Микробиологическая диагностика. Используется реакция иммунофлюресценции с противосибирязной сывороткой.

Используется реакция иммунофлюресценции с противосибирязной сывороткой.

Проводится бактериологический, биологический метод.

 

Реакция термо-кольце-преципитации (реакция Асколи).

Асколи реакция (A. Ascoli) — диагностическая реакция преципитации, используемая для диагностики сибирской язвы. Заключается в обнаружении в исследуемом материале термостабильного сибиреязвенного антигена при помощи преципитирующей сибиреязвенной сыворотки. Кусочки органов, шкуры, кожу, шерсть павших животных, иногда мясо, колбасу и молочные продукты, вытяжки из земли зараженных пастбищ и скотомогильников, фураж измельчают, заливают тройным объемом 0,5% раствора 80% уксусной кислоты в физиологическом растворе NaCl и экстрагируют в течение 10—15 мин. в аппарате Коха или автоклаве при t° 110°. Экстракт нейтрализуют, фильтруют до полной прозрачности через плотный бумажный фильтр или прокаленную асбестовую вату. Присутствие сибиреязвенного антигена выявляют наслоением экстракта оттянутой пастеровской пипеткой на преципитирующую сыворотку в узких пробирках в объеме 0,5 мл. Удобно пользоваться специальными пробирками Асколи (рис.). При положительной реакции на границе между сывороткой и экстрактом немедленно или через 5 — 10 мин. появляется кольцеобразное помутнение, становящееся все более интенсивным. Полученные результаты проверяются контрольными пробами (см. табл.).

№ пробирки (пробы)	Содержимое пробирки
1	Преципитирующая сыворотка + экстракт из исследуемого материала
2	Преципитирующая сыворотка + экстракт из селезенки заведомо сибиреязвенного животного
3	Преципитирующая сыворотка + экстракт из агаровой культуры бацилл сибирской язвы
4	Преципитирующая сыворотка + экстракт из материала, взятого от здорового животного
5	Преципитирующая сыворотка + физиологический раствор NaCl
6	Нормальная сыворотка + экстракт из исследуемого материала
7	Нормальная сыворотка + экстракт из селезенки заведомо сибиреязвенного животного
8	Нормальная сыворотка + физиологический раствор NaCl

В пробирках № 4, 5, б и 7 кольца помутнения отсутствуют. А. р. можно ставить по сокращенной схеме: пробы 1, 2, 5 и 6.

Феномен жемчужного ожерелья.

Тест «жемчужного ожерелья» основан на подавлении пенициллином синтеза клеточной стенки бациллы антракса с образованием сферопластов. Испытуемую трехчасовую бульонную культуру высевают на МПА в чашки Петри: в первой чашке содержится 0,5, во второй – 0,05 ЕД пенициллина на 1 мл среды, третья – контрольная. Посевы инкубируют 3 ч при температуре 37°С. На агаре с пенициллином бацилла антракса растет в виде цепочек, состоящих из шарообразных форм, напоминающих ожерелье из жемчуга. Сибиреязвенноподобные сапрофиты на агаре с пенициллином этого феномена не дают.

 

При аллергической пробе вводится антраксин.

Лечение.

Специфическое: противосибироязвенные иммуноглобулины.

Неспецифическое: антибиотики.

Профилактика.

Специфическая: живая вакцина.

Неспецифическая: сан-эпид.мероприятия.

 

 

Туляремия

Токсономия.

Семейство	Brucellacea
Род	Francissella
Вид	F. еualarensis

Морфологические и тинкториальные свойства.

Мелкие кокковидные полиморфные палочки, неподвижные, грамотрицательные, не образующие спор, могут образовывать капсулу. По Романовскому-Гимзе (в мазках) окрашиваются в нежно-фиолетовый цвет,а ядра в красный цвет.

Физиология.

Тип питания: хемоорганотрофы;

Тип дыхания: строгие аэробы;

Оптимальная температура 37 ºС, pH=6,2-7,4.

Культуральные свойства.

Не растут на простых питательных средах, на желточном агаре рост в виде бесцветного нежного налета, на кровяном агаре – беловатые колонии, гладкие с ровным краем (как жемчуг) на 2-5 день (иногда через 10-12).

Культивируются на среде Френсиса - колонии белого цвета.

Среда Емельяновой - гладкие, выпуклые.

На кровяном агаре - зона гемолиза отсутствует.

Среда обогащения - сывороточный и сахарный бульон (образование пленки/хлопьев).

Биохимические свойства.

Глюкозу, мальтозу, маннит ферментируют до кислоты.

Антигеные свойства.

О-АГ; К-АГ; Vi-АГ.

Факторы патогенности.

Имеется микрокапсула;

Эндотоксин;

Нейроминидаза.

Эпидемиология.

Источник инфекции – могут быть кровососущие и членистоногие.

Пути передачи – контактный, контактно-бытовой, алиментарный, трансмиссивный, воздушно-пыльевой.

