Тема: анатомия и физиология полового аппарата самцов

ПОЛОВЫЕ ОРГАНЫ КОРОВ

Промежность (perineum) - область тела, расположенная между анальным отверстием и половой щелью (снаружи), и треугольное пространство между прямой кишкой и преддверием влагалища, заполненное рыхлой тканью (тело промежности). Промежность очень важна при родоразрешающих операциях (перинеотомия, кантопластика).

Половые губы (vulva) - ограничивают половую щель.

Представляют два мясистых выпячивания над седалищными буграми. Нижнее соединение половых губ образует острый угол, верхнее - округлый. Несколько внутрь от нижнего соединения половых губ виден конечный участок клитора (clitoris, cunnus) - органа, аналогичного мужскому половому члену, состоящему из двух пещеристых тел.

Преддверие влагалища (vestibulum vaginale) - мускульная трубка, каудально заканчивающаяся половой щелью, а краниально переходящая во влагалище, без резких границ, т.к. мочевой клапан (девственная плева) у жвачных животных развит слабо. Ограничивает преддверье от влагалища также наружное отверстие мочеиспускательного канала, в котором при входе вентрально располагается дивертикул, о чем всегда надо помнить при катетеризации. По бокам мочеиспускательного канала расположены большие вестибулярные железы (бартолиниевы).

Влагалище (vagina, colpos) - орган совокупления и выводной канал при родах. Стенка влагалища плотная, упругая, эластичная. Каудально влагалище граничит с преддверием влагалища, краниально - оно баллонообразно расширяется и, включая в свой просвет влагалищную часть шейки матки, образует два кармана. Дорзальный - свод влагалища, вентральный - дно. На вентральной стенке влагалища у 75% коров можно обнаружить гартнеровы ходы (протоки). Это рудименты вольфовых каналов, образующих у самцов семяпроводы. Они нередко воспаляются (гартнерит).

Дорзально влагалище отделено от прямой кишки ректо-вагинальным выпячиванием брюшины (excavatio restovaginalis). Вентрально между влагалищем и мочевым пузырем внедряется влагалищно-пузырное выпячивание брюшины (excavatio vesicovaginalis). Об обоих этих выпячиваниях необходимо помнить при ведении родов, т.к. в них могут попадать петли кишечника, которые могут быть размозжены при прохождении плода во время родов.

Матка (metra, uterus, hystera) у коров относится к типу двураздельных. Она состоит из шейки, тела и рогов.

Шейка матки (cervix uteri) резко ограничена со стороны влагалища и матки. Во влагалище она выступает на 2-4 см под названием влагалищная часть шейки матки имеет радиальную складчатость, расходящуюся от устья матки (orificium uteri externum). В полость тела матки открывается внутреннее отверстие (orificium uteri internum). Шейка образована мощным циркулярным и слабым продольным слоями мускулатуры. Между ними хорошо развитый сосудистый слой. Слизистая канала шейки матки образует мелкие продольные складки, которые формируют крупные поперечные, направленные своими верхушками в сторону влагалища. Эти складки называются palma plicata (раскрытая ладонь) и имеют большое значение при операции искусственного осеменения.

Тело матки (corpus uteri) короткое, плодовместилищем не является. Стенка матки состоит из трех слоев:

1) серозная оболочка (perimetrium);

2) мышечная оболочка (myometrium) - имеет наружный продольный и внутренний циркулярный слой гладких мышц;

3) слизистая оболочка (endometrium).

Рога матки (cornua uteri) - продолжение тела. Вначале они сросшиеся - видна межроговая борозда, затем расходятся (бифуркация) и по своему ходу постепенно сужаются и спиралевидно закручиваются, образуя полтора витка по малой кривизне, по всей длине рога к нему прикреплена маточная связка.

На эндометрии в четыре ряда располагаются зачатки материнских плацент – карункулы, их от 80 до 120 штук.

Яйцепроводы (трубы, фаллопиевы трубы - salpinx, ovidictus, tuba metri, tuba uterine, adventicium) имеют вид слабо извитых полых каналов, соединяющих полости матки и брюшную. Они тянутся от суженного конца рогов к яичникам.

Рис.1. Половые органы коровы: 1 – яичник; 2 – яйцевод; 3 – рога матки (правый рог вскрыт); 4 – тело матки; 5 - шейка матки; 6 – отверстие шейки матки; 7 – влагалище (вскрыто); 8 – отверстие мочеиспускательного канала; 9 - преддверие влагалища; 10 – клитор; 11 – половые губы; 12 – брыжейка матки.

