Методы микробиологической диагностики туляремии. Характеристика перечисленных методов.

Серологический метод: РА с туляремийным корпускулярным диагностикумом. Сыворотку разводят в ИХН от 1:25 до 1:400. В каждую пробирку с 0,5 мл разведенной сыворотки добавляют 0,5 мл диагностикума. Пробирки в термостат на 2ч. Предварительно учитывают результат через 2 ч, окончательно – после пребывания при комнатной температуре через 18-20 ч. Положит – обнаружение агглютининов

+РНГА с сывороткой больного и туляремийным эритроцитарным диагностикумом.

+ИФА

Аллергическая проба: внутрикожный тулярин вводят 0,1 мл внутрь кожи ладонной части предплечья. Результат учитывают через 24-48 ч. Наличие инфильтрата и гиперемии диаметром более 1 см рассматривается как положительная реакция.

Биологический: материал – кровь, пунктат из бубона, соскоб из язвы, налет из зева, мокрота. Материал вводят 3-5 мышам или 2 морским свинкам подкожно, накожно, внутрибрюшинно и через рот. Если животные на протяжении 7-15 дней не погибают, их забивают и вскрывают. При туляремии обнаруживают соответствующие патологоанатомические изменения. Кровь, костный мозг, участки лимфатических узлов сеют на среды: желточную, глюкозоцистиновый агар с кровью и антибиотиками. Выделенную ЧК идентифицируют по морфологическим, антигенным и биологическим свойствам, определяют чувствительность к антибиотикам.

Вопрос №21. Реакция Асколи. Компоненты, постановка, учет результатов.

Исследуемым материалом могут служить: трупный материал животных,кожа и изделия из нее, шерсть.

Исследуемый материал измельчают, заливают 10-20 кратным объемом ИХН и кипятят в течение 10-45 минут и выдерживают 16-20 ч при температуре 6-14. Затем жидкость фильтруют и полученный экстракт в узкой пробирке осторожно наслаивают на преципитирующую сибиреязвенную сыворотку, которую получают из крови животных, гипериммунизированных вакциной или убитой культурой возбудителя.

Параллельно ставят контроли вытяжки и преципитирующей сыворотки, с заведомо положительной и отрицательной пробой, с нормальной лошадиной сывороткой.

На границе соприкосновения 2 жидкостей в течение 1-5 минут появляется кольцо белого цвета (преципитат), что расценивают как положительную реакцию. При появлении преципитата позже 10 мин реакцию считают неспецифической.

 

Вопрос №22. Характеристика возбудителя чумы

Морфология. Возбудитель - Yersinia pestis относится к роду иерсиниа. Представляет собой неподвижную, закругленную на конце овоидную палочку. Возбудитель чумы не образует спор, имеет капсулу, грамотрицателен, легко окрашивается анилиновыми красителями (более интенсивно на концах - биполярное окрашивание). Жгутики отсутствуют.

Культуральные свойства: факультативный анаэроб. Хорошо растет на обычных жидких и питательных средах (МПА, МПБ) при температуре 25-30 °С. Для стимуляции роста микроба чумы целесообразно прибавлять в питательную среду сульфит натрия, гемолизированную кровь.

На агаре образуют R- колонии. Сначала появляются колонии в виде битого стекла, а затем появляются колонии, которые имеют вид кружевных платочков.

На жидких средах растут в виде пленки, от которой спускаются нити. На дне образуется хлопьевидный осадок.

Б/х свойства:

· восстанавливают нитриты в нитраты,

· ферментируют с образованием пленки глюкозу, мальтозу, галактозу, арабинозу и маннит,

· продуцируют дегидразы и уреазы.

· Желатин не разжижают,

· индол и сероводород не образуют.

Антигенные свойства:

О-антиген (эндотоксин)

F1-антиген чумы - капсульный антиген.

V/W (Vi)-антиген чумы

 

Вопрос №23. Антраксин.

Препарат для выявления специфической сенсибилизации организма к сибиреязвенным АГ путем постановки внутрикожной аллергической пробы. Представляет собой гидролизат вегетативных форм сибиреязвенных бацилл. Действующее начало препарата – белково -полисахаридно-нуклеиновый комплекс, который извлекается из бацилл при гидролизе.

Антраксин фасуют в ампулы по 1 мл. Реакцию ставят на внутренней поверхности предплечья внутрикожно в дозе 0,1 мл. Результат учитывается через 24-48 ч. У людей, вакцинированных или инфицированных сибиреязвенной бациллой, в месте введения антраксина возникает гиперемия и инфильтрат.