Определение количества эритроцитов.

Определение количества эритроцитов.

Оснащение: микроскоп, донорская кровь, капилляр 0,02 мл (от гемометра Сали), штатив с пробирками, 3% раствор NaCl, пипетка на 5 мл, счетная камера Горяева с покровным стеклом, стеклянная палочка, ватные шарики, марлевые салфетки.

В сухую, чистую пробирку наливают 4 мл 3% раствора NaCl для разведения крови. Кровь набирают в капилляр до метки (0,02 мл) и добавляют в пробирку, следят за тем, чтобы в капилляре не было воздуха. Кончик капилляра протираем салфеткой,и затем суспензией эритроцитов заполняют камеру Горяева и, поместив ее под микроскоп, производят подсчет эритроцитов в маленьких квадратах, расположенных по диагонали (5 больших квадратах, разделенных на 16 маленьких квадратов). При подсчете 4 количества эритроцитов руководствуются правилом Егорова: к данному квадрату относятся эритроциты, лежащие внутри квадрата, а также на его верхней и левой границах.Эритроциты, лежащие на правой и нижней границах в данном квадрате не подсчитываются.

 Количество эритроцитов (Эр) в 1 л крови рассчитывают по формуле:

где А – сумма эритроцитов в 80 маленьких квадратах,

1/4000 мм3 – объем камеры Горяева над одним маленьким квадратом,

200 – разведение крови в 3% NaCl,

80 – число маленьких квадратов, в которых подсчитывают эритроциты.

 

Определение осмотической резистентности эритроцитов.

Принцип метода состоит в том, что эритроциты в гипертонических солевых растворах сморщиваются, а в гипотонических – набухают. При значительном набухании наступает гемолиз.

В пробирках готовят растворы хлорида натрия различной концентрации (от 0.9 до 0.1%), затем вносят в них один и тот же объем крови (0.02 мл) и оставляют на час при комнатной температуре. Через час в пробирках наблюдают результат: в пробирке, где не произошел гемолиз эритроциты осели на дно, над ними чистый раствор. В пробирках, где произошел частичный гемолиз, гемоглобин придал раствору красный оттенок. В пробирке, где произошел полный гемолиз, жидкость однородного красного цвета, на дне не оседают эритроциты.

 

Определение количества лейкоцитов.

Методика подсчета в камере Бюркера с сеткой Горяева

Ход исследования: Необходимо обезжирить с помощью спирта покровное стекло и камеру Горяева. испарения спирта протираем стекло. Критерием полного протирания является появление на боковых камерах цветных колец Ньютона, которые видны в отраженном свете. Разводим кровь: в пробирку наливаем 0,4 мл 3% р-ра уксусной кислоты, подкрашенной мителеновой синью. Кислота разрушает мембраны клеток, мителеновая синь окрасит ядра лейкоцитов, по которым будем подсчитывать в камере Горяева. Затем пипеткой от гемометра Сали набираем 0,02 мл крови и переносим р-р уксусной кислоты. Кончик капилляра обтираем ваткой и переносим кровь на дно пробирки, несколько раз промываем капилляр. Небольшую каплю р-ра переносим на вторую половину камеры Горяева. Лейкоциты подсчитывают при малом увеличении 25 больших квадрата в сетки Горяева.

Число лей­коцитов в 1 мкл крови рассчитывается аналогично расче­ту числа эритроцитов по формуле

X = (А х 4000 х 20)/400

где X - количество лейкоцитов в 1 мкл крови; А - количе­ство лейкоцитов, сосчитанных в 25 больших квадратов камеры; Б - количество сосчитанных малых квадратов (1600); 4000 - величина, обратная объему камеры, 20-разведение крови, 400- число маленьких квадратиков(25*16)

Нормальное количество лейкоцитов: 4.0 – 9.0 х 10⁹/л. Уменьшение их числа в кро­ви называется лейкопенией, увеличение - лейкоцитозом.

Ход работы.