К рогу матки прилегает перешеек (истмус), далее ампула - средняя более расширенная часть и воронка, открывающаяся в брюшную полость. Краяворонки имеют неровную зубчатость - это бахромка или яичниковая бурса.

Яичники (oophoron, ovaria) парные образования овальной уплощенной формы. В яичнике различают корковый (генеративный) и мозговой слои. Корковый слой с примордиальными фолликулами у коров развит сильно и мозговой - слабо. Почти вся поверхность яичника покрыта кубическим зародышевым эпителием, а серозная и фиброзная оболочки на яичнике коровы имеются только в области прикрепления связки и вхождения сосудов.

Кровоснабжение половых органов коровы осуществляется в основном передней, средней и задней маточными артериями и артерией яичника.

Передняя маточная артерия (a. uterine cranialis) отходит от аорты, сильно ветвится в широкой маточной связке и дает две ветви - яичниковую и маточную. Эта артерия всегда вибрирует.

Средняя маточная артерия отходит от пупочной (a. umbilicalis), проходит по широкой маточной связке к малой кривизне рога, где разветвляется. Она подвижна, начинает вибрировать с 4-го месяца беременности.

Задняя маточная артерия отходит от средней геморроидальной (a. haemorroidalis et a. urethrogenitalis) в середине малой седалищной вырезки таза и идет вперед и вниз по стенке влагалища. Начинает вибрировать с 7-­го месяца беременности.

Яичниковая артерия отходит от семенной артерии.

Половые органы самок мелкого рогатого скота отличаются от коровы только величиной. На эндометрии также четыре ряда карункулов числом от 88 до 96. В отличие от коров карункулы овец и коз в центре имеют углубление.

Половые органы кобыл имеют следующие отличия от половых органов коров:

Вульва - дорзальный угол заострен, а вентральный закруглен. Клитор имеет хорошо выраженную полушаровидную головку. Преддверье влагалища более резко ограничено от влагалища благодаря более развитому мочевому клапану. По бокам преддверья под слизистой оболочкой расположены два кавернозных тела, которые во время coitus наполняются кровью и обеспечивают некоторое зияние половой щели.

Влагалище не имеет гартнеровых ходов, на границе с преддверьем слизистая образует полулунный мочевой клапан, соответствующий девственной плеве приматов.

Матка относится к типу двурогих.

Рис. 2. Половые органы лошади: 1 – яичник; 2 – яйцепровод; 3 – рог матки (левый рог матки вскрыт); 4 – тело матки; 5 – шейка матки; 6 – отверстие шейки матки; 7 – влагалище (вскрыто); 8 – отверстие мочеиспускательного канала; 9 – преддверие влагалища (мочеполовой синус); 10 – клитор; 11 – половые губы; 12 – широкая маточная связка с проходящими в ее толще артериями.

Шейка матки выступает во влагалище на 2-2,5 см. Устье имеет звездчатый вид, т.к. в канале шейки матки имеются только продольные складки слизистой оболочки.

Тело матки хорошо развито и является плодовместилищем.

Рога матки - прямые, плоские, обращены, в отличие от коровы,малой кривизной дорзально. Весь эндометрий имеет большое количество крипт.

Яйцепроводы сильно извиты, абдомальный конец образует гораздо большую, чем у коров воронку и бахромку, которая располагается складками возле овуляционной ямки яичника.

Яичники имеют бобовидную или неправильную овальную форму. Снаружи яичники покрыты серозной, затем фиброзной оболочкой, за исключением овуляционной ямки выстланной кубическим зародышевым эпителием. Только в этой ямке и происходит овуляция. Наличие овуляционной ямки способствует тому, что корковый слой здесь менее развит, чем мозговой. Поэтому фолликулы находятся внутри яичника, ближе к овуляционной ямке.

Половые органы свиней.

Вульва имеет острый вентральный угол.

Клитор длинный, заканчивается притупленной головкой.

Преддверье влагалища под слизистой вентральной части боковых стенок имеет кавернозные тела. У молодых свиней имеется полулунный или круглый мочевой клапан.

Рис. 3. Половые органы свиньи: 1 – яичник; 2 – яйцевод; 3 – рог матки; 4 – тело матки; 5 – шейка матки; 6 – влагалище (вскрыто); 7 – отверстие мочеиспускательного канала; 8 – преддверие влагалища; 9 – клитор; 10 – половые губы.

Влагалище узкое, слизистая образует продольные и поперечные складки, без резких границ переходит в шейку матки.

