Определение общей микробной контаминации объектов окружающей среды

Проводят согласно СанПин 2.3.21078-01 из смывов, выполненных с анализируемой площади.

Анализ общей микробной контаминации необходим, если происходит порча молока и для контроля санитарного состояния перерабатывающих предприятий.

Смывы выполняют с площади 100 см² , используя рамку – шаблон, стерильным тампоном с 10 мл стерильной дистиллированной водой (1%-ный раствор пептона, или физиологический раствор). Готовят разведения смывов: 1:10, 10^-2, 10^-3, 10^-4 , 10^-5 , 10^-6, 1 мл каждого смыва сеют в питательный агар или среду для выделения МАФАнМ глубинным способом. Через 48 часов подсчитывают колонии, умножают на разведение, определяют сумму и делят на количество учтенных разведений. Микробное число (общая микробная контаминация) молочной посуды, оборудования не должны превышать 50 тыс. КОЕ/мл.

По СанПин 2.3.21078-01 общую обсемененность предметов рассчитывают по формуле:

 

М= Н · а/S,

 

где М – общая микробная обсемененность, Н – коли-

чество колоний в 1 мл разведения смыва; а–разведение смыва; S – площадь, с которой сделан смыв, см² . Результат выражают числом КОЕ на 1 см²  исследуемой поверхности. Нормативные показатели предметов окружающей среды по санитарно-микробиологическим тестам представлены в таблице 17.

Таблица 17 - Критерии оценки по санитарномикробиологическим тестам предметов окружающей среды

 

Оценка объекта	Общая микробная обсемененность КОЕ/см^2
Чистый	До 10000
Умеренно загрязненный	10000 - 100000
Сильно загрязненный	Более 100000

 

Для исключения присутствия БГКП, смывы сеют в среду Кесслер, учет через 48 часов, отмечают как положительные пробирки, в которых помутнение, наличие газа в поплавке, изменение цвета, так и отрицательные без признаков роста, они дальнейшему исследованию не подлежат.

Из пробирок с положительным ростом выполняют пересев на среду Эндо, через 18 – 20 часов изучают характер роста, проводят бактериоскопию колоний темнофиолетового и розового цвета с металлическим блеском, в случае обнаружения грамотрицательных коротких палочек делают вывод о присутствии на исследуемом образце БГКП. 

 

Микрофлора кожи

Постоянные обитатели кожи – стафилококки и стрептококки разных видов, они живут в просвете сальных и потовых желез, используя для питания секреты этих желез. При усиленном сало-, потоотделении активно пролифелируют, вызывая воспаление и образование фурункулов, карбункулов, абсцессов, флегмон.

На кожи присутствуют микрококки, актиномицеты, плесневые грибы, кишечные бактерии, гнилостные бациллы, они попадают на кожу с пылью, при контакте с почвой, навозом. Много микроорганизмов на коже покрытой шерстью, меньше на безволосой.

Микроорганизмы на коже уничтожают при выполнении инъекций, операций. Для лечения ран используют антисептические и другие средства АПБ. Эффективность лечения ран зависит от плотности микроорганизмов. Раны инфицированные плохо заживают или вообще не заживают, чистые, практически без микробные зарастают эпителием или соединительной тканью.

За чистотой кожи животных необходимо следить и устранять загрязнения, избыток сала, пота.

При выполнении чистой работы, приеме пищи руки моют, перед хирургической операцией особенно тщательно, голову закрывают колпаком.

Чистоту рук проверяют посевом смыва тыльной части ладони, ладони, межпальцевой поверхности, ногтевого ложа и подноготного пространства на среду Эндо, среду Кесслер, чтобы исключить присутствие БГКП.

 

Микрофлора органов дыхания

По заселению микроорганизмами в норме и патологии органы дыхания подразделяют на верхние, средние, нижние дыхательные пути и легкие.

В норме микроорганизмы присутствуют в верхних дыхательных путях, на слизистой носа, гортани. Состав микрофлоры непостоянный и соответствует микрофлоре воздуха. Активное размножение подавляется лизоцимом, интерфероном.

Средние дыхательные пути - трахея содержат единичные микроорганизмы и только в верхней трети.

Нижние дыхательные пути – бронхи стерильные. Легкие стерильные. Если в эти органы попадают микроорганизмы, что возможно при ослаблении защитных сил в результате переохлаждения (простуде), возникает воспаление: бронхит, пневмония. Для лечения применяют АБП бактерицидного действия.

Чаще при простуде активизируется микрофлора слизистой верхних дыхательных путей, возникает воспаление: ринит, ларингит, если не применять АБП бактериостатического действия, то микрофлора распространяется на слизистую трахеи, возникает трахеит, а далее бронхит и пневмония.

 

Микрофлора вымени

Микробы обитают в сосковом канале, молочной цистерне, молочных протоках (единичные особи). Альвеолы, где идет фильтрация молока из крови – стерильные.

Микроорганизмы в сосковый канал попадают с кожи, подстилки, аппарата. Почти всегда выделяют микрококки: Micrococcus luteus, M.flavus, Corynobacterium bovis, Str.lactis. При содержании на грязной подстилке в молочную цистерну могут внедриться в больших количествах маслянокислые клостридии, гнилостные бациллы, которые будут придавать молоку запах и привкус.

Если микроорганизмы проникают в альвеолы, возникает мастит. Возможности вызвать катаральный и серозный мастит имеют Str.agalactia 70 -80% случаев,

St.aureus, E.coli, Klebsiella aerogenes, Ps.aeruginosa, Proteus vulgaris. Для лечения мастита применяют АБП цистернально и внутримышечно.

