Полимеразная цепная реакция (ПЦР).

ПЦР является наиболее чувствительным методом. Реакция обнаруживает вирусные НК. Реакция открыта в 1985 году в США.

Сутью метода является амплификация, т.е. увеличение числа копий строго определенных фрагментов молекул ДНК in vitro. ПЦР основана на амплификации ДНК при помощи ДНК-полимеразы, которая осуществляет синтез взаимокомплементарных цепей ДНК начиная с 2-х праймеров (затравок)

Primer – фрагмент ДНК из 20-30 нуклеотидов. Синтезированный искусственно. Праймеры комплементарны противоположным цепям ДНК. Обычно при ПЦР ставят от 25 до 40 циклов в зависимости от возбудителя. Каждый цикл состоит из трех этапов.

1. Денатурация. 92-95 градусов С, 20-60 секунд. Происходит разрыв водородных связей цепей ДНК.

2. Отжиг – присоединение праймеров. 50-60 градусов С, 40-60 секунд. Происходит забрасывание праймеров, нуклеотидов и ДНК-полимеразы.

3. Элонгация – достраивание цепей ДНК. 68-72 градуса С, 40-60 секунд. Число цепочек ДНК удваивается. Образовавшиеся в первом цикле цепочки ДНК служат матрицами для последующих циклов и т.д. Таким образом в каждом цикле идет удвоение числа копий амплифицируемого участка, что позволяет за 25-40 циклов наработать 2²⁵-2⁴⁰ участков ДНК, что позволяет обнаружить их методом электрофореза.

В ПЦР используют праймеры из консервативных участков ДНК вируса, которые имеют уникальную последовательность для каждого возбудителя.

Методика постановки.

Из исследуемого материала выделяют НК, которую помещают в чистую пробирку и добавляют амплифицирующую смесь, которая состоит из:

- Буфера

- ДНК-полимеразы

- Раствора 2-х видов праимеров

- 4-х видов нуклеотидов

- Магний-хлорного катализатора

- Крезолового красного для визуальной оценки

- Доливают деионизированной воды.

- Сверху капают минеральное масло.

Пробирки помещают в програмируемый термостат-амплификатор и проводят амплификацию в автоматическом режиме по заданной программе для соответствующего вида возбудителя (2-3 часа). Одновременно ставят положительный и отрицательный контроль.

Регистрация результатов – детекция амплификонов. Проводят методом электрофореза в 1-2% агаровом геле в присутствии бромистого этидия, который соединяется с фрагментами ДНК и высвечивается в виде полосок при УФО (трансилюминатор).

ПЦР,ее принцип,практ исп-ие,дост и недост.

Не серолог. р-ция,напр-на на обнар-ие вир-й нукл-й к-ты(генома). Принцип:у выд-й из пат мат вир-й нукл к-ты многократно воспроизводят(копируют) опред-й наиболее консервативный уч-к «in vitro», а затем его идентифицируют.У больш-ва вир-в нукл к-ты расшифрованы (послед-ть нуклеотидов)-около 500 пар нуклеотидов-участки, специф-ие для опред. типа вируса.Эти уч-ки наз-ся ампликоны. Их надо многократно воспроизвести.

3 этапа 1 цикла ПЦР(надо 25-40)- амплификация;

1)Денатурация: нагревают до 90-92С в теч 1мин (чтобы разорвать водород.цепь) 2)Отжиг (гибридизация): смесь охлаждают до 58-62С в теч 1мин(чтобы специф-ие праймеры присоед. к противоп-м концам ампликона по принципу комплементарности).Праймеры комплем-ны концам амп-а 3)Элонгация:нагрев до 68-72С 1мин-в присутствии фермента ДНК-полимеразы нуклеотиды синтез-т дочернюю цепь, комплементарную матрице начиная с праймеров от 3^/ к 5^/ (достраив-ся за 3 мин).

Методика ПЦР: 1ст:Пробоподготовка-выделение из пат мат суммарной ДНК 2ст:Амплификация

реакционная смесь(минер масло+ионы магния+суммарная ДНК+фермент+ нуклеотиды+2вида праймеров) =>помещают в амплификатор(амплификация)-прох-т циклы ПЦР.

3ст:выдел.ампликонов методом электрофареза в агарозе:м/ду пластм-ми зал-т агарозу,и пока она не заст вставл гребенку =>образ-ся корманы.Затем добавл флуоресц-ое в-во и помещ в УФ(трансиллюминатор)-свечение.