Шейка матки длинная, без границ переходит в тело матки, слизистая имеет два ряда складок, в основе своей соединительно-тканных, которые расположены в шахматном порядке, так что их верхушки не совпадают с таковыми противоположной стороны. Поэтому канал шейки матки образует неправильную штопорообразную линию. Тело матки выражено слабо (3-5 см).

Рога матки на протяжении 5-10 см срослись, образуя межроговую борозду, затем каждый рог образует большое количество петель, длина от 100 до 200 см. Эндометрий образует большое количество нежных складок, покрыт криптами.

Яйцепроводы длинные, сильно извитые и оканчиваются хорошо развитой воронкой и бахромкой (яичниковая бурса).

Яичники бугристые, гроздевидной формы, что обусловлено большим количеством фолликулов и желтых тел, т.к. свинья - животное многоплодное (сравнение с малиной, тутовой ягодой, виноградом).

 

СПЕРМИОГЕНЕЗ

По достижении самцами половой зрелости в их семенниках начинают созревать и формироваться спермии - спермиогенез. Он происходит в извитых канальцах, на базальной мембране которых видны спермогонии - сравнительно мелкие клетки, на разных стадиях деления (стадия размножения). Над спермогониями лежат более крупные клетки с ярко выраженным темным ядром спермиоциты 1 порядка (стадия роста). Спермиоцит первого порядка делится, давая два спермиоцита 2 порядка (или преспермиотиды). Каждая преспермиотида делится и дает две спермиотиды. Преспермиотиды и спермиотиды - это стадия созревания. Затем начинается стадия формирования, которая протекает в протоплазматических отростках клеток синтиция Сертоли, очень богатых гликогеном, который используется спермиями в стадию формирования. Сформировавшийся спермий состоит из головки, шейки, тела и хвоста. Сформировавшиеся спермий приобретают подвижность, перемещаются в прямые канальцы, сеть семенника и через семявыносящие протоки попадают в головку придатка, а оттуда в канал придатка, где окончательно созревают, т.е. покрываются лецитин-альбуминовой (липопротеидной) оболочкой, дающей устойчивость во внешней среде, приобретают отрицательный заряд, предупреждающий спермоаглюцинацию. Спермиогенез и продвижение спермиев по каналу придатка продолжается до 1,5 месяца. В придатке скопляется масса спермиев и расходуется постепенно (придаток - «склад» спермиев) Они там сохраняются 1 - 2 месяца и больше. Столь длительная жизнеспособность спермиев в придатке объясняется следующим:

1. В просвете канала придатка - кислая реакция, что обуславливает переход спермиев в анабиотическое состояние.

2. Обилие кровеносных и лимфатических сосудов (в 7 раз более мощное, чем в головном мозгу) в придатке обеспечивает хороший обмен веществ.

3. Температура в полости мошонки ниже температуры тела на 3-4 (у быка 35-36°, баран 34-35°). Это способствует спермиогенезу и переживанию спермиев.

ПОЛОВОЙ АКТ -(совокупление, coitus) - сложный комплекс безусловных и условных рефлексов, обеспечивающий выведение спермиев и секретов придаточных половых желез из полового аппарата самца и введение их в половые пути самки (осеменение). Он слагается из следующих безусловных рефлексов:

1) локомоторный;

2) эрекции;

3) обнимательного;

4) совокупительного;

5) эякуляции.

 

На них наслаиваются и условные рефлексы. Например, молодой самец делает садку на каждую самку и даже на самца, а приобретя «жизненный опыт» - только на самку с феноменом охоты.

Безусловные рефлексы характерезуются:

1. Локомоторный рефлекс (приближение) – поиск самцами самок и наоборот.

2. Рефлекс эрекции - сильное наполнение кровью полового аппарата и пениса. Это придает половому члену упругость, обеспечивающую нормальное течение полового акта.

3. Обнимательный рефлекс (садка, покрытие) - вскакиваниепроизводителя на самку и обхватывание ее с боков передними конечностями.

4. Совокупительный рефлекс начинает проявляться одновременно с обнимательным и состоит в толкательных движениях крупа производителя, направленных и восприятию рецепторами кожи полового члена термических и механических раздражении, возникающих при его трении о слизистую оболочку вагины, что обуславливает эякуляцию.

5. Рефлекс эякуляции (осеменение) - выведение спермиев и секретов придаточных половых желез из половой системы самца.