Патогенез.

Проникает через неповрежденную кожу и слизистые оболочки, попадает в регионарные лимфоузлы, не вызывает воспаления, прорывает лимфатические барьеры, проникает в кровь и таким образом разносится в паренхиматозные органы, где размножается (вторичные очаги локализации).

Клиническая картина.

•         Возникает озноб,

•         Температура тела повышается до 38–40 °С. В дальнейшем она часто приобретает ремиттирующий или интермиттирующий характер.

•         Развиваются упорная головная боль,

•         Головокружение,

•         Мышечные боли,

•         Слабость.

•         Лицо больного гиперемировано и пастозно.

•         Отмечаются инъекция сосудов склер и гиперемия конъюнктив.

•         На слизистой оболочке рта могут быть точечные кровоизлияния,

•         Язык обложен.

•         Иногда встречается экзантема – эритематозная, макулопапулезная, розеолезная или петехиальная.

•         Развиваются лимфадениты, локализация которых зависит от клинической формы туляремии (входных ворот инфекции).

•         Отмечаются относительная брадикардия и умеренная артериальная гипотензия.

У части больных на 3–5‑й день болезни возникает сухой кашель.

У большинства больных выявляют раннее увеличение печени (со 2‑го дня) и селезенки (с 5–8‑го дня).

В периферической крови в первые дни болезни наблюдаются нормо– или умеренный лейкоцитоз со сдвигом лейкоцитарной формулы влево, повышение СОЭ. В дальнейшем гематологические изменения выражены более отчетливо: лейкопения, умеренный сдвиг лейкоцитарной формулы влево, лимфоцитоз и моноцитоз, увеличена СОЭ.

Осложнения в виде нагноений существенно меняют гемограмму.

Длительность лихорадочного периода при туляремии от 5–7 до 30 дней. Общая продолжительность заболевания в большинстве случаев 16–18 сут.

Клинические формы туляремии различают

По локализации процесса:

I. Туляремия с поражением кожи, слизистых оболочек и лимфатических узлов (бубонная, язвенно‑бубонная, глазо‑бубонная, ангинозно‑бубонная).

II. Туляремия с преимущественным поражением внутренних органов (легочная, абдоминальная и др.).

III. Генерализованная форма.

По длительности течения - острую, затяжную, рецидивирующую;

По тяжести – легкую, средней тяжести и тяжелую формы.

I. Бубонная форма туляремии

Бубонная форма туляремии возникает обычно при проникновении инфекции через кожу и проявляется воспалением регионарных лимфатических узлов, где накапливается возбудитель.

Бубоны бывают одиночными и множественными.

Наиболее часто поражаются подмышечные, паховые и бедренные лимфатические узлы.

На 2–3‑й день болезни в области лимфатического узла, где развивается бубон, появляется отчетливая болезненность. В последующие дни узел заметно увеличивается, достигая размеров от 2–3 до 8–10 см. Болезненность бубона уменьшается. Окружающая его подкожная клетчатка незначительно вовлекается в воспалительный процесс. Бубоны отчетливо контурируются. Над бубоном кожа не спаяна с ним и длительное время сохраняет нормальную окраску.

Эволюция бубонов различна.

У половины больных они медленно (1–4 мес) рассасываются и лимфатические узлы приобретают нормальный вид.

В других случаях через 3–4 нед и позже туляремийные бубоны нагнаиваются, размягчаются, кожа над ними становится отечной, затем прорывается и гной через свищ выходит наружу. Гной бубонов относительно густой, молочно‑белого цвета, без запаха. Туляремийные бактерии обнаруживаются в нем на протяжении 3 нед. Заживление туляремийного свища протекает медленно с образованием рубцов. Иногда наступает склерозирование бубонов.

При язвенно‑бубонной форме туляремии на месте внедрения возбудителя развивается первичный аффект. При этом с 1‑го по 7‑й день последовательно появляются пятно, папула, везикула, пустула, кратерообразная малоболезненная язва с приподнятыми краями. Язва покрывается темной корочкой со светлым шелушащимся ободком «кокардой». Иногда имеется местный лимфангит. Поражение регионарных лимфатических узлов (лимфаденит) протекает по типу первичных бубонов.

Глазо‑бубонная форма развивается при попадании возбудителя на слизистую оболочку глаз. Для нее характерны резко выраженный конъюнктивит с гиперплазией фолликулов и эрозивно‑язвенные изменения на слизистых оболочках пораженного глаза, сопровождающиеся выделением густого желтоватого гноя. Роговица редко вовлекается в патологический процесс. Общее состояние больных обычно тяжелое, течение заболевания длительное.