 

Бешенство.

1. Сем.: рабдовирусы (греч. рабдос - стержень, палочка).

2. Вирус - РНК-содержащий, пулевидной формы, длина 180 нм. толщина - 70-80 нм, спиральный тип укладки, имеет наружную оболочку с булавовидными выпячиваниями, гемагглютининов нет. Нейротропный; вирус имеет 4 серотипа.

3. Болеют все млекопитающие, чувствительны и птицы, но в значительно меньшей степени. Болеет человек. Болезнь распространена на всех континентах. Домашние животные чаще всего заражаются при покусах больными дикими животными (лисами, волками и др.). Болезнь почти всегда кончается смертельно.

Клинические симптомы бешенства у всех животных сходны и характеризуются поражениями центральной нервной системы (у собак бывает буйная или тихая паралитическая форма). От места внедрения (обычно укуса) вирус движется к головному мозгу по нервным стволам. Это движение занимает от 10 дн. до нескольких месяцев в зависимости от места внедрения, чем определяется большой инкубационный период.

Вирус размножается в головном мозгу, при этом поражаются нейроны и вызывают клиническую картину бешенства.

Патологоанатомические изменения при бешенстве неспецифичны.

4. Заподозрить бешенство можно по клиническим признакам при вероятности наличия бешенства на этой территории (эпизоотологичес-кие данные).

Окончательный диагноз на бешенство может быть поставлен только на основании лабораторных исследований материала от больного животного (посмертно). Материал для исследования; голова павшего животного, а в случае, если животное мелкое, - труп целиком.

Экспресс-метод - обнаружение вирусного антигена с помощью РИФ, РДП, а также телец Бабеша-Негри в различных отделах головного мозга (аммонов рог. кора полушарий, мозжечок и продолговатый мозг) павших

животных.

Вирусологические методы. При отрицательных результатах экспресс-метода ставят биопробу на молодых мышатах (заражают интрацеребрально не менее 12 мышей), результат учитывают путем исследования мозга павших мышей в РИФ, РДП и по обнаружению телец Бабеша-Негри.

5. Иммунитет. Механизм поствакцинального иммунитета окончательно не расшифрован. Имеют значение вируснейтрализующие антитела в крови, особенно в ликворе, устойчивость клеток мозга к виpycy. Для специфической профилактики бешенства используют живые и инактивированные вакцины, которые можно применять даже сразу после заражения, учитывая большой инкубационный период. Исполъзуют следующие вакцины: сухая антирабическая фенолвакцина. антирабическая АзВИ, антирабическая этанолвакцина.

антирабическая инактивированная сухая вакцина из шт, "Щелково -51", выращенная в КК ВНК-21.

Болезнь Ауески.

1. Сем.: герпесвирусы (герпес - ползучий).

2. Вирус - ДНК-содержащий, размеры - до 150 нм, имеет супер-капсид (чувствителен к эфиру). Не обладает гемагглютинирующей способностью. Репродукция в ядре и цитоплазме. Пантропный; антигенных вариантов не установлено.

Вирус устойчив во внешней среде; при +1...-4 °С сохраняется до 3-4 лет, в насыщенном растворе поваренной соли - до 3 мес.

3. Болеют все виды животных, но обычно - поросята. Встречается болезнь повсеместно. Заражение происходит через корм и воду, но возможно через слизистые оболочки дыхательных путей и поврежденную кожу. Распространяется крысами.

Болезнь Ауески - острая вирусная болезнь животных и человека, характеризующаяся признаками поражения ЦНС, органов дыхания и характерными расчесами в местах проникновения возбудителя (у свиней зуда не бывает). У поросят, кроме того. может быть ринит; конъюнктивит, кашель.

Взрослые свиньи персболевают легко, а поросята 3-5-мссячного возраста погибают на 70-100 %.

Вирусоносительство у свиней - до 300 дн. Патологические изменения выражаются в катаральной пневмонии, гастроэнтерите, очагами некроза в печени и селезенке.

4. Заподозрить болезнь Ауески можно по характерным клиническим симптомам и патологоанатомическим изменениям (клинико-эпизо-отологическая и патологоанатомическая диагностика).

Материал для исследования: смывы из носовой полости и кровь (лучше парные сыворотки), от трупов - кусочки головного мозга, легких,печени, селезенки.