ТЕМА: УСТРОЙСТВО И ПОДГОТОВКА ИССКУССТВЕННЫХ ВАГИН К ПОЛУЧЕНИЮ СПЕРМЫ ОТ САМЦОВ С.-Х. ЖИВОТНЫХ

Искусственная вагина для быка образца 1942 г. состоит из 1) цилиндра, изготовленного из синтетической резины с патрубком из резины натуральной (растягивающейся), длина цилиндра 50 см, диаметр 8 см; 2) резиновой камеры, 3) 2-х, 3-х фиксирующих колец резиновых; 4) эбонитового краника с надетой на него резиновой трубкой; 5) держателя стеклянного спермоприемника; 6) спермоприемника стеклянного с крышкой (трех видов); 7) поролоновой накладки.

Искусственная вагина с баллонообразным расширением для быка (автор И.И. Родин) состоит из: 1) алюминиевого цилиндра размером 25x6,5 см с нарезной горловиной и винтовым штифтом, расширенной части цилиндра 16x13,6 см, малого цилиндра 6x6,8 см для вставления спермоприемника, 2) резиновой камеры, 3) 2-х, 3-х фиксирующих колец резиновых, 4) держателя спермоприемника, 5) спермоприемника стеклянного (трех видов), 6)поролоновой накладки.

Укороченная вагина с одноразовым спермоприемником из полиэтиленовой пленки делается из цилиндра искусственной вагины образца 1942 г. состоит из 1) цилиндра укороченного до 30 см, 2) резиновой камеры, 3) 3-х фиксирующих резиновых колец, 4) эбонитового краника с резиновой трубкой, 5) одноразового спермоприемника, 6) резинового кольца, отрезанного от камеры для фиксации спермоприемника.

Искусственная вагина образца 1942 г. для барана состоит из 1) твердого эбонитового цилиндра с широким патрубком (цилиндр очень легко разбивается) длина цилиндра 20 см, диаметр 5,5 см, 2) резиновой камеры длиной 40 см, 3) специальной резиновой пробки с рантом, в которую вставляется эбонитовый краник с резиновой трубкой, 4) спермоприемника одностенного или двустенного с крышкой.

Резиновая искусственная вагина для хряка изготовляется из цилиндра искусственной вагины для образца 1942 г., у которой отпиливается часть длиной 10-15 см (в зависимости от размера пениса хряка), 2) резиновой камеры, 3) двух фиксирующих колец, 4) эбонитовый краник с резиновой трубкой, 5) резиновая муфта (обрезок камеры, с отверстием для выхода для выхода воздуха для закрепления спермоприемника, 6) спермоприемник (широкогорлая банка на 500 мл).

Электрическая искусственная вагина для хряка состоит из электрообогревателя и собственно вагины. Электрообогреватель - двустенный металлический цилиндр, заполняемый водой. Вода нагревается от электросвечи, вмонтированной внутрь обогревателя. Вагина состоит из металлической конусной одностеннной трубки с патрубком нагнетания воздуха. Внутрь трубки вставляется резиновая камера от искусственной вагины для барана. Специальный градуированный спермоприемник с фильтром и переходником (кусок камеры от искусственной вагины для барана).

Искусственная вагина для жеребца образца 1952 г. состоит из: 1) алюминиевого цилиндра длиной 54 см, в нем различают длинный цилиндр 42x13 см с ручкой и винтовым патрубком с винтовой пробкой, горловину длиной 5 см и короткий цилиндр 7,5 х8,7 см; 2) резиновой камеры; 3) специальных фиксирующих колец 3 шт. и одного кольца от искусственной вагины быка; 4) спермоприемника резинового в виде широкого стакана.

Спермоприемники к искусственным вагинам.

В искусственной вагине для быка используются стеклянные двустенные спермоприемники с крышками трехвариантные и одноразовые полиэтиленовые (конусообразные) двух вариантов.

Двустенные спермоприемники на одном конце имеют конусообразное углубление для спермы, а на другом или отверстие с винтовой нарезкой или воронкообразное углубление для заполнения межстенного пространства теплой водой. Третий вариант имеет градуированный цилиндр для спермы и боковой патрубок для заполнения спермоприемника теплой водой.

Одноразовые спермоприемники бывают простые, конусные и конусные с закрытым цилиндрическим чехлом, пробиркой на конце.

В искусственной вагине для барана применяют стеклянные двустенные спермоприемники, устроенные так же, как подобные для быка, и одностенные градуированные, воронкообразные.

В искусственной резиновой вагине для хряка в качестве спермоприемника используется широкогорлая стеклянная банка на 500-1000 мл желательно с фильтром.

В электровагине для хряка применяется специальный градуированный спермоприемник с фильтром.

Для искусственной вагины жеребца применяется спермоприемник -резиновый толстостенный сосуд в виде широкого стакана.