Перед включением прибора необходимо проверить наличие и целостность всех принадлежностей прибора. Присоедините датчик потока к кабелю до характерного «щелчка», который сигнализирует о правильном соединении. Другой конец ка- 21 беля присоедините к прибору до «щелчка». Освободите фиксатор и поднимите жидкокристаллический дисплей прибора. Включите прибор. После включения прибора появляются текущая дата и текущее время.

Перед началом любого спирометрического теста необходимо ввести данные об испытуемом. Для ввода новых сведений о пациенте (новом пациенте) нажмите кнопку «ID» и, пользуясь клавишами ◄►, внесите необходимые изменения. Вам необходимо заполнить следующие данные: ФИО пациента, дата рождения, рост, вес, пол, этническая группа. После ввода данных нажмите желтую клавишу для подтверждения до появления надписи «Выбрать любую функцию» в нижней части дисплея.

Определение жизненной емкости легких (VC).

Попросите испытуемого вставить новый одноразовый мундштук в держатель датчика потока. Наденьте зажим на нос испытуемого таким образом, чтобы исключить прохождение воздуха через нос. Мундштук должен быть введен в рот так, чтобы его конец оказался за зубами по меньшей мере на 2 см, и губы должны плотно обхватить его таким образом, чтобы исключить подтекание воздуха мимо мундштука.

 Нажмите на клавишу «VC». На экране дисплея в реальном масштабе времени будет отображаться кривая объем-время (спирограмма). Тест должен начаться в течение 30 секунд после нажатия клавиши старт, в противном случае тест будет прерван и прибор возвратится в главное меню.

Испытуемый должен сделать несколько спокойных вдохов и выдохов до появления звукового сигнала и сообщения ЕVC/IVC (в правом верхнем углу). Далее испытуемый должен медленно произвести максимально глубокий вдох, после чего медленный максимально глубокий выдох и вновь медленный максимально глубокий вдох. Серию глубоких вдохов и выдохов следует проводить до конца теста (тест рассчитан на 1 минуту).

После спирометрического теста, на экране появятся график и полученные результаты. Пользуясь желтой клавишей ▼, просмотрите следующие показатели – VC, TV, ERV, RR.Далее нажмите на клавишу печати (изображен значок принтера) для распечатки результатов.

Для того, чтобы закончить тест, нажмите клавишу «ESC» или подождите 3 секунды после последнего изменения объема

Cпироме́трия — метод исследования функции внешнего дыхания, включающий в себя измерение объёмных и скоростных показателей дыхания. Прибор, с помощью которого осуществляется спирометрическое исследование, называется спирометром. Спирометрия используется для диагностики таких заболеваний, как бронхиальная астма, ХОБЛ, а также для оценки состояния аппарата дыхания при других заболеваниях и во время различных медицинских мероприятий.

Спирографи́я (лат. spiro дышать + греч. graphō писать, изображать)

метод исследования функции легких путем графической регистрации во времени изменений их объема при дыхании. Спирография предназначена для оценки состояния легких путем измерения объема и скорости выдыхаемого воздуха. Данная процедура является безболезненной и не связана с введением в организм пациента каких-либо медицинских инструментов, занимает всего несколько минут и может проводиться в амбулаторных условиях.

С помощью спирографии можно предположить или подтвердить диагноз бронхиальной астмы и своевременно начать лечение. Спирография, проводимая с лекарственными средствами, уменьшающими спазм бронхов, позволяет уточнить, является ли нарушение их проходимости обратимым.

Пневмотахометрия — определение пиковых скоростей воздушного потока, достигаемых в режиме «дыхательного толчка». Получаемые показатели неточно называют мощностью выдоха и вдоха (Мвыд и Мвд). По своей сущности метод близок к спирограмме форсированного выдоха и в большей мере, чем ОФВ1 отражает сопротивление воздушному потоку, возникающее на уровне крупных бронхов

Прямая калориметрия

Прямая калориметрия основана на непосредственном учете в биокалориметрах количества тепла, выделенного организмом. Биокалориметр представляет собой герметизированную и хорошо теплоизолированную от внешней среды камеру. В камере по трубкам циркулирует вода. Тепло, выделяемое находящимся в камере человеком или животным, нагревает циркулирующую воду. По количеству протекающей воды и изменению ее температуры рассчитывают количество выделенного организмом тепла.