Экспресс-метод - обнаружение вирусного антигена в РИФ. Вирусологический метод: а) выделение вируса на культуре клеток почек поросят: б) биопроба на кроликах (характерны зуд и расчесы в месте заражения).

Идентификация: РИФ, РН.

Ретроспективная диагностика: по приросту титра антител в парных выворотках.

Следует дифференцировать болезнь Ауески от бешенства, чумы свиней, гриппа, рожи, отравления поваренной солью.

5. Иммунитет. После переболевания - пожизненный. Применяют живые вакцины ВГНКИ и из штамма БУК-628.

Чума КРС.

1. Сем.: парамиксовирусы.

2. Вирус - РНК-содержащий, со спиральным типом симметрии, размер вируса - 86-126 нм. Он представляет собой частицу различной формы и размера, что указывает на полиморфизм. Большинство частиц имеет округлую или овальную, иногда нитчатую форму. Инфекционный вирион содержит преципитирующий, комплементфиксирующий и гемаг-глютинирующий антиген.

Вирус нестоек и легко разрушается под влиянием различных физических факторов.

3. Заболевание сопровождается признаками септицемии, лихорадкой, катарально-геморрагическим и крупозно-дифтерическим воспалением слизистых оболочек, в основном ЖКТ. Инкубационный период длится 6 дн.

Животные быстро худеют, скрежещут зубами, мотают головой. Характерные признаки заражения - тусклый взгляд, гнойный секрет из глаз, грязные носовые истечения, пенистая слюна в углах рта. ускоренное, затрудненное, со стонами дыхание, жидкие испражнения. Большинство животных погибает. Патологоанатомические изменения: признаки воспаления слизистой оболочки пищеварительного тракта (кровоизлияния, изъязвления). Наиболее характерные признаки; геморрагическое воспаление в области илиоцекального клапана, желчного и мочевого пузыря; кровоизлияние на эпикарде и особенно на эндокарде; пневмония или эмфизема легких.

4. Диагноз ставится на основании эпизоотологических, клинических, патологоанатомических данных, а также по результатам лабораторных исследований и биопробы на восприимчивых животных.

Лабораторная диагностика предусматривает: выделение вируса в культуре клеток и идентификация его в РН, обнаружение вирусного антигена в органах от павших или вынужденно убитых животных в РСК, РДП, РНТГА, РНГА, РИФ, ИФА. Обнаружение, специфических антител у переболевших животных в РСК, РН, РДП, РТГА, ИФА.

Материал для выделения вируса берут от больных (кровь, пунктат лимфатических узлов) или убитых и павших животных (предлопаточные, мезентериальные, лимфатические узлы, селезенка). Для экспресс-диагностики разработана РТГА. Для исследования мазков-отпечатков,гистологических срезов используют РИФ.

Для выделения вируса используют культуру клеток почки телят, которую после удаления ростовой среды заражают, нанося на слой клеток суспензию лейкоцитов исследуемого животного или суспензию его органов. За культурой наблюдают 9-18 дн. На положительный результат

указывает ЦПЭ, который характеризустся появлением округлившихся клеток, возникновением многоядерных синтициев и распадом слоя

культуры. При отсутствии ЦПЭ делают слепой пассаж. Идентификацию проводят при помощи РН. Для постановки биопробы используют телят, которых заражают кровью или 10-20%-ной суспензией лимфатических узлов, полученной от больных животных в первые 5 дн. после заболевания.

5. В нашей стране инфекция не регистрируется. Переболевшие и вакцинированные животные приобретают стойкий иммунитет. Молодняк от переболевших животных имеет колостральный иммунитет, для профилактики применяют сухую культуральную вирус-вакцину.

 

Ящур.

1. Сем.: пикорнавирусы (пико - маленький).

2. Вирус - РНК-содержащий_; размер - от 20 до 25 нм, шарообразной формы, вирусы не имеют суперкапсидной оболочки, нечувствительны

к эфиру, репродукция в цитоплазме, дерматропный (эпителиотропный); установлено семь серотипов: А, О. С, Сат-1. 2, 3, Азия-1.

Все типы имеют варианты. В нашей стране регистрируются два

типа - А и О. Гемагглютинины отсутствуют. Вирус очень устойчив во

внешней среде.

