Методы лабораторной диагностики вирусных болезней

отбор проб - не позднее 3-4 часов. Консервация вируса: в глицерине, низкие температуры,
замораживание с добаачением стабилизатора,леофильная сушка (в вакууме). Подготовка
материала к работе: измельчают, готовят суспензию с буферным р-ом, центрифугируют,
работают с надосадочной жидкостью, проверяют на стерильность. РГА - склеивание эритроцитов с рецепторами вируса, при положит - хлопья.РТГА - антитела склеиваются с вирусами, затем с отфильтрованными эритроцитами,положительная на ++++ комок внизу пробирки. +++ пленка на верхнем слое жид-ти, отриц -однородная взвесь. РИГА - эритроциты с адсорбированными антителами способны К агглютинации в присутствии гомологичного вируса - готовят ряд последовательных разведений, добавляют эритроцитарный диагностикум, встряхивают, инкубируют, учитывают реакцию в разведениях 1:2, 1:4, 1:8. 1 16, 1:52. РДП - основано на способности к диффузии AT и растворению АГ и отсутствии такой способности у комплекса АТ+АГ, проводится в геле в чашках Петри, результат: положительный - полоса преципитации. ИФА- в основе лежит реакция АГ со специфическим AT меченным ферментной меткой, при добавлении субстрата в рез-те ферментативной реакции пояатяется цветная окраска, которая счигывается на спектре фотометра.

 

 

Билет№21

СУ-АУРУ ЛОШАДЕЙ

Су-ауру — трансмиссивное заболевание животных, проявляющееся лихорад­кой, отеками, увеличением лимфатических узлов, истощением. Протекает остро, а чаще хронически.

Возбудитель — Trypanosoma ninaekohljakimovae (некоторые исследователи считают ее синонимом Tr. evansi), по морфологическим признакам похожа на другие виды трипано-сом. Величина ее равна 20,9-32,0X1,4—2,8 мкм (рис. 166). Локализуется она в плазме крови, лимфатических узлах, внутренних органах, нервной системе. Движется оживленно, поступательно. Размножаете); продольным делением на 2, 4 и, возможно, на 6 дочерних особей. В естественных условиях к заболеванию восприимчивы верблюды, лошади, ослы, мулы, собаки, крупный рогатый скот и дикие млекопитающие. Искусственно заражаются лабораторные животные: белые мыши, крысы, морские свинки и кролики.

Эпизоотологические данные. Кроме слепней, возбудитель су-ауру передают и мухи-жигалки. Заражение возможно и при использова­нии необезвреженных хирургических и акушерских инструментов. Трипано-сомы легко проникают через поврежденную кожу и слизистые оболочки. Ис­точниками инвазии служат больные животные и паразитоносители; носитель-ство может длиться больше года

Су-ауру болеют ло­шади всех возрастов. Лошади рабо­чие и чистокровные болеют тяжелее. Собаки как источник зараже­ния насекомых значения не имеют. Хищные животные, как правило,заражаются при поедании мяса отИНВаЗИровЗННОГО ЖИВОТНОГО, СпОНТЭННОе Заболевание ВОЛков и шакалов позволяет считать су-ауру болезнью с природной очаго­востью.

Патогенез. Трипаносомы вначале размножаются в месте внедрения, за­тем проникают в кровь, лимфу и внутренние органы. В ответ на зараже­ние в организме вырабатываются трипанолизины, которые разрушают трипа­носомы. "Освободившиеся эндотоксины вызывают у животных лихорадочное состояние. Благодаря лизису трипаносом организм на некоторое время осво­бождается от возбудителя. Но так как лизируются не все трипаносомы, то оставшиеся вновь размножаются и попадают в кровь. Повторение лизиса трипаносом и появляющиеся при этом эндотоксины разрушают стенки сосудов, гемолизируют эритроциты, тормозят гемопоэз. Все это приводит к анемии и другим изменениям в крови больных животных. Нарушение кровообращения сопровождается отеками. Интоксикация организма эндо­токсинами и продуктами обмена трипаносом вызывает нарушения со сто­роны нервной системы, белкового и газового обменов и исхудание больных животных. Патогенез зависит от сопротивляемости организма, возраста, упитанности, эксплуатации животного и сезона года.

Иммунитет. В результате переболевания у животных возникает со­стояние премуниции, но оно непродолжительно. Сыворотка переболевших животных не обладает лечебными и профилактическими свойствами. В сы­воротке больных животных появляются антитела, выявляемые РСК и РДСК (только у лошадей), агглютинины, которые можно использовать в реакции агглютинации у верблюдов.