 

МОНТАЖ ИСКУССТВЕННОЙ ВАГИНЫ И ПОДГОТОВКА

К ВЗЯТИЮ СПЕРМЫ

Сборка искусственной вагины для быка образца 1942 г.

Концы нового цилиндра искусственной вагины необходимо закруглить с помощью скальпеля, ножа или напильника (иначе камера будет быстро прорезана). Резиновая камера проверяется на разрыв (растянуть на 1,5 раза) и выворачивается так, чтобы гладкая поверхность была обращена во внутрь (но некоторые быки лучше дают сперму на шероховатую поверхность). Камера вставляется внутрь цилиндра, так, чтобы с обоих концов выходила равномерно. Цилиндр берется под­мышку слева, и камера заворачивается поочередно на его концы. Следить затем, чтобы камера при этом не скручивалась в виде пропеллера. Равномерность растяжения достигается путем равномерных, достаточно сильных ударов ладонью правой руки по концу цилиндра с натягиваемой камерой (пальцами за концы камеры не тянуть, оборвутся). После равномерного натяжения камеры она фиксируется кольцами. Кольца должны быть обращены гладкой поверхностью наружу. Расстояние от края вагины до кольца – 2 см, иначе конец вагины в дальнейшем будет «надуваться». Держатель спермоприемника надевается за кольцо и сворачивается в сторону. В таком собранном виде вагина хранится и эксплуатируется, пока резиновая камера «не провиснет». Когда это случится, камеру заменяют.

Сборка искусственной вагины с баллонообразным расширением. Отличается только тем, что камера натягивается не сильно, что не ограничивает естественного движения пениса быка в момент получения спермы и торможения эякуляции.

Сборка укороченной искусственной вагины для стерильного получения спермы от быкаосуществляется натягиванием камеры на укороченный цилиндр (30см) с таким расчетом, чтобы с длинного конца она доходила до патрубка. На укороченной конец надевается одно фиксирующее кольцо, а на удлиненный два: первое, отступая от края 2 см, а второе - ближе к патрубку. После стерилизации вагины в автоклаве к ней присоединяется одноразовый спермоприемник, фиксируемый тонким резиновым кольцом (отрезанный от старой камеры). Естественный оборот пениса быка будет происходить в спермоприемнике. В патрубок вставляется эбонитовый краник.

Сборка искусственной вагины для барана.

Эбонитовый цилиндр очень хрупкий, требует аккуратного обращения. Края цилиндра закругляют напильником. Камера натягивается с трудом. Для облегчения работы цилиндр смачивается водой. Камеру натянуть гладкой поверхностью внутрь до самого патрубка, так как нет фиксирующих колец.

Сборка резиновой искусственной вагины для хряка такая же, как и искусственная вагина для быка 1942 г.

Сборка электровагины для хряка заключается в натягивании камеры от искусственной вагины для барана, гладкой поверхностью внутрь, на конусную одностенную трубку прибора.

Сборка искусственной вагины для жеребца заключается в надевании резиновой камеры на цилиндр и фиксации резиновыми кольцами: двумя большими со стороны длинного цилиндра, одним большим за горловину на цилиндр, одним малым - на короткий цилиндр.

Подготовка искусственной вагины

для взятия спермы

Материалы и инструменты для подготовки искусственных вагин

1. Подставки для искусственных вагин

2. Искусственные вагины в сборе

3. Спермоприемники

4. Подставка для инструментов эбонитовая или металлическая

5. Спиртовые тампоны (96 или 70% спирт)

6. Корнцанг

7. Воронка для наливания воды

8. Кружка с носиком

9. Эбонитовые краники с резиновыми трубками

10. Палочки эбонитовые (деревянные) 55 см с риской

11. Стерильный вазелин в баночке

12. Чайник с горячей водой

13. Резиновый баллон (спринцовка)

14. Химический или специальный термометр

15. Сода двууглекислая или углекислая

16. Таз

17. Ерши или притирки для мытья вагин

18. Пинцет

 

Эбонитовый краник должен свободно открываться и закрываться, плотно входить в патрубок или резиновую пробку. При неисправности краник разобрать и смазать вазелином.

Специальный термометр имеет три красные цифры: 0 -температура хранения разбавленной спермы; +18 граница температурного шока для свежеполученной спермы; +40-42° порог раздражения для эякуляции - такая температура во влагалище при феномене половой охоты.

Подготовка стеклянного спермоприемника.

