Условия забора материала (крови).

1. Кровь берут при первом подозрении на малярию независимо от температуры тела, но лучше во время лихорадки или сразу после озноба.

2. Исследуют периферическую кровь из мякоти ногтевой фаланги 4-го пальца руки.

3. От одного больного готовить не менее 10 препаратов, особенно для диагностики малярии с низкой степенью паразитемии (микроскопия серийных толстых капель).

4. Предметные стекла должны быть тщательно вымыты и обезжирены.

5. Шлифовальное стекло, которым делается мазок, должно быть уже предметного, на котором делается мазок.

Приготовление мазков крови:

1. Обработать место укола 96% этиловым спиртом и проколоть мякоть пальца стерильным скарификатором одноразового пользования,

2. Выступившую первую каплю крови снять ватой.

3. Повернуть палец проколом вниз, прикоснуться предметным стеклом к выступившей крови так, чтобы она оказалась на стекле на расстоянии 1,5 см. от края.

4. Положить стекло на стол и, придерживая за его края пальцами левой руки, правой рукой поместить шлифовальное стекло впереди капли под углом 30 - 45 градусов, а затем подвести его к капле крови.

5. Когда кровь растечется по краю шлифовального стекла, его быстро продвигают по предметному стеклу.

6. Просушить мазок при комнатной температуре, после чего в левом верхнем углу его сделать надписи простым карандашом (Ф.И.О. пациента).

7. Приготовленный мазок зафиксировать в метиловом спирте 3-5 минут или в смеси Никифорова 10 минут, для чего мазки уложить на стеклянный мостик из трубочек, положенный на края ванночки и фиксатор из пипетки наливать прямо на мазки.

8. Оставить мазки до полного испарения фиксатора.

 

ПРИГОТОВЛЕНИЕ ТОЛСТЫХ КАПЕЛЬ КРОВИ:

1.На предметное стекло готовят мазок несколько толще обычного, но не дают ему окончательно высохнуть.

2. На еще влажный мазок наносят каплю крови. Кровь на мазке растекается правильным диском и высота капли остается примерно одинаковой независимо от объема взятой крови, отчего паразиты и клетки крови распределяются по площади всей капли равномерно.

3. Свободную от капли крови часть мазка подписать простым карандашом.

4. Высушить приготовленный препарат толстой капли крови на воздухе при комнатной температуре в течение 2-3 часов, не прибегая к подогреванию.

Только что приготовленные толстые капли при последующей окраске и промывании окрашенных препаратов отстают от стекла. Фиксация толстых капель не производится.

Окраска толстых капель и мазков: Окраску приготовленных мазков и толстых капель производят по Романовскому-Гимза и нейтральной или слабо-щелочной среде (рН 7,0 -7,2).

1. Свежеприготовленный раствор краски Романовского наливают на фиксированные мазки и высушенные нефиксированные толстые капли.

2. Мазки окрашивают в течение 35 - 50 минут, толстые капли - 20 - 25 минут.

3. Окрашенные препараты промывают тем же забуферным солевым раствором, на котором разводилась краска.

В правильно окрашенных препаратах хорошо видны эритроциты с находящимися в них малярийными плазмодиями. Ядра паразитов темно-розовые, рубиново-красные; протоплазма голубая или светло-синяя.

ВВЕДЕНИЕ ПРОТИВОБОТУЛИНИЧЕСКОЙ СЫВОРОТКИ

Показания. Лечение больных ботулизмом.

Общие сведения. Противоботулинические сыворотки представляет собой белковую фракцию сыворотки крови лошадей, гипериммунизированных анатоксинами возбудителей ботулизма. Сыворотки выпускают в виде комплекта моновалентных сывороток, содержащего по 1 ампуле сыворотки каждого типа (тип А- 10000МЕ, тип В- 5000МЕ, тип С- 10000МЕ) или в виде поливалентной сыворотки, содержащей антитоксины 3-х, 4-х типов. Сыворотки представляют собой прозрачную жидкость бледно-золотистого или желтоватого цвета. В коробки с сыворотками прилагается разведенная сыворотка (1:100). Ампулы с разведенной сывороткой маркируются красным цветом, с неразведенной - синим или черным. Сыворотку вводят по методу Безредко с определением индивидуальной чувствительности к чужеродному белку лошадиной сыворотки. Для этого проводится внутрикожная и подкожная пробы.

Больной, получивший сыворотку, должен находиться под наблюдением врача не менее I часа. При введении ПБС медицинские работники должны быть обеспечены средствами противошоковой терапии.