Симптомы болезни.

У лошадей инкубационный период 2—3 нед. Болезнь протекает также остро и хронически. Вначале бывают малозаметные и кратковре­менные подъемы температуры. Во время приступов лихорадки животные становятся вялыми, у них пропадает аппетит, повышается жажда, появля­ются отеки губ, щек, век, ушей, подчелюстного пространства, подгрудка и половых органов, а также отеки конечностей. Повышение температуры сопровождается учащением пульса и дыхания. Сердечный толчок усилен, иногда становится стучащим. Нервные явления бывают в виде чрезмерного возбуждения и стремления вперед или угнетения. При исследовании крови обнаруживают резкое уменьшение количества эритроцитов: до 2—3 млн в 1 мм'³, анизоцитоз, пойкилоцитоз, эозинофилию, ядерный сдвиг влево, лимфоцитоз. В период наивысшего подъема температуры животное лежит, наблюдаются потливость, мышечная дрожь. Смерть наступает во время подъема температуры или на следующий день при ее падении. Же­ребые кобылы абортируют.

Если лошадь перенесла несколько приступов, болезнь принимает хрони­ческое течение. Подъемы температуры становятся редкими. Животные, не­смотря на хороший аппетит и кормление, худеют, появляются ириты и кера­титы. Слизистые оболочки бледные, слегка желтушные. Временами наблю­даются нервные явления. Походка неуверенная, животное высоко поднимает конечности или спотыкается о малейшие неровности, падает, с трудом поднимается. Аппетит сохраняется. Со временем развивается парез задних конечностей и лошадь погибает. Трипаносомы обнаруживаются в крови не­регулярно.

Диагноз ставят комплексно. Клинические признаки не всегда бывают четко выражены, основное, что обращает на себя внимание,— это исху­дание, ремиттирующая лихорадка, кератиты и конъюнктивиты. Поэтому лабораторная диагностика является решающей.

При микроскопии тонкого мазка или раздавленных капель не всегда можно найти возбудителя, поэтому используют серологические реакции: у лошадей — РСК или РИФ, у верблюдов при хроническом течении — фор­малиновую пробу. Для диагностики су-ауру верблюдов разработаны РА и НРГА, но широкого применения они пока не получили. В отдельных слу­чаях для уточнения диагноза ставят биопробу на лабораторных животных (мыши, крысы).

При дифференциальной диагностике у верблюдов имеют в виду гель-минтозы и туберкулез. У лошадей клинические признаки могут быть сход­ны со случной болезнью, пироплазмозом, нутталлиозом, инфекционной анемией и др.

Лечение. Больным животным применяют наганин: верблюдам в дозе 0,03 г/кг, лошадям и собакам — 0,01—0,015 г/кг. Через 10 дней верблю­дам и собакам наганин вводят повторно. При установлении наганино-устойчивости трипаносом рекомендуют 7 %-ный азидин в дозе 0,0035 г/кг. Раствор готовят на дистиллированной воде или на 5 %-ном растворе глю­козы (для лошадей), вводят его внутримышечно, двукратно с интервалом 24 ч. Готовый раствор вводят из расчета 5 мл на 100 кг массы животного. Если масса животного 400 кг и более, общую дозу препарата делят пополам и вводят в разные места. Верблюдам раствор инъецируют внутри­мышечно в область лопаток, лошадям, ослам — в область крупа. Побочные явления исчезают без врачебного вмешательства.

Используют также комплексное лечение азидином и наганином. Поло­жительный результат получен от применения пиральдина, аналога антри-цида, трипамидия и некоторых других. Кроме трипаноцидных препаратов, животным вводят сердечные, стимулирующие пищеварение и кроветворение. Больным животным улучшают кормление и содержание.

Профилактика. После лечения всех животных содержат изолированно в течение 6 мес. Спустя 4, 5 и б мес их подвергают клиническому осмотру, микроскопическим w серологическим исследованиям. Животных, у которых обнаружили трштаносомы или высокий титр антител, лечат повторно.

В период лёта кровососущих насекомых животных перегоняют на паст­бища, свободные от переносчиков. Мясо прирезанных животных используют на корм в проваренном виде. Шкуры обезвреживают просушкой и посо­лом. Трупы животных, павших от трипаносомоза, утилизируют.

2. Листериоз (Listeriosis) – бактериальная болезнь животных, вызываемая мелкой палочковидной бактерией и характеризующаяся поражением нервной системы, септическими явлениями, абортами и маститами. Болеет и человек.

