Заглавная страница Избранные статьи Случайная статья Познавательные статьи Новые добавления Обратная связь FAQ Написать работу КАТЕГОРИИ: АрхеологияБиология Генетика География Информатика История Логика Маркетинг Математика Менеджмент Механика Педагогика Религия Социология Технологии Физика Философия Финансы Химия Экология ТОП 10 на сайте Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрацииТехника нижней прямой подачи мяча. Франко-прусская война (причины и последствия) Организация работы процедурного кабинета Смысловое и механическое запоминание, их место и роль в усвоении знаний Коммуникативные барьеры и пути их преодоления Обработка изделий медицинского назначения многократного применения Образцы текста публицистического стиля Четыре типа изменения баланса Задачи с ответами для Всероссийской олимпиады по праву Мы поможем в написании ваших работ! ЗНАЕТЕ ЛИ ВЫ?
Влияние общества на человека
Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрации Практические работы по географии для 6 класса Организация работы процедурного кабинета Изменения в неживой природе осенью Уборка процедурного кабинета Сольфеджио. Все правила по сольфеджио Балочные системы. Определение реакций опор и моментов защемления |
Работа 1.3.1 Определение количества эритроцитов в 1 мкл крови.Содержание книги
Поиск на нашем сайте
Нормальное среднее содержание эритроцитов в 1 л крови: у мужчин 4,0-5,0∙1012/л; у жен-щин - 3,7-4,7∙1012/л. Общее количество эритроцитов, циркулирующих в организме взрослого человека - 25∙1012 - 30∙1012. Зрелые эритроциты человека не содержат ядра. Уменьшение количества эритроцитов имеет место при кровотечениях, гемолитических, железо- и B12 (фолиево)-дефицитной анемиях, лейкозах, метастазах злокачественных но-вообразований, гипо- и апластических процессах, сопровождающихся пониженной эрит-робластической функцией костного мозга, и др. Увеличение количества эритроцитов выявляют при эритремии и эритроцитозах. Пробирочный метод. Удобным и достаточно точным является способ разведения крови в пробирках. Для этого в предварительно высушенную чистую пробирку точно отмеривают пипеткой 4 мл разводящей жидкости и осторожно выдувают в нее 0,02 мл капиллярной крови (кровь забирают пипеткой от гемометра Сали). Полученное разведение 1:202 мож-но практически принять равным 1:200. Взвесь тщательно перемешивают и затем запол-няют камеру. Подсчет в камере Горяева. Обычно пользуются камерой Горяева с двумя сетками, раз-граниченными глубокой поперечной канавкой. Сбоку от сеток находятся стеклянные прямоугольные пластинки, к которым притирают специальные шлифованные покровные стекла. Сетка Горяева состоит из 225 больших квадратов (15 . 15). Большие квадраты, расчерченные вертикально и горизонтально на 16 малых квадратов, чередуются с квадратами, разделенными только вертикальными или горизонтальными линиями, и квадратами чистыми, без линий. Глубина камеры равна 1/10 мм, сторона ма-лого квадрата-1/20 мм; таким образом, объем малого квадрата равен 1/4000 мм. Большие квадраты, состоящие каждый из 16 малых, служат при счете ориентирами. Перед заполнением камеру и шлифованное покровное стекло моют и сушат. Покровное стекло притирают к камере так, чтобы появились радужные кольца (только при этих ус-ловиях соблюдается правильный объем камеры). Каплю разведенной крови вносят пипет-кой под притертое покровное стекло камеры. После заполнения камеру оставляют на 1-2 мин в покое для оседания форменных элементов, затем приступают к подсчету при малом увеличении микроскопа в затемненном поле зрения (диафрагма прикрыта и несколько опущен конденсор).