Чистый спермоприемник обеззараживается сухим жаром. В межстенную полость наливается 100 мл воды с температурой 35-40⁰С, чтобы к моменту получения температура была 30-35⁰С (такая температура в придатке семенника и мошонке). Отверстие в дне или боку закрывается резиновой пробкой. Следить затем, чтобы вода не попадала на крышку, иначе эякулят погибнет. В практике снаряженные спермоприемники помещают в термостат при температуре 30-35⁰С и берут по мере надобности.

Инструменты для подготовки вагины стерилизуются путем протирания спиртовым тампоном, начиная с подставки. Корнцанг, пинцет, термометр протираются по правилам хирургии от конца к руке. Палочку для вазелина можно профламбировать.

Для эффективного получения спермы в искусственной вагине должны быть условия те же, что и во влагалище самки при феномене течки - температура, давление, влажность (скользкость).

Чтобы этого добиться, необходимо тщательно соблюдать порядок подготовки искусственной вагины, иначе половые рефлексы тормозятся. Поскольку искусственная вагина в промежутках между получениями спермы хранится только в чистом виде, то порядок ее эксплуатации следующий:

1. Стерилизация

2. Наливание горячей воды и вставление краника

3. Смазывание вазелином

4. Присоединение спермоприемника

5. Нагнетание воздуха

6. Измерение температуры

7. Получение спермы

8. Мытье искусственной вагины в содовом растворе

 

ПОДГОТОВКА ИСКУССТВЕННОЙ ВАГИНЫ ДЛЯ БЫКА

1. Обеззараживание искусственной вагины

Корнцангом берутся спиртовые тампоны (96-70%) и тщательно, от середины к краю, протирается внутренняя поверхность камеры и ее край, затем вагина переворачивается и так же обрабатывается. Спирт быстро испаряется, поверхность камеры остается сухой. Можно стерилизовать вагину в специальном стерилизаторе, кипячение в течение 15 мин, затем ставят вертикально на проутюженное полотенце для высыхания. Простерилизованная вагина кладется на подставку или на угол стола, чтобы концы оставались на воздухе. Концы вагины не брать пальцами, не прикасаться ими к одежде.

2. Наполнение горячей водой

В патрубок вставляется воронка или берется кружка с носиком и наливается 400-500 мл воды при температуре 50-60⁰С, чтобы к моменту получения спермы температура в вагине была 40-42⁰С. Патрубок затыкается краником, причем его ручка должна быть обращена вправо. Краник закрыт - ручка горизонтальна по отношению к корпусу вагины.

3. Смазывание камеры вазелином

На конец палочки берется стерильный вазелин и, начиная от наружного отверстия внутрь, камера смазывается вращательными движениями, по теплой поверхности вазелин размазывается легко. Конец, к которому присоединяется спермоприемник, остается не смазанным на 4-5 см для более прочного вставления спермоприемника и для предотвращения попадания вазелина в спермоприемник.

4. Присоединение спермоприемника

Обеззараженный и залитый водой спермоприемник вставляют в несмазанный вазелином конец искусственной вагины и укрепляют держателем.

5. Нагнетание воздуха

В межстенную полость искусственной вагины нагнетается воздух. В левую руку берется спринцовка и ее конец вставляется в отрезок резиновой трубки на кранике. Ручка краника правой рукой поворачивается вертикально - краник открыт, из спринцовки вдувается воздух. Краник закрывается. Вдувание воздуха производить до смыкания стенок камеры на всем протяжении. У входного отверстия камера имеет вид треугольной складки (если камера старая - складка может быть четырехугольная). Как исключение, можно надувать искусственную вагину и ртом, но в этом случае резиновую трубку на кранике надо обтереть спиртовым тампоном.

6. Измерение температуры

В искусственную вагину вставляют термометр и, обязательно удерживая его правой рукой, левой рукой начинают переворачивать искусственную вагину до тех пор, пока температура в ней не перестанет подниматься. Температура должна быть 40-42⁰С. Если температура выше, можно выпустить воздух, палочкой для вазелина сделать несколько вращательных движений внутри искусственной вагины и вновь надуть в нее воздух. При сильном отклонении температуры нужно добавить горячей или холодной воды, предварительно слив равное количество.

 

ТЕМА: ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ СПЕРМИЕВ (ПОДСЧЕТ СПЕРМИЕВ). ВЛИЯНИЕ НА СПЕРМУ ВНЕШНИХ ФАКТОРОВ

Подсчет спермиев производится в счетных камерах, применяемых для подсчета форменных элементов крови (камерах Горяева, Тома-Цейса, Бюркера, и Ключарева-Предтеченского).

Эритроцитарный меланжер (смеситель) употребляют для спермы быков и баранов, а лейкоцитарный - для спермы жеребца, хряка, собаки и кролика.