Ангинозно‑бубоиная форма туляремии возникает при проникновении возбудителей с инфицированными пищевыми продуктами и водой. Наряду с симптомами общего характера выявляются умеренные боли в горле, затруднение глотания, гиперемия зева. Миндалины увеличены, отечны, серовато‑белого цвета, с некротическими налетами, спаяны с подлежащей клетчаткой. Эти налеты с трудом снимаются и напоминают таковые при дифтерии, но не распространяются за пределы миндалин. Глубокие некротические поражения значительно разрушают миндалины и приводят к их рубцеванию. Как правило, поражается одна миндалина. У больных появляются шейные, околоушные, подмышечные бубоны, которые спустя длительное время могут нагнаиваться.

II.а. Абдоминальная форма туляремии

Абдоминальная форма туляремии обусловлена воспалительным процессом в мезентериальных лимфатических узлах. Одновременно с симптомами интоксикации возникают схваткообразные и постоянные боли в животе, тошнота, повторная рвота, анорексия. При объективном исследовании выявляют болезненность в области пупка и нередко симптомы раздражения брюшины. У худощавых субъектов иногда пальпируются увеличенные мезентериальные лимфатические узлы. Увеличены печень и селезенка.

II.б. Легочная форма туляремии

Легочная форма туляремии развивается вследствие воздушно‑пылевого пути передачи. В этом случае заболевание может протекать в двух вариантах: бронхитическом и пневмоническом.

Бронхитический вариант, при котором поражаются лимфатические узлы грудной клетки (бронхиальные, паратрахеальные, медиастинальные), сопровождается умеренно выраженными признаками интоксикации, загрудинными болями, сухим бронхиальным кашлем. В легких выслушиваются сухие хрипы. Заболевание длится 10–12 дней и заканчивается выздоровлением.

Пневмонический вариант легочной формы туляремии характеризуется острым началом, выраженным синдромом интоксикации и затяжным течением (от 2 мес и более). Больные жалуются на сухой, реже продуктивный кашель, боли в груди. При аускультации выслушивают сухие и влажные мелкопузырчатые хрипы. При рентгенологическом исследовании легких видны увеличенные прикорневые, паратрахеальные и медиастинальные лимфатические узлы. Инфильтративные изменения в ткани легких носят очаговый, реже лобарный или диссеминированный характер. Туляремийная пневмония отличается склонностью к рецидивам и осложнениям в виде бронхоэктазий, абсцессов, плевритов, гангрены легких, каверны (некротизация в пораженных участках легкого).

III. Генерализованная форма туляремии

Генерализованная форма туляремии наблюдается преимущественно у ослабленных лиц. Развитие ее происходит без местных изменений. Заболевание характеризуется упорной головной болью, общей слабостью, мышечными болями, повышением температуры до 39–40 °С. Характерен неправильно ремиттируюший тип температурной кривой продолжительностью до 3 нед и более.

У больных нередко отмечаются спутанное сознание, бред, низкое артериальное давление, глухость сердечных тонов, лабильность пульса. Уже в первые дни развивается гепатоспленомегалия. В периферической крови наблюдается умеренно выраженный лейкоцитоз со сдвигом формулы влево, СОЭ увеличена до 40–50 мм/ч.

В разгар заболевания у многих больных появляется розеолезная сыпь, которая располагается симметрично на верхних и нижних конечностях, лице, шее, груди (в виде «перчаток», «гетр», «воротника», «маски»). Постепенно сыпь приобретает багрово‑медный оттенок, исчезая через 8–12 дней. К осложнениям этой формы туляремии относят вторичную пневмонию, менингит, менингоэнцефалит, инфекционный психоз, миокардиодистрофию, полиартрит, рецидивы болезни.

Иммунитет.

Напряженный.Активируется гуморальный и клеточный иммунитет.

Лабораторная диагностика.

Основной метод биологический.

1.Заражение морских свинок материалом в зависимости от формы инфекции.

Введение происходит внутрибрюшинно/подкожно;

2.Через некоторое время делаем вскрытие трупа.

3.Производим мазок из органа(окраска по Граму/по Романовскому-Гимзе)

4.Делается посев на сложные питательные среды.

Инкубируем 24 часа при t=37;

5.Изучаем культуральные свойства.

6.Делаем ориентировочеую реакцию агглютинации с противотулярийными сыворотками (+хлопья, - помутнение)

7.Пересев на скошенный питательный агар/сывороточный агар.Инкубируем 24 часа при t=37.

8.Оценка результатов.

Также проводятся серологические реакции.

Аллергическая проба- обнаружение антитоксического иммунитета.

Вводится подкожно тулярин.

Результаты:

Папула более 5 мм «+» человек болеет/вакцинирован/бактерионоситель.

«- нет иммунитета.

Лечение.

Неспецифическое - антибиотики.

Профилактика.

Специфическая - живая туляримийная вакцина, бактериофаг.

Неспецифическая - карантин, проведение лекций, ношение спец.одежды.

 

 

 

Бруцеллез

Токсономия.

Семейство:	Brucellacea
Род:	Brucella
Виды:	B. melitensis, B. abortus, B. suis, B. ovis, B. canis