Возбудитель – Listeria monocytogenes – основной патогенный вид для животных и людей; Listeria ivanovii вызывает аборты у коров, овец, коз и может поражать людей; пять патогенных видов: L. seeligeri, L. innocua, L. welshimeri, L. grayi, L. murrayi.

Эту гетерогенность рода Listeria нужно учитывать при бактериологическом исследовании и выявлении истинной причины заболевания животных. Дифференцировать эти виды между собой можно по установлению патогенных свойств, серологических различий, гемолитических свойств и использованию биохимических тестов.

Морфологически листерии – небольшие грамположительные палочковидные бактерии (0,5,– 2х0,3 – 0,5 мкм) с закругленными краями, спор и капсул не образуют. Пподвижны в молодых культурах, выращенных при комнатной температуре. Под влиянием ряда факторов (пенициллин и др.) образуются L-формы, под действием ультрафиолетовых лучей возникают радиорезистентные, а под влиянием стрептомицина – стерептомицинорезистентные мутанты. Листерии – факультртивные аэробы, хорошо растут на обычных питательных средах (оптимальный рН 7,2 – 7,4). На МПА листерии образуют в первые сутки роста мелкие колонии в виде росинок, на МПБ появляется легкое равномерное помутнение. На твердых средах может происходить превращение типичных для листерий S-форм в R-формы колоний.

У L. monocytogenes различают две серологические группы, объединяющие различных в антигенном отношении листерий, что значительно облегчает диагностику Листерии сравнительно активны в биохимическом отношении. В отличие от рожистой палочки дают положительную пробу на каталазу: при добавлении к культуре листерий перекиси водорода последняя разлагается с выделением пузырьков кислорода.

С помощью листериозных бактериофагов производятся идентификация, типизация и обнаружение (в реакции нарастания титра фага) листерий.

L. monocytogenes патогенен для белых мышей, морских свинок, кроликов, пеструшек; L. ivanovii – для белых мышей. Для L. monocytogenes характерна положительнаz проба Антона – кератоконъюнктивит при нанесении культуры листерий на конъюнктиву глаза морской свинки или кролика.

Устойчивость. Листерии длительное время сохраняются во внешней среде, способны размножаться при благоприятных условиях, например, в мертвых тканях и в силосе при низкой температуре; до 4 мес сохраняются в отрубях, овсе, сене, мясо костной муке, животноводческих помещениях; длительное время не погибают в соленом мясе при низкой температуре. При хранении в холодильнике при температуре 4 С может происходить накопление листерий в продуктах питания (молоке, мясе и т. п.), при этом отмечалось повышение вирулентности листерий. Лиофильно высушенные листерии сохраняют жизнеспособность в течение 7 лет.

Листерии погибают от действия 5 %-ною раствора лизола или креолина через 10 мин; 2,5 %-ном раствора формалина или гидроокиси натрия – через 20 мин; раствора хлорной извести при содержании 100 мг активного хлора – в течение часа, 400 мг/л – за 10 мин. Нагревание до 100 С убивает листерии через 5 мин, до 75 – 90 С – через 1 ч.

Эпизоотологические данные. Восприимчивы к листериозу овцы, козы, крупный рогатый скот, свиньи, лошади, кролики, куры, гуси, утки, индейки. Болеют животные всех возрастов, но особенно чувствителен молодняк и беременные животные. Чаще всего болеют овцы, однако есть сообщения из других стран о преимущественном положении крупного рогатого скота.

Листерии выделены от многих видов диких животных. Отмечены случаи заболевания кошек, собак, обезьян, пушных зверей, форелей (в рыбопитомниках). Листерий выделяли из птиц иксодовых и гамазовых клещей.

Источник возбудителя инфекции при листериозе – больные животные, выделяющие листерии во внешнюю среду с истечением из носа, половых органов (при абортах), с абортированным плодом, калом, мочой, молоком (при листериозных маститах). Однако листерии могут длительное время находиться во внешней среде, размножаться при благоприятных условиях. Поэтому листериоз рассматривают как «сапроноз».

Распространять болезнь могут мышевидные грызуны. В циркуляции возбудителя листериоза между дикими (в частности, грызу нами) и домашними животными некоторую роль могут играть паразитические клещи.

Листерионосительство установлено (в желудочно-кишечном тракте) у клинически здоровых животных (и людей) по различным источникам – от 5 до 90%. Использование фекалий и навоза для удобрения полей и огородов приводит к контаминации овощей (для людей) и кормов (особенно силоса для животных). Часто сообщают о случаях болезни животных после поедания инфицированного силоса. В некоторых странах листериоз даже называют «силосной болезнью».