3. Болеют все парнокопытные, но чаще всего крупный рогатый скот, реже - свиньи и еще реже - овцы, болеет и человек. Лошади невосприимчивы Болезнь передается любыми путями, очень быстро распространяется в стаде и по территории.

Ящур - острая вирусная, чрезвычайно контагиозная болезнь. проявляется лихорадкой, афтозными (пузырьки с серозным содержимым) поражениями ротовой полости, конечностей и других участков тела.

Взрослые животные не погибают; телята, поросята погибают в 40-60 % случаев. Большой экономический ущерб обусловлен снижением молочной и мясной продуктивности, а также расходами на проведение противоэпизоотических мероприятий.

4 Диагностика ящура основана на эпизоотологических данных, клинических признаках болезни, патологоанатомических изменениях и лабораторных исследованиях.

Материал для исследования: стенки и содержимое афт; от павшего молодняка - кусочки сердечной мышцы.

Экспресс-метод. Постановка РСК с целью определения вида вируса

и его серотипа.

Вирусологические методы:

а) выделение вируса проводится в результате заражения:

естественно-восприимчивых животных (КРС, свиньи, овцы);

лабораторных животных (мышата-сосуны, морские свинки, крольчата);

КК (клетки свиной почки, щитовидной железы);

б) идентификация:

постановка РСК с целью подтверждения выделенного вируса ящура и его серотипа.

5. Иммунитет непрочный. Переболевание одним типом (даже подтипом) не создает восприимчивость к другому (антигенная вариабельность).

Для специфической профилактики применяют инактивированные вакцины с гидроокисью алюминия (ГОА) различной валентности: одновалентная А-48, бивалентная А, О, трехвалентная А-О-А-48, О, А, С.

 

Ринотрахеит КРС.

1. Сем.: герпесвирусы.

2. Вирус - ДНК-содержащий. Вирион размером 150-200 нм, состоит из капсида кубической симметрии и покрывающей его внешней оболочки; существуют антигенные варианты; имеет гемагглютинины, устойчив к влиянию физических и химических факторов.

3. Восприимчив к заболеванию только КРС, молодые животные более восприимчивы и болеют тяжелее. В зависимости от локализации вирусов, степени его вирулентности, возраста, пола и физического состояния животного наблюдают разные по длительности скрытые периоды и формы проявления болезни. Инкубационный период длится обычно 2-10 дн. Наиболее часто встречается респираторная форма болезни, отмечается генитальная, менингоэнцефалитная и неонатальная формы. Патологоанатомические изменения зависят от формы болезни.

4. От больных животных берут 15-20 проб: смывы со слизистой оболочки носовой полости, глаз, влагалища, препуция, пробы спермы.От убитых с диагностической целью животных берут кусочки легких с бронхом; селезенку; лимфоузлы; миндалины; пораженные участки слизистых оболочек носовой и ротовой полостей, трахеи, ЖКТ, пробу крови; от абортированных плодов - кусочки паренхиматозных органов.

В ядрах клеток эпителия пораженных слизистых оболочек находят специфические тельца-включения.

Диагноз основан на анализе эпизоотологических, клинических даных, патологоанатомических изменений, выделений и идентификации вируса в культуре клеток бычьего происхождения овец, свиней, кроликов, особенно хорошо - в культуре клеток почки эмбриона коровы и тестикул бычка, а также на обнаружении антител в сыворотке крови и носовых смывах. Диагноз также ставят с помощью серологических реакций, РН в культуре клеток, РНГА, РСК и метода ELISA. Для экспресс-диагностики используют методы иммунофлуоресценции, электронномикроскопический. При ретроспективной диагностике пользуют парные пробы сывороток, взятые с интервалом в 3 нед, антитела обнаруживают в РН, РНГА и других серологических реакциях. Заражение животных производят очень редко, иногда используют телят 6-8 мес, вводя патматериал им интраназально, интравагинально, подкожно или наносят на конъюнктиву.

5. У переболевших животных иммунитет длится не менее 1,5-2 лет, они являются пожизненными вирусоносителями. Для профилакти применяют живые и инактивированные вакцины, гипериммунные сыворотки реконвалесцентов.

Чума плотоядных.

1. Сем. парамиксовирусы.

