В. Какие патологии позволяет диагностировать повышение активности в крови этих изоформ?

А.Креатинфосфокиназа, магнийзависимый фермент, содержится исключительно в цитоплазме и митохондриях миокарда, скелетной мускулатуры и ткани мозга, где катализирует реакцию:

Креатин + АТФ =АДФ + Креатинфосфат

Равновесие реакции при щелочных значениях pH сдвинуто в сторону образования АТФ. Образуемый в отдыхе между усилиями или после нагрузки креатинфосфат представляет собой запас энергии для ресинтеза АТФ во время мышечного сокращения. Высокая активность фермента обнаружена в мышечной и нервной ткани, в которых значительная часть энергии переносится между клеточными компартментами в виде креатинфосфата. Среди различных типов мышечной ткани активность КФК распределяется следующим образом: поперечно‑полосатые мышцы> сердечные мышцы > мышцы беременной матки > мышцы матки > гладкие мышцы. Фермент является гетерогенным белком, состоящим из 2‑х типов субъединиц — В (brain) и М (muscle). В связи с этим выделяют три изофермента: ММ (содержится в скелетной мускулатуре и миокарде), ВВ (преимущественно в мозге и гладких мышцах) и МВ (в сердечной мышце). Изоферменты различаются по физико‑химическим и иммунологическим свойствам.

Определение активности фермента можно проводить как по прямой, так и по обратной реакции, определяя содержание креатина или креатинфосфата:

 

•   в обратной реакции образовавшийся креатин определяют колориметрически с использованием диацетила и α‑нафтола.

•   в прямой реакции содержание креатинфосфата определяют после его кислотного гидролиза по уровню образующегося неорганического фосфата.

 

Б. Креатинфосфокиназа (КФК) представлена тремя изоферментами, которые при электрофорезе разделяются на фракции. Изофермент:

 

•   ММ содержится в скелетной мускулатуре, изофермент

 

•   МВ - в миокарде, изофермент

 

•   ВВ - в ткани мозга.

В. Исследование активности изоферментов КФК в сыворотке крови имеет важное диагностическое значение. Изоферменты креатинкиназы особо важно исследовать при остром инфаркте миокарда, так как МВ-форма в значительном количестве содержится практически только в сердечной мышце. Повышение активности МВ-формы в сыворотке крови свидетельствует о поражении именно сердечной мышцы.Возрастание активности ферментов сыворотки крови при многих патологических процессах объясняется, прежде всего, двумя причинами:

•   выходом в кровяное русло ферментов из поврежденных участков органов или тканей на фоне продолжающегося их биосинтеза в поврежденных тканях;

•   одновременным повышением каталитической активности некоторых ферментов, переходящих в кровь. Возможно, что повышение активности ферментов при «поломке» механизмов внутриклеточной регуляции обмена веществ связано с прекращением действия соответствующих регуляторов и ингибиторов ферментов, изменением под влиянием различных факторов строения и структуры макромолекул ферментов.

Содержание фракции ММ изоферментов повышается:

при травмах скелетных мышц; повреждении сердечной мышцы или ткани мозга; при таких заболеваниях мышц; как дистрофия; дерматомиозит; полимиозит; при пониженной функции щитовидной железы; при рабдомиолизе; после тяжелой физической нагрузки.

Повышенное содержание изофермента МВ отмечается сразу после инфаркта миокарда (через 2-4 часа) и сохраняется в течение примерно 3 суток. Если по истечении этого срока уровень изофермента МВ не возвращается к норме, то это может свидетельствовать о распространении инфаркта или о новом инфаркте. Содержание изофермента МВ тоже наблюдается при рабдомиолизе, повреждении мышц, а также синдроме Рея.

Повышение уровня изофермента ВВ иногда происходит при тяжелом шоке, атрезии желчных протоков, а также при некоторых злокачественных опухолях (карциноме яичников, молочной железы простаты).

159