У овец болезнь носит сезонный характер и проявляется преимущественно с января по май. Это обусловлено активизацией факторов передачи возбудителя инфекции (миграция инфицированных грызунов к хранилищам кормов, преобладание силоса в рационе животных) иснижением резистентности организма животных. У крупного рогатого скота и свиней сезонности листериоза не обнаружено.

Листериоз проявляется спорадически, реже в виде эпизоотий. Отмечена стационарность болезни из-за длительной сохраняемости листерий во внешней среде, наличия животных-листерионосителей, а также существования природных очагов листериоза, где болезнь поддерживается в дикой фауне и различными путями передается сельскохозяйственным животным.

Патогенез. Распространение листерий по организму и клиническое проявление болезни зависят от способа заражения и состояния резистентности организма. Может возникнуть сепсис, поражение отдельных органов и систем, бессимптомное переболевание и длительное носительство. У взрослых животных чаще поражается центральная нервная система, а в период беременности – половые органы. У молодняка вследствие низкой общей устойчивости развивается сепсис. Иногда (чаще у взрослых животных) болезнь протекает бессимптомно, при этом животные длительное время остаются носителями листерий.

Листерии размножаются в месте первоначального внедрения, захватываются фагоцитирующими клетками, проникают в кровоток по организму. Незавершенный фагоцитоз способствует переживанию возбудителя внутри фагоцитов и внутриклеточному размножению.

Неблагоприятное воздействие на макроорганизм оказывают вырабатываемые листериями токсины (гемолизин, дермонекротический и моноцитопродуцирующий факторы) и ферменты (липаза, лецитиназа, каталаза), а также токсические субстанции самой бактериальной клетки. Отмечено иммунодепрессивное и токсическое действие цитоплазматической фракции. Поражения тканей и органов при листериозе характеризуются дегенеративными некродистрофическими изменениями, вследствие чего возникают нарушения регулирующего механизма нервной и эндокринной систем.

Течение и симптомы. Инкубационный период длится 7 – 30 дней. Болезнь протекает остро, подостро или хронически и проявляется в нервной, септицемической, смешанной, стертой, бессимптомной формах. У взрослого крупного рогатого скота и овец чаще поражается центральная нервная система. Болезнь начинается угнетением, вялостью, снижением аппетита. Через 3 – 7 дней появляются некоординированные движения, судороги, приступы буйства, парез нижней челюсти и отдельных групп мышц, потеря зрения, конъюнктивит, выпучивание глаз, стоматит. Температура тела при этом повышена или в пределах нормы. Длительность болезни до 10 сут.

У отдельных больных могут наблюдаться повышенная возбудимость, пугливость, тяжелые нервные расстройства, напоминающие бешенство. Больные животные погибают через 3 – 4 дня после по явления признаков поражения центральной нервной системы.

Другая форма болезни, характеризующаяся поражениями половой системы, проявляется абортами, задержанием последа и воспалительными явлениями в матке.

На почве листериоза у лактирующих животных может возникнуть мастит, который часто протекает субклинически и сопровождается длительным выделением (по некоторым данным до нескольких лет) возбудителя с молоком. Это особенно коварная форма болезни, которая часто не диагностируется, в то же время зарегистрированы эпидемии листериоза у людей, употребляющих в пищу молоко (Бостон, 1983) или мягкий сыр (Лос-Анжелес, 1985). Листериоз у телят и ягнят, как правило, протекает в виде септицемии, в отдельных случаях сопровождается поражением центральной нервной системы. Могут наблюдаться высокая температура тела, кератиты, конъюнктивиты, увеличение предлопаточных лимфоузлов и расстройство деятельности желудочно-кишечного тракта.

У взрослых свиней обнаруживают исхудание, анемию, снижение аппетита, нарушение координации движений, кашель, абсцессы в различных органах и тканях. У поросят поражается центральная нервная система: расстройство координации движений, своеобразная ходульная походка, манежные движения, мышечная дрожь, приступы судорог, возбуждение. Температура тела в начальный период заболевания обычно повышена, а затем снижается. При септической форме болезни отмечают угнетение, отказ от корма, слабость, затрудненное дыхание, посинение кожи в области ушей и живота, иногда – признаки катарального энтерита. Температура тела повышена. Длительность болезни до 3 сут. Поросята чаще всего погибают.