Меланжер промывают сначала чистой водой, потом 96%-ным спиртом и наконец, эфиром. Остатки эфира удаляются продуванием воздуха через меланжер.

В чистый, сухой эритроцитарный меланжер набирают сперму быка до метки 1,0, а барана - до 0,5, затем дистиллированную воду до метки 101; в лейкоцитарный меланжер сперму жеребца, хряка, кобеля, кролика набирают до метки 0,5, а дистиллированную воду - до метки 11. Зажимают пальцами оба конца меланжера и встряхивают его 1 -2 мин.

Первые три капли выбрасывают, а затем помещают каплю на счетную камеру, с покровным стеклом предварительно притертым до появления радужных колец.

На камере Горяева средняя пластинка разделена поперечным желобком на две половины, на каждой из которых нанесено по сетке. Вся сетка имеет площадь равную 9 мм и состоит из 15 горизонтальных и вертикальных полос, пересечением которых образовано 225 крупных квадратов. Ширина полосы, т.е. стороны большого квадрата, равна 1/5мм (3 мм - длина стороны сетки, разделенная на 15, т.е. 3/15=1/5 мм). Каждая третья вертикальная и горизонтальная полосы разделены на 4 узких полоски шириной 1/20 мм (1/5:4=1/20). При пересечении этих полос большие квадраты разделяются на 16 маленьких. Площадь одного маленького квадратика равна 1/400 мм (1/20x1/20). Глубина камеры равна 0,1 мм. Таким образом, объем одного маленького квадратика составляет 1/4000mm (1/400 мм х 1/10 мм). Во всей сетке имеется 25 разделенных больших квадратов, в каждом из которых имеется 16 маленьких. Всего маленьких, таким образом, 400 квадратов.

Подсчет ведут при малом увеличении, чтобы в поле зрения помещался один большой квадрат. Подсчитывают спермин в 5-ти больших квадратах по диагонали или же в 4-х по углам и в одном - где-нибудь в середине. В каждом большом квадрате спермин пересчитываются последовательно в 16 малых, причем лежащие на линии спермин считают в том случае, если головки их лежат на верхней или левой черте квадрата.

Таким образом, подсчитывают спермин в 80 малых квадратах (16x5). Вначале узнают, сколько спермиев приходится на один малый квадрат, для чего полученное число спермиев делят на 80. Так как объем одного малого квадрата в 4000 раз меньше 1 мм, то для определения спермиев в 1мм, полученное число умножают на 4000 и на степень разбавления спермы в меланжере.

Таким образом, используется следующая формула для определения

концентрации:

 

где с - концентрация спермиев в 1мм³; Н - число подсчитанных спермиев; Д - степень разбавления спермы в меланжере (для быка 100 раз, барана - 200, жеребца, хряка - 20 раз); п - число мелких квадратов (обычно 80); 4000 число перевода в 1 мм. Для определения количества спермиев в 1 мл полученное число С надо умножить на 1000 (ибо 1 мл = 1000 мм).

 

Порядок работы.

Подсчет патологических форм производится поэтапно:

1. Разбавление спермы.

2. Приготовление мазка.

3. Окраска мазка.

4. Микроскопирование и подсчет спермиев.

Свежеполученную сперму быка для уменьшения концентрации спермиев и удобства их подсчета в мазке разбавляем 1%-ным р-ром NaCl в 10-15 раз, а иногда и в 20 раз. Для этого в пенициллиновый флакон вносим сперму в объеме глазной пипетки, а затем туда же добавляем 10-15 пипеток р-ра NaCl. (Для сведения - сперму барана разбавляют в 20-30 раз, а хряка и жеребца в 2-3 раза или совсем не разбавляют).

Затем на чистое предметное стекло делается мазок из спермы (как при гематологическом исследовании) или методом стекающей капли. Опыт показывает, что приготовление мазка гематологическим методом, но нешлифованным стеклом, сильно травмирует спермиев механически. Поэтому лучше делать мазок методом стекающей капли (большая капля р-ра на один конец стекла, наклон его под углом 40-50°, чтобы капля стекала по всему стеклу до другого конца, но здесь под палец положить фильтр, бумагу, чтобы излишек впитался).

После приготовления мазок 5 минут высушивается на воздухе, но не на спиртовке, т.к. иначе будет деформация спермиев. Потом мазок зафиксировать, капнув на него глазной пипеткой 96%-ным спиртом-ректификатом или опустив на 1-2 мин. в стаканчик с 96%-ным спиртом. Затем мазок промывают, чтобы потом окрасить. Однако практика показала, что фиксация перед окраской необязательна. Можно окрашивать и высушенный мазок.

