, 1970). Достоверно более высокое значение индекса КПУ обнаружилось в группе школьников с титром лактобактерий полости рта 10 в минус 5 и выше.

Для оценки прижизненной резистентности поверхностного слоя эмали к действию кислот используется CRT-тест (Н.В. Морозова, 1975; П. Донат, 1980; Maiwald, Geiger, 1978).

Определение CRT-теста основано на свойстве кристалл-виолета принимать желтую окраску в кислой среде и фиолетовую в нейтральной. Данным раствором, а также раствором соляной кислоты пропитывают диски из фильтровальной бумаги. После наложения дисков на зубы в результате деминерализации эмали кислотой рН сдвигается в нейтральную сторону и кристалл-виолет изменяет свой цвет от желтого до фиолетового. Время в течение которого происходит изменение цвета, измеряется в секундах и является мерой кислотной резистентности эмали.

Перед началом исследования зуб (обычно левый верхний центральный резец) изолируется ватными тампонами от слюны, вестибулярная поверхность очищается от налета щеткой с зубным порошком, промывается и высушивается. На очищенную поверхность зуба помещается диск фильтровальной бумаги диаметром 3мм, предварительно пропитанный в течение 30с 0.02%-ным водным раствором кристалл-виолета. Пипеткой с микровинтом на диск наносится 1.5 мкл соляной кислоты и замечается время реакции. После проведенного теста поверхность зуба полируется щеткой с порошком, покрывается фтористым лаком.

 

ТЭР тест

Последний заключается в изучении микрорельефа поверхности эмали после дозированного кратковременного воздействия слабыми растворами кислот (рельеф поверхности при этом полностью восстанавливается в течение 10-36ч).

Значительное изменение шероховатости эмали свидетельствует о низкой устойчивости к кариесу зубов обследуемого, что является показанием к применению интенсивых кариеспрофилактических воздействий.

Определение ТЭР. Суть метода заключается в нанесении с помощью пипетки или стеклянной палочки на очищенную от налета и высушенную 'Вестибулярную поверхность одного из интактных резцов верхней челюсти капли 1Н соляной кислоты диаметром 1,5—2,0 мм. Через 5 сек. каплю снимают марлевым тампоном одним стирающим движением и эмаль прокрашивают 1%-ным раствором метиленового синего. Интенсивность окраски оценивают по десятибалльной стандартной шкале синего цвета. В случае, если интенсивность окраски высока и соответствует последним пяти ступеням шкалы, обследуемого относят к группе кариесвосприимчивых.

Этот экспресс-ТЭР осуществляют следующим образом: после предварительной обработки центрального верхнего резца порошком фосфат-цемента, изоляции его от слюны с помощью пипетки наносят на эмаль каплю раствора, содержащего 30 г/л пасты индигокармина в 0,2 М серной кислоте. Каплю диаметром до 2 мм наносили в строго определенную точку: по оси зуба на середину расстояния между режущим краем и краем десны. Через 5 сек. каплю' снимают сухим ватным тампоном одним стирающим движением.

КОСРЭ-тест — способ оценки устойчивости зубов к кариесу, позволяющий составить суждение о комплексе патогенетических факторов, предопределяющих устойчивость или предрасположенность к кариесу, разработанный Т. Л. Рединовой, В. К. Леонтьевым и Г. Д. Овруцким (1982).

Клиническая оценка скорости реминерализации эмали названа авторами КОСРЭ-тестом. При этом способе определяется не только структурно-функциональная кариесрезистентность эмали, но и реминерализующая способность ротовой жидкости. Он весьма прост, и полученные результаты легко интерпретируются.

Методика проведения КОСРЭ-теста. Оценка устойчивости зубов к кариесу проводится следующим образом. Предварительно заготавливается кислотный буферный раствор с рН 0,3—0,6 и 2,0%-ный раствор метиленового синего.

Кислотный буфер является деминерализующим раствором. Для его приготовления берут 97 мл I Н соляной кислоты и 50 мл солянокислого калия, смешивают и доливают дистиллированной воды до объема 200 мл. Для придания большей вязкости к одной части указанного раствора добавляют одну часть глицерина. Повышенная вязкость такого раствора способствует получению капли с постоянной величиной соприкосновения с зубом и лучшему удержанию ее на поверхности.

Практический способ оценки устойчивости зубов к кариесу реализуется следующим образом. Поверхность эмали исследуемого зуба тщательно очищают от налета стоматологическим шпателем, перекисью водорода, просушивают сжатым воздухом.

После этого на поверхность эмали зуба полуавтоматической микропипеткой наносят каплю солянокислого буфера с рН 0,3—0,6 всегда постоянного объема.

По истечении 60 сек. деминерализующий раствор удаляют ватным тампоном. Последующее промывание водой не требуется. После этого «а протравленный участок эмали наносят на одну минуту ватный шарик, пропитанный 2,0%-ным раствором метиленового синего. Ватный шарик убирают и приступают к тщательному удалению излишков краски, используя только сухие ватные тампоны. При необходимости, если зубной налет плохо снят, поверхность зуба очищают повторно. Проведение этих манипуляций важно, так как излишек краски и окрашенный зубной налет могут привести к неправильной интерпретации полученных данных.

Податливость эмали действию кислоты (процесс деминерализации) оценивают по интенсивности окрашивания протравленного участка эмали зуба. О степени окрашивания судят по оттеночной типографской шкале синего цвета. Нами использовалась десятибалльная шкала, в которой наименее прокрашенная цветковая полоска принята за 10%, а наиболее насыщенная — за 100%.

Спустя сутки повторно прокрашивают протравленный участок эмали зуба. Воздействие деминерализующим раствором при этом не проводится. Если протравленный участок эмали зуба прокрашивается, то эту процедуру снова повторяют через сутки. Утрата протравленным участком свойства прокрашиваться расценивается как полное его восстановление. Протравленный участок эмали зуба у разных людей восстанавливается в различные сроки. Именно по тому, на какой день протравленный участок эмали утрачивает способность прокрашиваться, судят о реминерализующих свойствах слюны.