2. Вирус в естественных условиях слабоустойчив. При температуре -10^С1С он выживает в течение нескольких месяцев, при температуре -76 С- неограниченное время. В организме больньгх животньгх вирус в высоких титрах находят в экскрете из носовой полости, в крови, селезенке, костном мозге, лимфоузлах, в экссудатах грудной и брюшной полостей. Вирус обладает гемаггютинируюищим свойством. Размер вирионов - 115-160 нм. Вирус имеет преципитируюший, гемагглютинирующий и комплементсвязывающий антигены.

3. Чума плотоядных (болезнь Карре) - остропротекающая контагиозная болезнь собак, волков, лисиц, шакалов, норок, соболей, енотов, хорьков и других плотоядных, характеризующаяся лихорадкой, острым катаром слизистых оболочек, пневмониями, кожной экзантемой и поражением нервной системы. Распространена повсеместно. Инкубационный период - от нескольких дней до 3 нед. Снмнтомы: повышается температура тела до 39-40^|)С: при легочной форме развивается ринит; при кишечной форме чумы наблюдают рвоту, запоры, сменяющиеся поносом, при кожной форме на бесшерстных участках кожи живота и бедер появляется пустулезная сыпь; при нервной форме наблюдается угнетение, пугливость, раздражительность, клонические судороги мышц, могут быть и параличи.

При вскрытии наблюдают мелкие кровоизлияния в сердечной мышце. Слизистая оболочка дыхательных путей гиперемирована, покрыта слизисто-гнойным экссудатом, легкие имеют уплотненные участки. Слизистая оболочка желудка и кишечника катарально воспалена, с кровоизлияниями и язвочками. Увеличены брыжеечные лимфатические узлы. Селезенка - без изменений или слегка увеличена. Наблюдают точечные кровоизлияния на слизистой оболочке мочевого пузыря, Вещество головного мозга отечно, количество субдуральной жидкости повышено.

4. Многообразие симптомов затрудняет диагностику. Диагноз на чуму плотоядных ставят комплексно: на основании эпизоотологических, клинических и патологоанатомических данных и лабораторных исследований.

В лабораторию направляют кровь для ретроспективной диагностики, секреты: носовые, конъюнктиву, слюну, фекалии для вирусологических исследований. Посмертно: мозг, кусочки селезенки, печени, их применяют в качестве антигена в серологических реакциях.

Экспресс-методы - РИФ, РСК, РГА, РЗГА, тельца-включения.

Вирусологические методы: выделение вируса (культура клеток, КЭ, лабораторные животные); идентификация вируса (РН, РДП, РСК).Ретроспективные методы - РСК, РЗГА.

5. У переболевших животных наступает практически пожизненный иммунитет. Щенята от иммунных матерей, а также подсосные щенята невосприимчивы в течение 2-3 мес. Для профилактики чумы плотоядных применяют сухие культуральные вирус-вакцины из аттенуированных штаммов 668-КФ, ЭПМ, ВАКЧУМ.

 

Аденовирус КРС.

1. Сем.: аденовирусы.

2. Вирус - РНК-содержащий: имеет капсид двадцатигранной формы, состоящий из капсомеров; размер вируса - около 70-90 нм; он обладает гемагглютининами; имеются антигенные разновидности; цито-патогенный вирус; довольно устойчив к физическим и химическим факторам.

3. Болеет КРС, чаще всего телята от 2-недельного до 1-4-месячного возраста, инфекция широко распространена во многих странах; поражаются органы дыхания, пищеварения и зрения: повышение температуры тела достигает 41,5°С, характерны слезотечение, серозное истечение из носа, кашель, затрудненное дыхание, тимпания, колики, диарея.

Патологоанатоминеские изменения с признаками геморрагического катарального гастроэнтерита, очагового уплотнения, ателектаза, эмфиземы легких.

В результате исследований в эндотелиальных клетках сосудов печени, почек, селезенки, слизистой оболочки желудка и кишечника находят внутриядерные включения.

4. Диагноз основан на анализе эпизоотологических, клинических. патологоанатомических изменений и результатов лабораторных измерений.

Взятие патматериала происходит так же, как при инфекционном ринотрахеите. Лабораторная диагностика включает обнаружение антител в патологоанатомическом материале (мазках-отпечатках, срезах), полученном от больных животных, в РИФ и РСК; выделение возбудителя из патологического материала в культуре клеток тестикул бычка (ТБ), ПЭК или ЛЭК и его групповая идентификация в серологических акциях: РСК, РДП и РИФ; выявление антител в сыворотке крови больных и переболевших животных (ретроспективная диагностика) в серологических реакциях: РСК, РНГА, РДП.