Окраску мазков можно производить фуксином Пфейфера, 0,1%-ным р-ром эозина и др.

Чтобы более равномерно окрасить мазок, накроем его фильтровальной бумагой, на которую обильно капаем краситель с помощью глазной пипетки. Окраска продолжается 5 минут. Затем снимаем фильтр, бумагу, промоем мазок дистиллированной или кипяченой водой и высушим его на воздухе, поставив вертикально.

Затем производится подсчет при увеличении 400-600 раз, передвигая мазок, нужно подсчитать в каждом поле зрения всех спермиев, учитывая отдельно нормальные и патологические формы спермиев: после чего вычисляют % патологических. Общее количество подсчитанных спермиев должно быть не менее 500.

Например: Сосчитано 500 спермиев и в их числе – 43 патологических. Составив пропорцию, вычисляют % патологических форм спермиев.

500 = 100%

43 = x

43х100

х =---------------= 8,6 %.

Задание: определить наличие патологических форм спермиев по следующей таблице:

Норма	Тератоспермия
Головка	Шейка	Тело	Жгутик

На основании полученных данных сделать выводы о качестве спермы.

И ХИМИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ

Влияние реакции среды

На предметное стекло наносят каплю спермы и действуют на нее 0,5%-ным р-ром уксусной кислоты. Капли перемешивают палочкой, покрывают покровным стеклом и замечают время, в течение которого спермин прекращают движение.

ДЛЯ РАЗБАВЛЕНИЯ СПЕРМЫ

В организме производителя - в придатке семенника спермии сохраняются до 60 дней. Этому способствует слабокислая среда и почти полное отсутствие солей.

Во время эякуляции к спермиям примешиваются секреты придаточных половых желез. В них растворено много солей, которые изменяют осмотическое давление и кислотность среды у быка и барана до нейтральной, у хряка и жеребца до слабощелочной. В результате спермии начинают активно двигаться.

При хранении спермы вне организма действие секретов придаточных половых желез становится вредным. Повышенная активность спермиев благодаря действию секретов, ведет к расходованию энергетических веществ (сахар) и накоплению молочной кислоты, что снижает переживаемость спермиев. Кроме того, калий и натрий, содержащиеся в секрете, нейтрализуют электрозаряд и приводят к спермоагглютинации.

Чем сильнее сперма разбавлена секретами, тем скорее она гибнет. Так свежая сперма хряка и жеребца гибнет при комнатной температуре через 1-2 часа с момента получения.

Таким образом, сперма гибнет вне организма от следующих факторов:

1. Вредное влияние секретов придаточных половых желез (особенно у жеребца и хряка).

2. Накапливание молочной кислоты и отравление спермиев продуктами обмена.

3. Израсходование питательных веществ (сахара).

4. Спермоагглютинация.

5. Температурный шок.

6. Действие попавших в сперму и размножившихся микроорганизмов.

Чтобы ослабить действие вредно действующих факторов сперму разбавляют. Разбавление должно не только предупредить потерю спермиями оплодотворяющей способности, а наоборот, способствовать повышению оплодотворяемости самок и предохранять от распространения инфекции.

Увеличение объема эякулята при разбавлении позволяет осеменить больше самок. К разбавителям спермы производителей должны предъявляться следующие требования:

1. Осмотическое давление в разбавителе должно равняться таковому спермы (8,3 атм. при температуре 38⁰С, при 0⁰С - 7,3 атмосфер).

2. Реакция разбавителя должна быть оптимальной РН - 7,2 - 7,6, т.е. слабощелочная.

3. Компоненты разбавителя должны обладать буферными свойствами.

4. В разбавителе должна быть соответствующая вязкость.

5. Компоненты разбавления не должны быть сами по себе вредными для спермиев.

6. В разбавителе должны быть компоненты, предохраняющие спермиев от температурного шока.

7. Компоненты разбавителя должны быть не электролитного характера (чтобы не снимать отрицательный заряд).

8. Иметь компоненты против развития или даже уничтожения микрофлоры.

9. Вещества разбавителя должны быть доступны и удобны при изготовлении и обращении с ними в работе.

Все компоненты разбавителя обеспечивают комплексное действие:

1. Питание спермиев.

2. Защита от температурного шока.

3. Буферность, т.е. сохранение в течение некоторого времени реакции спермы неизменной.

Чтобы разбавитель обеспечивал длительную переживаемость спермиев и высокую оплодотворяющую способность, он должен быть изотоничным, т.е. иметь осмотическое давление как в сперме животных того вида, для которого он предназначен.