Эритроцитарный трепонемный диагностикум.

Препарат представляет собой 5%-ную взвесь формалинизированных танизированных эритроцитов барана, сенсибилизированных ультраозвученным антигеном культуральных бледных трепонем или патогенных бледных трепонем штамма Никольса. Используется для диагностики сифилиса путем определения уровня антитрепонемных антител в сыворотке крови обследуемых людей в реакции пассивной гемагглютинации (РПГА).

Гемолитическая кроличья сыворотка к эритроцитам барана.

Используется в РСК. Получают путем иммунизации кроликов суспензией эритроцитов барана. Кроликов иммунизируют путем введения им в вену уха 50%-й взвеси отмытых эритроцитов барана. Через 7 дней после последней инъекции получают пробную сыворотку. Если титр сыворотки не ниже 1:1200, то делают кровопускание. Сыворотку прогревают 30 мин при 56С. Для предупреждения бактериального роста в гемолитическую сыворотку добавляют консервант (1% борная кислота)

 

Единый бруцеллезный диагностикум.

Применяется для определения антител в сыворотках крови больных бруцеллезом людей и животных в реакциях агглютинации Райта и Хеддльсона. Препарат представляет собой взвесь бруцелл в физиологическом растворе, содержащем в 1 мл 10 млрд. микробных тел, убитых 0,5 % формалином или нагреванием с последующим добавлением в качестве консерванта карболовой кислоты.
Штаммы для изготовления диагностикума должны обладать всеми характеризующими бруцеллы свойствами. Выращивание бруцелл производят на обычном мясопептонном агаре с добавлением 1 % глюкозы и 2 % глицерина или на печеночном агаре при температуре 37 °С в течение 48-72 часов. После этого производят смыв бруцелл 0,5 % формалинизированным физиологическим раствором, устанавливают стандарт в 10 млрд. микробных тел в 1 мл. Формалинизированную взвесь - диагностикум ставят в термостат при 37 °С на 48 часов для инактивирования. Препарат разливают в ампулы, контролируют на стерильность, стандарт и агглютинабельность.
Препарат представляет собой белую, слегка желтоватую гомогенную взвесь. Для постановки реакции Райта диагностикум разводят в десять раз (до конечной концентрации в 1 млрд. микробных тел), для реакции агглютинации на стекле - используют цельный (0,03 мл).
Срок годности диагностикума - 1 год.

Бруцеллезные вакцины.

Накожная сухая живая бруцеллезная профилактическая вакцина
представляет собой взвесь живой культуры вакцинного штамма B. abortus в сахарозо-желатиновой среде, высушенную методом сублимационной сушки. Сухая вакцина имеет вид аморфной или кристаллической массы молочно-белого или слегка желтоватого цвета. Вакцину высушивают в вакуумных ампулах емкостью 6-8 мл. Вакцину проверяют на отсутствие бактериальной загрязненности, безвредность и иммуногенность.
Бруцеллезную живую сухую вакцину применяют для вакцинации и ревакцинации людей против бруцеллеза. Вакцинацию проводят накожно однократно. Непосредственно перед прививкой вакцину разводят стерильным физиологическим раствором.

Поливалентная бруцеллезная лечебная вакцина используют для лечения острых и хронических форм бруцеллеза. Этот препарат приготавливается из хорошо проверенных штаммов B. melitensis и B. abortus bovis. Вакцина представляет собой взвесь в физиологическом растворе бруцелл овечьего и коровьего видов, убитых нагреванием при 60 °С в течение 1 часа. Контролируется вакцина на стерильность, чистоту и стандарт, а маточная взвесь - на токсичность и специфическую безвредность.

17. Группы риска по бруцеллезу. Определение восприимчивых и невосприимчивых лиц Чабаны, пастухи, ветеринарные работники, рабочие мясокомбинатов и консервных заводов, шерстеперерабатывающих предприятий составляют группу риска.

 

18. Проба Бюрне, компоненты, постановка, учет результатов.

Используют для выявления состояния ГЗТ к аллергенам бруцелл у больных, переболевших бруцеллезом. Ставят с 15-20 дня заболевания. Бруцеллин в дозе 0,1 мл вводят строго внутрикожно в среднюю треть ладонной поверхности предплечья. Через 6—12 часов на месте инъекции появляется болезненный отек и покраснение, которые достигают максимального развития через 24 и 48 часов, после чего постепенно угасают.

Учет: 1) отрицательная реакция (—) — полное отсутствие местных изменений; 2) сомнительная реакция (±) — наличие асимметрии кожной складки по сравнению с контрольной; 3) слабо положительная (+)—наличие слабо выраженного отека и красноты диаметром 2—3 см; 4) положительная реакция (+ +)—наличие отечности диаметром 4—5 см, иногда с аденитом; 5) резко положительная (+ + +) —при отеке 6—8 см с аденитом.

Серодиагностика бруцеллеза.

Реакция Райта: ставят в начале 2-й недели болезни. Реакцию ставят не менее чем в пяти разведениях (1:50, 1:100, 1:200, 1:400 и 1:800) в объеме 1 мл каждое. В качестве антигена применяют единый бруцеллезный дианостикум. Перед употреблением диагностикум разводят в 10 раз карболизированным (0,5%) физиологическим раствором. Учет реакции производят через 24 часа путем сравнения степени просветления в опытных пробирках с соответствующим стандартом мутности, который готовят следующим образом. В 4 пробирки последовательно наливают 1, 2, 3 и 4 мл разведенного диагностикума, затем в том же порядке добавляют 3, 2 и 1 мл карболизированного физиологического раствора, в последнюю пробирку ничего не добавляют. После взбалтывания содержимого берут по 0,5 мл антигена каждой концентрации и 0,5 мл карболизированного физиологического раствора. Таким образом получают 4 пробирки стандарта мутности с различной степенью просветления (75% — 3—, 50% — 2 — и 25% — 1 — и отсутствие просветления), которые вместе с опытными пробирками помещают в термостат при t° 37° на 24 часа, после чего производят учет реакции. Диагностическим титром исследуемой сыворотки считается 50% агглютинации (2+).

Реакция Хеддльсона: стеклянную пластинку делят на 6 квадратов и наносят неразведенную испытуемую сыворотку в количествах от 0,08 до 0,01 мл и добавляют единый бруцеллезный диагностикум (по 0,03), кроме последней (5), в которую вносят 0,03 мл ИХН (контроль сыворотки). В 6-м квадрате находится 0,03 мл АГ и 0,03 мл ИХН (контроль диагностикума). Капли смешивают стеклянной палочкой. Учет: отсутствие агглютинации во всех дозах – отриц, наличие в 1 – сомнительная, во 2 – слабоположительная, в 3 и 4 – положительная, везде – резко положительная.

+проводят РИФ, РПГА, ИФА, РСК.