5. Переболевшие и вакцинированные телята приобретают иммунитет к заражению вирусом гомологичного типа. Пассивный иммунитет создают аденовирусные антитела молозива матери. Применяется инактированная вакцина из штаммов двух серологических групп аденовирусов.

Диарея КРС.

1. Сем.: тогавирусы.

2. Вирус содержит однонитчатую линейную инфекционную РНК. Вирион и нуклеокапсид имеют сферическую форму. Капсид покрыт наружной липопротеидной оболочной. Размер вириона - от 20 до 50 нм. Гемагглютинирующие и гемадсорбирующис свойства не установлены, антигенная структура не изучена. Вирус устойчив к физическим и менee - к химическим факторам.

3. Болеют КРС, буйволы, олени, косули. Наиболее восприимчивы животные в возрасте от 6 мес до 2 лет. Болезнь характеризуется воспалением и изъязвлением слизистых оболочек пищеварительного тракта и сопровождается ринитом, лихорадкой, диареей, иногда хромотой; повсеместно распространена.

Характерны следующие патологоанатомические изменения: геморрагии, гиперемия, отек, эрозии и язвы слизистых оболочек, пищеварительного тракта. Возможны некрозы слизистых пищевода, тонких кишок и сычуга.

4. Предварительный диагноз ставят на основании положительных результатов обнаружения антигена в патологическом материале методом иммунофлуоресценции с учетом эпизоотологических данных, а также патологоанатомических изменений.

Патматернал от больных животных - смывы со слизистой оболочки носа, пробы крови, соскобы с пораженных участков слизистой от животных, убитых с диагностической целью, - кусочки легких, селезенка, лимфоузлы, пораженные участки слизистой, кровь.

Вирус диареи выделяют в культурах клеток эмбриона КРС. Изолят считается выделенным в случае, если он вызывает стабильное ЦПД не менее чем в двух последовательных пассажах.

Биопробы на телятах ставят в тех случаях, когда попытки выделить вирус оказались безуспешными или возникает сомнение в связи с тем, что в зараженных культурах клеток нет ЦПД. В качестве материала для заражения используют культуральную жидкость 3-5 пассажей. 5-10 мл которой вводят внутривенно.

Основной метод идентификации - РН. Иммуноферментный метод позволяет легко идентифицировать культуры клеток, инфицированных вирусом диареи. Диагноз на прошедшую инфекцию, а также на латентное вирусоносительство обычно ставят при помощи РН в культуре клеток, определяя титры антител в сыворотках реконвалесцентов.

5. Иммунитет изучен недостаточно. Телята-реконвалесценты сохраняют резистентность к повторному заражению от 12-16 мес до 3-5 лет. Применяют живую и убитую вакцину.

 

Вирус лейкоза

1. Сем.: ретровирусы.

2. РНК-содержащий вирус сферической формы, размер - до 150 нм, имеет суперкапсид, репродукция в ядре и цитоплазме. Вирус малоустойчив к физическим и химическим факторам.

3. Лейкозом чаще болеет КРС и куры, реже -овцы, лошади, свиньи, собаки и кошки. Источник возбудителя инфекции - больные и инфицированные животные. Факторами передачи являются кровь, молоко, другие секреты и экскреты, содержащие лимфоидные клетки, инфицированные вирусом. Особое значение при заражении имеет генетическая предрасположенность и иммунологическая недостаточность организма.

Лейкоз - хроническая инфекционная болезнь, протекающая вначале бессимптомно. а затем проявляющаяся лимфоцитозом (увеличение числа лимфоцитов в крови) или образованием опухолей в кроветворных и других органах и тканях.

4. Диагностика лейкоза основана на эпизоотологических данных. |клинических признаках болезни, патологоанатомических и лабораторных исследованиях.

Лабораторные исследования проводят в следующих направлениях:

а) обнаружение в сыворотке крови животных специфических преципитирующих антител в РДП

б) в количественной и качественной оценке лейкоцитов в переферической крови животных, отнесенных по результатам РДП к группе ицнрованных вирусом лейкоза;

в) в проведении гистологических исследований с установлением характерных изменений при этой болезни.

5. Специфическая профилактика и терапия при лейкозе не разработаны

 

 

Классическая чума свиней.

1. Сем.: тогавирусы (от лат. toga - плащ).