Эритроциты считают в пяти больших квадратах (5x16=80 малым квадратам), располо-женных по диагонали, поскольку распределение клеток в камере может быть неравно-мерным. Для этого под микроскопом ищут левый верхний большой квадрат (разграфлен-ный), подсчитывают количество находящихся в нем эритроцитов, затем по диагонали вниз и направо находят следующий разграфленный квадрат и т.д. Найденное в каждом квадрате число эритроцитов заносят в протокол опыта. Во избежание повторного подсчета одних и тех же эритроцитов руководствуются сле-дующим правилом: подсчитывают все эритроциты, находящиеся внутри малого квадрата; на разграничительных линиях подсчитывают их только тогда, когда они большей своей половиной заходят внутрь квадрата. Клетки, пересеченные разграничительной линией пополам, подсчитывают лишь на двух сторонах квадрата - левой и верхней; клетки, выхо-дящие большей своей половиной за пределы разграничительных линий, совсем не счита-ют. Результаты подсчета эритроцитов по каждому из 5 больших квадратов записывают отдельно и суммируют. Для расчета количества эритроцитов в 1 л пользуются следующей формулой: X= А x 4000x Б В где X - количество эритроцитов в 1 л крови; А - сумма эритроцитов, подсчитанных в оп-ределенном количестве малых квадратов; 4000 - множитель, приводящий результат к объему 1 мкл крови, поскольку объем малого квадрата 1/4000 мкл; Б - степень разведения крови (200 раз); В - число малых квадратов, в которых считались эритроциты; 106 - коли-чество микролитров в 1 л. При подсчете в 5 больших (80 малых) квадратах и при разведении крови в 200 раз форму-ла для определения количества эритроцитов в 1 мкл крови приобретает следующий вид: X= А x 4000x 200 106 80 Для получения более точного результата производится подсчет в двух сетках и используется для подсчета средний арифметический результат. РАБОТА 1.3.2 Определение содержания гемоглобина. Гемоглобин является дыхательным пигментом эритроцитов, составляя до 90% их сухой массы. Гемоглобин - сложный белок, состоящий из собственно белковой части (глобин) и небелковой части - простетической группы (гем), содержащей железо. Важнейшая функ-ция гемоглобина - связывание, перенос и высвобождение кислорода. Кроме этого, гемо-глобин является главным внутриклеточным буфером, поддерживающим оптимальное для метаболизма рН. Содержание гемоглобина в норме-130-180 г/л. Определение количества гемоглобина имеет большое значение и является обязательным компонентом любого ана-лиза крови. Важнейшими методами определения являются колориметрические.
Оснащение: гемометр Сали, 0,1 % раствор НСl, дистиллированная вода, капилляр. Содержание работы. Гематиновый метод (метод Сали) основан на превращении гемоглобина при добавлении к крови хлористоводородной кислоты в хлорид гематина коричневого цвета. В учебных це-лях используют гемометр Сали, состоящий из трех пробирок одинакового диаметра. Одна (средняя) пробирка - пустая, две другие содержат стандартный раствор солянокис-лого гематина определенной окраски. В градуированную пробирку до нижней метки на-ливают 0,1 % раствор хлористоводородной кислоты. В капиллярную пипетку до линейки 0,1 набирают кровь и медленно выпускают ее под слой кислоты. Содержимое пробирки перемешивают и оставляют на 5-10 мин. Затем полученный раствор хлорида гематина темно-коричневого цвета разведят водой до цвета стандарта, интенсивность окраски ко-торого соответствует идеальной норме - содержанию гемоглобина 166,7 г/л (16,67 г%). Как только цвет исследуемой жидкости полностью сравняется с цветом стандартов в ге-мометре Сали, отмечают, какому делению шкалы градуированной контрольной пробирки соответствует нижний мениск жидкости: это и будет искомое количество гемоглобина. В настоящее время метод считается рутинным, в клиниках применяется редко, так как су-ществуют точные автоматические методы.
|
||||||
Последнее изменение этой страницы: 2021-03-09; просмотров: 59; Нарушение авторского права страницы; Мы поможем в написании вашей работы! infopedia.su Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Обратная связь - 3.135.184.124 (0.007 с.) |