Заглавная страница Избранные статьи Случайная статья Познавательные статьи Новые добавления Обратная связь КАТЕГОРИИ: АрхеологияБиология Генетика География Информатика История Логика Маркетинг Математика Менеджмент Механика Педагогика Религия Социология Технологии Физика Философия Финансы Химия Экология ТОП 10 на сайте Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрацииТехника нижней прямой подачи мяча. Франко-прусская война (причины и последствия) Организация работы процедурного кабинета Смысловое и механическое запоминание, их место и роль в усвоении знаний Коммуникативные барьеры и пути их преодоления Обработка изделий медицинского назначения многократного применения Образцы текста публицистического стиля Четыре типа изменения баланса Задачи с ответами для Всероссийской олимпиады по праву Мы поможем в написании ваших работ! ЗНАЕТЕ ЛИ ВЫ?
Влияние общества на человека
Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрации Практические работы по географии для 6 класса Организация работы процедурного кабинета Изменения в неживой природе осенью Уборка процедурного кабинета Сольфеджио. Все правила по сольфеджио Балочные системы. Определение реакций опор и моментов защемления |
Методы исследования строения и функций клетки
I. Микроскопические методы · применяется для исследования строения клетки и её органоидов · позволяют эффективно исследовать живые, не фиксированные или слегка окрашенные клетки · главным методическим приёмом является визуальное наблюдение, в том числе их прижизненное (витальное) исследование · используются объективные методы регистрации клеточного строения: микрофотографирование, цитофотометрию, микроспектрофотометрию, микрокиносъёмку и др. Виды микроскопии: 1. Световая микроскопия n осуществляется в лучах видимого спектра n даёт увеличение около 3000 раз · люминесцентная (флоуресцентная) микроскопия - препараты освещают сине - фиолетовыми лучами - применяют спецефические красители флоурохромы - вызывает свечение (флоуресценцию) многих органических веществ клетки (пигментов, витаминов алкалоидов, дубильных и других высокомолекулярных соединений) - при исследовании флоуресцирующих препаратов обнаруживают детали и тонкости строения, недоступные обыкновенной микроскопии · ультрафиолетовая микроскопия - рассматривание препарата в ультрафиолетовых лучах · и нтерференционная микроскопия · фазово - конирастная микроскопия · поляризационная микроскопия, а также их сочетания и модификации n для большей контрастности и чёткости отдельных клеточных структур применяют прижизненное окрашивание фиксированных препаратов спецефическими красителями (фуксином, метиленовым синим, пиронином, гематоксилином), которые избирательно адсорбируются органоидами, что облегчает их обнаружение и исследование Электронная микроскопия n электронный микроскоп изобретён в 30 - х годах XX в., даёт увеличение до 106 раз n применим только к фиксированным клеткам (фиксатор убивает клетку, но не вызывает грубых изменений структур; под действием фиксатора вещества клетки переходят в нерастворимую форму n в основе действия лежит просвечивание пучком электронов тончайших, обработанных электронопоглощающими и одновременно фиксирующими соединениями или напылённых парами металлов срезов и фиксация микропрепаратов в сильно увеличенном виде на специальный экран или фотопластинку n применяется для исследования субмикроскопического строения клеток и органелл
3. Электронная растровая эмиссионная (сканирующая) микроскопия n даёт возможность получать трёхмерную (обьёмную) картину изображения поверхности срезов и целого объекта 4. Микрохимические (цитохимические) методы n применение специальных цветных реакций непосредственно в клетке n служат для определения локализации и количественного содержания отдельных химических веществ 5. Биохимические методы - дают возможность получения индивидуальных химических соединений и отдельных органелл · метод дифференциального центрифугирования - различные клеточные органеллы и включения имеют различную плотность, поэтому при очень быстром вращении (до 60 тыс. об \ мин) в специальном приборе - ультрацентрифуге - органеллы тонко измельчённых клеток выпадают в осадок из раствора, располагаясь слоями в соответствии со своей плотностью (более плотные компоненты осаждаются при более низких скоростях центрифугирования). Эти слои разделяют и изучают отдельно · хроматографическое разделение смесей · электрофорез 6. Биофизические методы · метод меченых атомов - замена в молекуле одного из атомов соответствующим радиоактивным изотопом (3 Н, 32 Р, 14 С) - радиоактивная метка (не отличается по химическим свойствам, зато легко регистрируется счётчиком при перемещениях в результате химических превращений); позволяет установить последовательность этапов, продолжительность во времени, зависимость от условий биохимических процессов, происходящих в живой клетке · изотопный анализ · регистрация биоэлектрических потенциалов с помощью электрофизиологической аппаратуры · хемилюминесценция · математическое моделирование - исследуется функционирование мембран, функции органоидов, механизмы возникновения и проведения возбуждения, возникновение мышечного сокращения, биофизические особенности клеток и др 7. Микрохирургические методы · применяется для генетических, эмбриологических и физиологических исследований, для извлечения частей клетки и их последующего биохимического анализа · микрооперации производятся с помощью прибора микроманипулятора и при большом увеличении микроскопа (пересадка ядер, хлоропластов, слияние протопластов, пересадка фрагментов зародышевых слоёв зиготы, гибридизация соматических клеток и др.)
8. Метод культуры клеток и тканей · выращивание выделенных из организма клеток или тканей на искусственных стерильных питательных средах · культура клеток и тканей - модель для изучения процессов формирования органелл, депонирования запасных органических соединений, роста клеточных оболочек, биосинтеза физиологически активных веществ и т. п. 9. Рентгеноструктурный анализ · основан на дифракции рентгеновских лучей при прохождении через вещества с упорядоченной структурой (лежит в основе расшифровки структуры ДНК, гемоглобина, миоглобина, коллагена и др. биологических веществ
|
||||||
Последнее изменение этой страницы: 2017-02-05; просмотров: 650; Нарушение авторского права страницы; Мы поможем в написании вашей работы! infopedia.su Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Обратная связь - 18.218.254.122 (0.007 с.) |