У птиц листериоз проявляется каксептическое заболевание. Цыплята и молодые куры теряют аппетит, становятся малоподвижными; наблюдаются конъюнктивиты, учащение дыхания, прогрессирующая слабость, судороги, параличи и гибель через 3 – 5 дней.

Патологоанатомические изменения. Зависят от формы болезни и длительности ее течения. При нервной форме наблюдают отек головного мозга, кровоизлияния в мозговой ткани и отдельных внутренних органах. Гистологически при поражении бактериальными формами листерий обнаруживают менингоэнцефалит с инфильтрацией вещества мозга клетками моноцитарного типа и наличием периваскулярных муфт, а при поражении L-формами – энцефалопатия, сопровождающаяся дистронекротическими изменениями без пролиферации клеток (явление стаза в кровеносных сосудах, кровоизлияния, отек и дегенерация нейронов, нейрофагия).

При септической форме болезни регистрируют гиперемию илиотек легких, катаральный гастроэнтерит, кровоизлиянияв сердечной мышце и в паренхиматозных органах, увеличение селезенки, дегенеративные изменения инекротические очажки в печени, селезенки, почках, миокарде, увеличение лимфатических узлов. При поражении половых органов у самок обнаруживают эндометрит. При поражении матки находят десквамацию эпителия, поверхностные эрозии по вершинам складок слизистой оболочки, кровоизлияния, скопления лейкоцитов и гистиоцитов; в подслизистом и мышечном слоях – скопления полибластов и лимфоидных клеток.

Диагноз. Его ставят на основании комплекса эпизоотологических данных, клинических признаков болезни, патологоанатомических и паталогогистологических изменений, а также результатов лабораторного исследования (подробно изложено в «Методических рекомендациях по лабораторной диагностике листериоза животных и людей». М., 1987).

Решающее значение принадлежит бактериологическому исследованию – выделению листерий. Причем, если культура листерий в бактериальной форме не выделена, но есть обоснованные подозрения на листериоз, проводят дополнительное исследование на обнаружение L-формы листерий.

Серологические методы (РА, РСК, РНГА) можно применить для выяснения эпизоотической ситуации в хозяйствах, где диагноз на листериоз поставлен комплексным методом с выделением культуры возбудителя. Для исследования в лабораторию направляют трупы мелких животных или голову (головной мозг), кусочки печени, селезенки, почки, лимфатические узлы, пораженные участки легких, абортированный плод и его оболочки. Посылают свежий материал или консервированный в 30 %-ном растворе глицерина. Для прижизненной диагностики для серологического исследования посылают кровь или сыворотку крови от больных и подозрительных по заболеванию животных (желательно парные сыворотки, взятие с интервалом 7 – 14 дней), для бактериологического исследования – истечения из половых органов абортировавших самок, молоко из пораженных долей вымени при маститах или при подозрении на скрытый мастит.

Бактериологическая диагностика включает микроскопию исходного материала, посевы на питательные среды, идентификацию выделенных культур по культурально-биохимическим, тинкториальным и серологическим свойствам, а также постановку биологической пробы на лабораторных животных. Для ускоренной диагностики листериоза можно применять прямой и непрямой методы флюоресцирующих антител (ИФА). Листериозными бактериофагами 2А и 4А можно идентифицировать более 85% культур листерий и определить их серогрупповую принадлежность. Серологическую идентификацию листерий проводят путем постановки пластинчатой РА с поливалентной и серогрупповыми (первой и второй) листериозными агглюгинирующими сыворотками.

С целью выявления скрыто больных и листерионосителей сыворотки крови исследуют в РА, РСК и РНГА. Дифференциацией листериозных 19S-, 7S-антител удается отличить свежий инфекционный процесс от скрытого бактерионосительства и хронических малосимптомных форм болезни. При исследовании парных сывороток нарастание титра в 2 – 4 и более раза подтверждает диагноз на листериоз.

Дифференциальный диагноз. Дифференцировать листериоз необходимо от злокачественной катаральной горячки (по наличию при ней высокой температуры тела, кератитов, ринитов и стоматитов), от бруцеллеза, кампилобактериоза и трихомоноза (они характеризуются лишь абортами, задержанием последов, орхитами и эпидидимитами, а при листериозе на первом месте стоит поражение центральной нервной системы), от бешенства (по характерной клинической картине, агрессивности животного, наличию телец Бабеша – Негри). Болезнь Ауески отличается выраженной контагиозностью, быстрым распространением, лихорадкой и поражением дыхательных органов у взрослых свиней. При отечной болезни поражаются только поросята-отьемыши, отмечаются отеки в области головы. Ценуроз дифференцируют на основании обнаружения ценурозного пузыря в головном мозге и более длительного течения болезни. При постановке диагноза на листериоз нужно помнить о возможности смешанной инфекции.

