Инструменты для взятия материала из шейки матки

С диагностической целью материал получают раздельно из экто-и эндоцервикса с помощью шпателя (из влагалищной части шейки матки) и специальной щетки (типа «Cytobrush») – из цервикального канала. При проведении профилактических осмотров (скрининга рака шейки матки) используют различные модификации шпателя Эйра, поролоновые кубики и другие приспособления. Для получения материала одновременно из влагалищной части шейки матки, зоны стыка (или трансформации) и цервикального канала лучше использовать специальные щетки типа «Cervex-Brush», «CYTOPREP», «Papette» и др. (рис. 7.8, 7.9).

Перед получением материала шейку матки обнажают «в зеркалах», но никаких манипуляций не производят: шейку ничем не смазывают, слизь не удаляют. Щетку вводят в наружный зев шейки матки, осторожно направляя центральную часть щетки по оси цервикального канала. Затем щетку-наконечник поворачивают на 360° (желательно до 3-4 раз по часовой стрелке), чтобы взять достаточное количество клеток из эктоцервикса и из зоны трансформации. Вводить инструмент следует очень бережно, чтобы не повредить шейку матки. Затем

щетку выводят и материал распределяют на стекле (приготовление традиционного препарата). Переносить образец на предметное стекло нужно быстро, без подсушивания и потери прилипших к инструменту слизи и клеток. В случае приготовления тонкослойного препарата с помощью метода жидкостной цитологии (см. ниже), головку щетки отсоединяют от ручки и помещают в контейнер со стабилизирующим раствором.

Важно, чтобы в мазок попал материал из зоны трансформации, так как около 90% неопластических состояний исходят из зоны стыка плоского и цилиндрического эпителия и зоны трансформации, и только 10% – из цилиндрического эпителия цервикального канала.

Приготовление, фиксация мазков, жидкостная цитология, окрашивание мазков

Материал необходимо распределить тонким слоем, важно, чтобы весь он оказался на стекле. При получении материала раздельно из экто- и эндоцервикса его распределяют вдоль или поперек одной из половинок стекла (рис. 7.10).

Фиксация мазков

Если мазки предполагают окрашивать по методу Папаниколау, их необходимо зафиксировать влажными, сразу после получения (влажная фиксация). Фиксацию проводят специальными аэрозолями или фиксатором в капельной форме (фиксатор наносят на влажную поверхность мазка) (рис.7.11). Можно зафиксировать мазки, поместив их после получения в кювету с 96° этиловым спиртом на 10-20 мин. Затем мазки высушивают на воздухе.

Если мазки предполагают окрасить методом Романовского (модификации Лейшмана, Май-Грюнвальд-Гимзы, Паппенгейма), после получения их высушивают на воздухе (сухая фиксация).

Если предполагается окрашивание гематоксилином и эозином, можно использовать как сухую, так и влажную фиксацию мазков.

Жидкостная цитология

В настоящее время все чаще применяют метод жидкостной цитологии. Главное отличие данного метода от традиционного в том, что материал не наносят сразу на стекло, а помещают во флакон со стабилизирующим раствором (рис. 7.12). Стабилизирующий раствор обеспечивает сохранение морфологических, имммуноци-

тохимических и генетических свойств клеток. В лаборатории готовят монослойные препараты, предварительно стандартизировав образец по клеточности и с помощью цитоцентрифуги типа центрифуги «Cytospin», «Rotofix» и др. Можно сначала сделать мазки стандартным способом, а оставшийся на щетке (шпателе) материал поместить в стабилизирующий раствор и обработать описанным выше методом.

Окрашивание мазков

У каждого из методов окрашивания есть свои преимущества и недостатки.

Метод окрашивания по Папаниколау лучше всего подходит для гинекологических мазков, так как позволяет оценить степень зрелости цитоплазмы (от сине-зеленого цвета в незрелых клетках до розового в клетках со зрелой цитоплазмой и оранжевого в клетках с ороговением). Благодаря влажной фиксации хорошо сохраняются ядра, клеточная мембрана и структура хроматина.

Окрашивание по методу Романовского (азур-эозиновой смесью) используют в разных модификациях: по Паппенгейму (Май-Грюнвальд-Гимзе), Лейшману, Романовскому-Гимзе и др. Преимущество метода в четком прокрашивании ядерной субстанции, вследствие чего хорошо просматривается структура хроматина, а также бактериальной флоры и простейших. Поскольку существует множество модификаций, в тексте атласа при описании особенностей окрашивания клеток методом Романовского названы все методы, в которых применяют азур-эозиновую смесь.

Преимущество метода «гематоксилин – эозином» – в выраженном окрашивании атипичных ядер, поэтому его активно используют при скрининге.