 

Вопросы для обсуждения

 

1. Понятие инфекция, инфекционный процесс, инфекционная болезнь.

2. Формы инфекции.

3. Патогенность, вирулентность, факторы вирулентности.

4. Пути распространения возбудителей по организму и способы заражения.

ТЕМА 8 Препараты специфической профилактики, терапии и диагностики инфекционных болезней

 

Цель занятия. Изучить характеристику вакцин, сывороточных препаратов, аллергенов, диагностикумов, познакомиться с образцами.

 

Оборудование и материалы. Посевы смывов, кожи. Образцы вакцин, сывороток, аллергенов, диагностикумов.

 

Задание для самостоятельной работы студентов.

1. Провести учет посевов смывов, кожи, дать заключение. 2. Разобрать характеристику вакцин, сывороток, аллергенов, диагностикумов, познакомиться с образцами.

 

Таблица 18 - Санитарно-бактериологические показатели смыва

 

Наименование посева	Наличие роста	Санитарное состояние
1 мл смыва
1 мл смыва, разведенного 1:10

 

Таблица 19 - Критерии оценки по санитарномикробиологическим тестам предметов окружающей среды

 

Оценка объекта	Общая микробная обсемененность КОЕ/см^2

 

Препараты для специфической профилактики, лечения, диагностики инфекционных заболеваний называют биопрепаратами. Для ветеринарной практики выпускают более 150 наименований биопрепаратов. Производят их на биофабриках, биокомбинатах. Для медицинских целей биопрепараты изготавливают в НИИ вакцин и сывороток.

 

Вакцины, характеристика

Вакцины – антигенные препараты для создания активного искусственного иммунитета. Выпускают и используют несколько типов вакцин.

● Живые вакцины – взвеси ослабленных возбудителей. Выпускают жидкие и лиофильно высушенные вакцины. Широко применяют для профилактики сибирской язвы (вакцина из штамма СТИ, вакцина из штамма 55 ВНИВВиМ), трихофитии (вакцина ЛТФ 130, вакцина Триховак), рожи свиней (вакцина из штамма VR 2), листериоза (вакцина АУФ), сальмонеллеза свиней (вакцина из штамма ТС-130, вакцина из штаммов №5 и №9). Главное преимущество живых вакцин, они создают напряженный и длительный иммунитет, но могут давать осложнения у ослабленных и инфицированных животных.

● Убитые вакцины (инактивированные) – взвеси вирулентных возбудителей, инактивированные формалином, пропиолактоном, гидроксиломином, этиленимином и сорбированные на адъювантах.

Адъюванты (фр. Adjuvans – помогающий, полезный) – вещества усиливающие и пролонгирующие иммунный ответ. К ним относят: алюмокалиевые квасцы, гидроокись алюминия (гидрооксал, промышленное производство на Щелковском биокомбинате), сапонин (применяют в составе биопрепаратов для медицинских целей) – экстракт коры мыльного дерева. Сапонин входит в состав вакцин для животных, но в смеси с гидрооксалом. В качестве адъюванта применяют смесь ланолина и вазелинового масла. Вакцины, содержащие масляный адъювант, называют эмульгированными. Перспективно в качестве адъюванта использовать синтетические полимеры.

Убитые вакцины менее эффективны, чем живые, но они не дают осложнений, поэтому их также широко применяют: концентированная формолквасцовая вакцина против паратифа телят, концентированная гидроокисьалюминиевая формолвакцина против рожи свиней и др. 

К убитым вакцинам относят:

▪ сплит-вакцины - экстракты поверхностных структур возбудителей, например инактивированная вакцина против пастереллеза кур;

▪ субъединичные вакцины – очищенные экстракты протективных антигенов возбудителей.

● Анатоксины (греч. ana – обратно, toxikon – яд) - обезвреженные формалином экзотоксины возбудителей, сорбированные на адъювантах. Применяют для профилактики инфекционных заболеваний, в патогенезе которых важная роль принадлежит токсинам (ботулизм, столбняк, эмкар, брадзот, злокачественный отек). Анатоксины выпускают в форме моно - (гидроокисьалюминенвая формолвакцина против эмкара) и ассоциированных (вакцина против брадзота, инфекционной энтеротоксемии, злокачественного отека и анаэробной дизентерии ягнят).

В медицине анатоксины представляют собой комплекс бактериальных полисахаридов и обезвреженных, очищенных токсинов, поэтому их относят к молекулярным вакцинам.

● Поливалентными называют вакцины против разных серогрупп или серовариантов возбудителей (поливалентная гидроокисьалюминиевая вакцина ВГНКИ против лептоспироза животных).

● Ассоциированные вакцины содержат комбинацию антигенов разных возбудителей (ассоциированная вакцина против эшерихиоза, сальмонеллеза, клебсиеллеза и протейной инфекции телят).

Вакцины применяют клинически здоровым животным строго по инструкции: подкожно, внутримышечно, внутрикожно, птице- аэрозольно, выпаивая с водой. Формируется иммунитет в течение 7-14 дней после введения, напряженность составляет 11-12 месяцев. Исключение составляет напряженность иммунитета после введения вакцины ЛТФ-130 против трихофитии. Иммунитет против трихофитии формируется в течение 30 дней после двукратной иммунизации, напряженность 4 года.

Вакцины всех типов после приготовления проверяют по трем показателям:

- стерильность, по отсутствию роста у инактивированных препаратов и чистоте роста у живых;

- безвредность определяют биопробой на лабораторных животных, вакцина не должна вызывать заболевание и гибель лабораторных животных;

- активность (иммуногенность) также определяют биопробой на лабораторных животных, заражая заведомо летальной дозой, 80% вакцинированных должны выжить, контрольные - погибнуть.