Лечение. Чем раньше начато лечение, тем больше надежды на благополучный исход. Наилучший эффект дает предохранительная (превентивная) терапия животных условно благополучной группы (подозреваемых в заражении). Листерии – внутриклеточные паразиты и поэтому вызванная ими инфекция трудно поддается лечению.

Наиболее эффективным считается ампициллин или его сочетания с гентамицином. Эффективны также антибиотики тетрациклинового ряда, которые применяют в терапевтических дозах в течение 5 – 7 дней, при необходимости курс лечения повторяют через 5 – б дней. Для профилактики рецидивов болезни желательно вводить антибиотики несколько дней после исчезновения клинических признаков. Одновременно проводят симптоматическое лечение – назначают сердечные средства, а также препараты, улучшающие деятельность желудочно-кишечного тракта, – дезинфицирующие, вяжущие.

Иммунитет. При листериозе он изучен недостаточно. В организме переболевших животных накапливаются листериозные антитела. Наличие их устанавливают с помощью РА, РСК, РДП, РНГА. Однако гипериммунные листериозные сыворотки, несмотря на высокий титр антител и выделенные из них гамма-глобулины, не обладают достаточно выраженными превентивными свойствами. Кратковременным защитным действием обладают лишь макрофаги от гипериммунизированных животных, что свидетельствует о тканевом иммунитете при листериозе.

Изысканием вакцин при листериозе животных занимались многие исследователи, однако создать эффективную вакцину пока еще не удалось. Препараты из убитых (инактивированных) листерий не создавали невосприимчивость у животных. Наиболее широкое применение находят вакцины из живых ослабленных штаммов листерий – у нас вакцина из штамма АУФ, предложенная Казанским ветеринарным институтом; в Болгарии – вакцина, предложенная И. Ивановым. Однако эффективность применения этих вакцин в борьбе с листериозом требует обстоятельной проверки. Анализ многолетней вакцинации животных в ряде республик не выявил ее существенного влияния на заболеваемость животных листериозом (И. А. Бакулов, 1989).

Профилактика и меры борьбы. В целях профилактики листериоза необходимо комплектовать фермы животными из благополучных по листериозу хозяйств, карантинировать вновь поступающих, проводить клинический осмотр и при необходимости – лабораторные исследования животных.

При возникновении листериоза хозяйство объявляют неблагополучным, вводят ограничения на вывод животных, вывоз мяса и кормов. Животных подвергают поголовному клиническому осмотру, измеряют температуру тела. Больных с признаками поражения центральной нервной системы отправляют на убой. Подозрительных по заболеванию изолируют и лечат. Остальных вакцинируют или с профилактической целью обрабатывают антибиотиками. Для выявления листерионосителей и бессимптомно больных используют серологические реакции. Положительно реагирующих изолируют, лечат антибиотиками или отправляют на убой.

Дезинфекцию, дезинсекцию и дератизацию, а также обеззараживание навоза на неблагополучных фермах проводят согласно действующей «Инструкции по проведению ветеринарной дезинфекции, дезинвазии, дезинсекции и дератизации». Молоко от больных коров кипятят. Ограничения с хозяйства снимают через 2 мес после последнего случая выделения клинически больных животных и получения отрицательных результатов по РСК (РА, РНГА), а также проведения заключительной дезинфекции помещений и территории ферм. Особое внимание обращают на соблюдение работниками животноводства мер личной профилактики.

 

 

Билет№22

1. Лейкоз крупного рогатого скота (Leucosis bovum, Л КРС) — хро­ническая злокачественная вирусная болезнь, характеризующаяся неопластической пролиферацией кроветворной и лимфоидной тка­ней, смертельным исходом. Проявляется в виде инфекционного эн­зоотического лейкоза крупного рогатого скота (ЭЛ КРС) и спорадического лейкоза молодняка (СЛМ). ЭЛ КРС встречается преимуще­ственному скота в возрасте свыше двух (чаще 4—8) лет; ему свой­ственно энзоотическое распространение, в основном бессимптомное хроническое течение, начальная и развитая стадия лейкемии (лимфоидного или миелоидного ряда), персистирующий лимфоцитов (ПЛЦ). СЛМ регистрируют очень редко у животных до 2-летнего возраста, и характеризуется он острым или подострим течением, увеличением многих лимфатических узлов (злокачественная лимфома, лимфосаркоматоз). Причина СЛМ до сих пор неизвестна; в сыворотке крови не образуются антитела против вируса лейкоза крупного рогатого скота (ВЛ КРС) и не возникает ПЛЦ.