2. Вирус - РНК-содержащий, имеет кубический тип укладки капсомеров, которые покрыты суперкапсидной оболочкой, чувствителен к эфиру, размером до 40 нм, гемагглютининов не имеет. Пантропный. Антигенные разновидности не выявлены.

Вирус малоустойчив к физическим и химическим факторам.

3. Болеют свиньи всех возрастов, распространение болезни повсеместно на всех континентах, передается путем прямого контакта больных со здоровыми, с кормом и водой.

Инкубационный период болезни длится от 3-7 дн. до 3 кед. Чума свиней может протекать сверхостро, остро, подостро и хронически.

КЧС - острая инфекционная болезнь, характеризуется лихорадкой (40,5-41°С). крупозным воспалением легких и крупозно-дифтерическим воспалением кишечника.

Болезнь сопровождается угнетением, отказом от корма, рвотой, запором (затем понос), кровоизлияниями в кожу (при надавливании пальцем не бледнеют), иногда наблюдаются парезы. Смертность -80-100%.

Из патологоанатомических признаков характерны кровоизлияния в лимфатические узлы, селезенку, почки; слизистые оболочки желудка и кишечника катарально воспалены, в толстом кишечнике - ''бутоны".

4. Диагноз ставят по эпизоотологическим данным (болеют только свиньи, летальность - 100%), клиническим симптомам и патолого-анатомическим изменениям.

Материалом для лабораторного исследования служат: кровь, взятая от больных животных в острый период болезни, селезенка, небные миндалины, подчелюстные лимфатические узлы и поджелудочная

железа.

Экспресс-дигностика включает в себя проведение РИФ с цельювыявления вирусного антигена в патматериале.

При проведении вирусологических исследований ставят биопробу на 4 подсвинках (30-40 кг), два из них активно или пассивно иммунизируют против чумы. Затем всех заражают подкожно или внутримышечно исследуемым материалом. Неиммунные поросята погибают.

Идентификация вируса осуществляется в ходе серологических реакций РИФ, РДП, РНГА, РСК.

Ретроспективная диагностика болезни заключается в выявлении в сыворотке крови реконвалесцентов специфических антител при помощи РСК, РДП, РНГА

5. Переболевшие животные приобретают стойкий иммунитет, продолжающийся несколько лет. Пассивный иммунитет (после введения противочумной сыворотки) непродолжительный-10-12 дн. Применяют живую вакцину для иммунизации свиней против чумы.

Иммунитет образуется напряженный и продолжительный (3-4 г.), невосприимчивость.свиней к болезни наступает через 3-5 дн.

Живые вакцины представлены штаммом К, репродуцированным в организме кроликов (АСВ), в культуре клеток почки эмбриона свиньи ВГНКИ) и тестикулов ягнят (ЛК-ВНИИВВ и М).

Для пассивной иммунизации и лечения применяют иммунную сыворотку.

 

АЧС (asfaviridae)

Контагиозная болезнь, протек.остро, подостро, хронически, бессимптомно, хар-ся лихорадкой, геморрагич.диатезом, воспалит.и некродистрофич.изм. паренхим.орг. ДНК-вир. Инкуб.пер:5-7дн. Непосредствоенно и опосредованно (через мясо, кровь). 1)сверхостр-↑tдо 40,5-42С, угнетение, одышка, гибель через 24-72ч. 2)остр.-↑tдо 40,5-42С, ↓t за 1 день до гибели. Подавл.сост, парез зад.конечн, красно-фиолет.пятна на ушах, рыле. Воспал.легких. 3)хронич.-перемежающаяся лих, истощение, некроз кожи. Патизм.- 2)-выраж.труп.окоч., нос. п-ть и трахея с пенист.жидк., селезенка и лимфоузлы(на разрезе мраморные)↑, легкие полнокровные, почки↑. 4)-резкое↑ бронх.лимфоузлов, 2-стор.пораж.легких. Пат.мат: кровь, легкие, селезенка, почки, лимф.узлы, груд.кость, миндалины. Гибель до 90%. Лаб.диагн: 1-ПЦР,РИФ,ИФА, биопроба; 2,3-КК-РГАд+,ЦПД, 4иммун к КЧС и 4 неиммун. +. 4-РИФ,РТГАд,ИФА. 5-, 6-ИФА,РДП,РИФн,РТГАд Вакцин нет