Оснащение рабочего места: 1) комплект ампул с сывороткой, штатив для ампул, пилка; 2) шприцы однократного применения инсулиновый (туберкулиновый) — 1 шт., шприц 1 (2) мл — 1 шт., шприцы по 10 мл, иглы для набора сыворотки из ампул, иглы для внутри-кожных, подкожных, внутримышечных инъекций; 3) стерильный материал (ватные шарики, марлевые треугольники) в упаковках; 4) лоток для стерильного материала; 5) лоток для использованного материала; 6) пинцет в дезинфицирующем растворе; 7) спирт этиловый 70% или другой антисептический раствор для обеззараживания кожи, другой дезинфицирующий раствор для обработки ампул (флаконов); 8) емкость с теплой водой для подогрева сыво­ротки, водный термометр; 9) медицинские перчатки, маска; 10) водонепро­ницаемый обеззараженный фартук; 11) пинцет в дезинфицирующем растворе для работы с использованным инструментарием; 12) емкости с дезинфици­рующим раствором для обработки поверхностей, промывания и замачивания использованных шприцев, игл, обеззараживания ватных и марлевых шари­ков, использованной ветоши; 13) чистая ветошь; 14) инструментальный сто­лик.

Подготовительный этап выполнения манипуляции.

1. Вымыть и просушить руки, провести гигиеническую антисептику рук.

2. Проверить наличие сыворотки в комплекте, срок годности, наличие этикетки, целостность ампул, внешний вид препарата.

3. Надеть фартук, маску, перчатки.

4. Обработать дезинфицирующим раствором лотки, инструментальный сто­лик, фартук. Провести гигиеническую антисептику рук.

5. Поставить на инструментальный столик необходимое оснащение.

Основной этап манипуляции.

Выполнение 1-й пробы,

6. Извлечь из коробки ампулу с сывороткой, разведенной в соотношении 1:100. Поставить ампулу в штатив на обеззараженный лоток.

7. Вымыть и просушить руки.

8. Обработать ампулу шариком, смоченным в спирте, надпилить, повторно обработать спиртом, вскрыть, поставить в штатив.

9. Вскрыть упаковку инсулинового (туберкулинового) шприца, зафиксиро­вать на канюле иглу для набора лекарственных средств.

10. Набрать в шприц 0,2 мл разведенной сыворотки.

11. Зафиксировать на канюле шприца иглу для внутрикожного введения и, не снимая колпачок, вытеснить воздух и избыток сыворотки на ватный шарик, плотно прижатый к канюле иглы.

12. Положить шприц в лоток. Обработать руки спиртом или другим антисеп­тиком.

13. Обработать кожу средней трети предплечья двукратно шариками со спир­том (широко, затем узко). Сухим шариком удалить остатки спирта.

14. Зафиксировать предплечье кистью руки и, натянув кожу в области предстоящей инъекции, ввести внутрикожно 0,1 мл разведенной сыворотки. При правильном введении должна образоваться папула белого цвета диа­метром около 8 мм,

15. Наблюдать в течение 20 мин за общей и местной реакциями. Проба счи­тается отрицательной, если диаметр отека и (или) гиперемии кожи менее 10 мм. Проба положительна, если отек и (или) гиперемия кожи 10 мм и более.

16. Вскрытую ампулу сбросить в лоток для отработанного материала. Если проба отрицательная,

выполнить 2-ю пробу.

17. Извлечь из коробки ампулу с неразведенной сывороткой. Поставить в штатив на обеззараженный лоток. Вымыть и просушить руки.

18. Обработать ампулу с неразведенной сывороткой спиртом, надпилить, по­вторно обработать, вскрыть и поставить в штатив на обеззараженный лоток.

19. Вскрыть упаковку шприца объемом 1 (2) мл, зафиксировать иглу для на­бора лекарственного средства.

20. Набрать в шприц 0,2 мл неразведенной сыворотки, иглу оставить в ампу­ле и накрыть ее марлевым треугольником. Вскрытую ампулу с неразведен­ной сывороткой поставить в штативе в холодильник или хранить при темпе­ратуре 20 ± 2 °С не более 1 ч.

21. Зафиксировать иглу для подкожного введения и, не снимая колпачок, вы­теснить воздух и избыток сыворотки. Положить шприц в лоток. Обработать руки спиртом или другим антисептиком.

2. Обработать кожу средней трети наружной поверхности плеча двукратно шариками со спиртом.

23. Ввести подкожно 0,1 мл неразведенной сыворотки, обработать место инъекции спиртом.

24. Наблюдать в течение 45 ± 15 мин за общей и местной реакцией.

При отсутствии аллергических реакций и осложнений (отек Квинка, крапив­ница, другая сыпь, анафилактический шок или его начальные проявления — головная боль, боль в крестце, животе, бронхоспазм, снижение давления, та­хикардия и др.) ввести лечебную дозу сыворотки.

25. Вымыть и просушить руки.

26. Подогреть ампулу с неразведенной сывороткой до температуры 36 ± 1 °С (см., п. 20).

27. Вскрыть упаковку шприца объемом 10 мл, зафиксировать иглу для набора лекарственного средства.

28. Набрать в шприц неразведенную сыворотку в назначенной врачом дозе.

29. Зафиксировать иглу для внутримышечного введения и, не снимая колпа­чок, вытеснить воздух и избыток сыворотки. Положить шприц в лоток.

30. Обработать руки спиртом или другим антисептическим раствором.

31. Обработать кожу ягодицы ребенка двукратно шариками со спиртом.

32. Ввести внутримышечно назначенную дозу сыворотки. Кожу обработать шариком со спиртом.