Возбудитель — РНК-содержащий онкогенный вирус, относящийся к роду Oncovirus типа С семейства Retroviridae. Вирус лейкоза крупного рогатого скота (ВЛ КРС) или бычий лейкозный вирус (БЛВ) морфологически сходен с возбудителями лейкоза у животных других видов. Однако имеются существенные различия в антигенной структуре. Существует только один серовариант ВЛ КРС. к которому восп­риимчивы, кроме КРС, еще овцы и козы.

Устойчивость ВЛ КРС во внешней среде небольшая. В клеточных культу­рах при нагревании до 60 С он погибает через 1 мин, быстро обезвреживается 2—3 %-ными растворами едкого натра, формальдегида и другими дезинфицирующими средствами в общепринятых концентрациях. Инакгивируется ВЛ КРС в молоке на­греванием его до 74 С в течение 17 с или скисанием (рН 4,75). Вирус может дли­тельное время находиться в клетке в частично или полностью связанном состоянии с ее геномом. Патогенное действие он проявляет при снижении иммунологической ре­активности организма животных.

Эпизоотологические данные. ЭЛ КРС диагностируют на всех континентах мира. В 1986 г. из европейских стран были свободны­ми от ЭЛ КРС лишь Исландия, Мальта, Нидерланды и Швейцария. Обычно ВЛ КРС передается конгенитально (через плаценту) или горизонтально.

Конгенитальное заражение вирусом телят в хозяйствах происхо­дит сравнительно редко. Телята заражаются главным образом постнатально, в первую очередь с молозивом и молоком. От живо­тных возбудитель передается путем прямого или косвенного кон­такта: с молоком, слюной, кровью (независимо от того, содержит ли кровь лейкоциты или нет). Возбудитель болезни разносится бы­стро, если не соблюдаются правила асептики и антисептики при манипуляциях у животных (взятие крови, прививки и др.). Гори­зонтальная передача ВЛ КРС имеет большое значение внутри ста­да; при этом особую роль играют кровососущие насекомые.

Как правило, болезнь встречается у высокопродуктивного скота (лучший генетический фонд молочного скота), в частности, при не­сбалансированном кормлении, когда молочная железа израсходует вещества, не компенсируемые кормами, и ослабляются физиологи­ческие функции организма. Между хозяйствами, районами, обла­стями, странами ЭЛ КРС распространяется в основном при транс­портировке племенных животных, зараженных. ВЛ КРС. Сущест­венное значение в распространении болезни имеет гено- и фенотипическая предрасположенность животных к лейкозу, например, среди красного и черно-пестрого пород скота. В отдельных хозяйст­вах заболеваемость составляет 3—20% и более, а летальность—до 15%.

Патогенез. При лейкозе наблюдается нарушение нормального процесса пролиферации и дифференциации клеток кроветворной ткани. Болезнь часто протекает в латентной форме. Под влиянием различных экзогенных и эндогенных факторов происходит актива­ция вируса, проявляющаяся у отдельных животных медленным расстройством регуляторной функции органов кроветворения. Чаще поражаются лейкобласты, что приводит к интенсивной пролифера­ции различных типов лейкоцитов в кровеносных органах, в кост­ном мозге, селезенке, лимфоузлах. Неконтролируемо размножаю щиеся клетки крови распространяются по организму, попадают в различные органы и ткани, образуют, опухоли, вызывающие изменение структуры и функции пораженных органов вследствие атро­фии специфических клеток. Появляются нарушения на молекуляр­ном, клеточном и органном уровнях7~что приводит к расстройству кроветворения, увеличению количества лимфоцитов.Течение и симптомы, инкубационный период~ЭЛКРС (до по­явления изменений в периферической крови) при эксперименталь­ном заражении длится 60—750 дней, а при спонтанном —2—6 лет. При ЭЛ КРС выделяют предлейкозную, начальную, развернутую и терминальную стадии болезни. С развитием патологического процесса указанные стадии следуют одна за другой и обычно явля­ются переходящими.

Предлейкозную стадию выявляют серологическими и вирусологическими исследованиями, при этом никаких гематологи­ческих изменений еще нет.

При начальной стадии отмечают количественные и каче­ственные сдвиги в составе клеток крови. Увеличивается число лей­коцитов, повышается процент лимфоцитов, появляются малодифференцированные, незрелые, различной величины, патологические формы клеток.

Развернутая стадия характеризуется, кроме гематологи­ческих сдвигов, разнообразием неспецифических и специфических клинических признаков, их проявление зависит от локализации па­тологического процесса. Неспецифические признаки — это ухудше­ние общего состояния животного, плохое усвоение кормов, сниже­ние удоя, быстрая утомляемость, прогрессирующее исхудание, рас­стройства пищеварения (диарея, запоры, атония или тимпания преджелудков), ослабление сердечной деятельности, цианоз и желтушность слизистых оболочек, нарушение дыхания, отеки в обла­сти подгрудка, живота, вымени, хромота на одну или обе задние конечности, затруднение выделения мочи, аборты, яловость, увели­чение одной или нескольких долей вымени.

Специфическими признаками лейкоза считаются увеличение по­верхностных (предлопаточных, околоушных, надколенных, подче­люстных, надвымянных) и внутренних (доступных ректальному ис­следованию) лимфатических узлов; появление опухолевых разра­стании в различных областях тела, экзофтальм, увеличение селе­зенки и печени. Лимфоузлы имеют величину от грецкого ореха до детской головы. Они безболезненны, подвижны, эластичной или плотной консистенции, а при сильном растяжении капсулы стано­вятся болезненными. Внутренние лимфоузлы поражаются чаще по­верхностных.

При терминальной стадии быстро развивается патоло­гический процесс. Отчетливо проявляются неспецифические при­знаки. Количество лейкоцитов в периферической крови иногда сни­жается, при этом преобладают их патологические формы. Резко из­меняется качественный состав лимфоцитов в сторону их патологии. Уменьшение количества лейкоцитов объясняется истощением кро­ветворной ткани и понижением физиологической реактивности ор­ганизма. Лейкозные изменения обнаруживаются в селезенке, серд­це, печени, почках, сычуге. Данная стадия развивается при пони­жении резистентности организма животного и заканчивается ост­рым течением смертельно, нередко от разрыва селезенки или дру­гих внутренних органов.

У молодняка, преимущественно в возрасте 4—12 мес, болезнь встречается в трех формах: мультицентрической (лимфосаркома, общая лимфаденопатия), тимусной (опухолевидное разрастание в нижней части шеи) и кожной (кожный лейкоз), протекающей с развитием инфильтративных разрастании в коже.

Патологоанатомические изменения. При вскрытии трупа в за­висимости от формы и стадии течения лейкоза обнаруживают зна­чительные изменения (в виде диффузной или очаговой инфильтра­ции) в органах кроветворения, пищеварения, на серозных покро­вах, в сердце, печени, почках и в матке.

Основными формами ЭЛ КРС считаются собственно лейкозы и ретикулояы. К^србственно лейкозам относят лимфо-миелолейкоз, гемобластоз, а к ретикулозам — лимфо- и ретикулосаркому, сис­темный ретикулоз, лимфогранулематоз и плазмоцитому. Эта клас­сификация ЭЛ КРС основана на патоморфологической характери­стике разрастании (новообразований), результатов цитологического и гематологического исследований циркулирующих в крови клеточ­ных элементов (степени их созревания). Для патогистологического исследования направляют от павших или убитых животных кусоч­ки (2х2 см) измененных органов, фиксированных 10 %-ным рас­твором формалина. При ЭЛ КРС наблюдают в органах характер­ные изменения, в первую очередь — лимфоидно-клеточную ин­фильтрацию.

Диагноз. ЭЛ КРС диагностируют на основании эпизоотологического, клинико-гематологического, серологического, вирусологиче­ского, патологоанатомического исследований с обязательным прове­дением гистологического исследования.

При гематологическом исследовании на Л КРС используют раз­личные критерии, названные «лейкозными ключами». Определяют отклонение от нормы число лейкоцитов, молодых клеток, абсолют­ное и процентное количества лимфоцитов (табл. 15). Однако по мере развития патологического процесса число лейкоцитов и лим­фоцитов у животных иногда даже может быть ниже нормы. Кроме того, в 8—40% случаев ЭЛ КРС может протекать алейкемически (число лейкоцитов 5,5—9,5 тыс/мкл). Все животные, у которых установлен персистентный (длительный) лимфоцитоз (ПЛЦ), явля­ются носителями ВЛ КРС, но не у все