Непрямая калориметрия

Метод Шатерникова (cтр. 399 в учебнике под ред. В.М.Смирнова)

Метод закрытый. Исследование проводится в специальной респирационной камере в течение 24 часов. Определяется (а) количество поглощенного О₂, (б) количество выделенного СО₂ и (в) количество азота в моче за сутки. По азоту мочи можно рассчитать количество окисленного белка, по данным газообмена с использованием ДК (дыхательного коэффициента) можно рассчитать количество окисленных жиров и углеводов. Найденное количество БЖУ умножим на калорические коэффициенты БЖУ  и узнаем количество выделенной энергии. Метод позволяет определить расход веществ и расход энергии (валовый обмен).

13. Определение должного основного обмена по таблицам.

Методика: Определение  проводится по формуле Гарриса-Бенедикта:

Необходимо измерить рост, вес, возраст

 Далее переходим к таблице. Она разделена на две части. В одной части мы смотрим вес(напротив этой цифры записываем число). В другой части зная рост и возраст находим второе число(на пересечении). Теперь мы складываем две эти цифры, и получаем должный обмен.

Электрокардиография.

Электрокардиограмма - отражает изменение электрического поля сердца при возникновении, распространении и возбуждении в разных отделах сократительного миокарда в течении сердечного цикла.

Приборы: электрокардиограф, электролитная паста.

Ход работы: заземлите электродиограф и подключите его к сети в соответствии с приложенной к прибору инструкцией. Проверьте исправность лентопротяжного механизма. Зарегистрируйте калибровочный сигнал.

Испытуемый должен лежать на кушетке(или сидеть на стуле) в расслабленном состоянии. На его руки и ноги наложите электроды ЭКГ-отведений: красный на правую руку, желтый на левую руку, зеленый на левую ногу, черный на правую ногу. Зарегистрируйте 12 отведений: три стандартных отведедения от конечностей(1,2,3), три усиленных отведений от конечностей(aVR, aVL, aVF) и шесть грудных отведений(V1-V6).

16. Измерение артериального давления у человека..

Обследуемому накладывают на плечо полую резиновую манжету, которая соединена с резиновой грушей, служащей для нагнетания воздуха, и с манометром. При надувании манжета сдавливает плечо, а манометр показывает величину этого давления. Для измерения давления крови с помощью этого прибора, по предложению Н.С. Короткова, выслушивают сосудистые тоны, возникающие в артерии к периферии от наложенной на плечо манжеты. Найдите на локтевом сгибе плечевую артерию, наденьте фонендоскоп и плотно, без надавливания приложите его к артерии., нагнетайте воздух в нее и манометр, фиксируйте момент исчезновения тонов и постепенно снижайте давление воздуха. При проявлении первого толчка отметьте в памяти эту цифру. Продолжайте выпускать воздух из манжетки до тех пор, пока толчки не исчезнут, отметьте в памяти и эту цифру. Цифра, полученная при появлении первого толчка, соответствует систолическому, при исчезновении- диастолическому. Повышение АД выше нормы (110-140;70-90)- гипертензия, понижение- гипотония.  Перед измерением нужно проверить, чтобы стрелка тонометра находилась строго на нулевой отметке.

Общий анализ мочи.

ОБЩИЙ АНАЛИЗ МОЧИ. Общий анализ мочи применяют в диагностике урологических и системных заболеваний. Он включает оценку ее цвета, запаха, прозрачности, определение относительной плотности, рН, содержания белка, концентрации глюкозы и кетоновых тел, а также исследование мочевого осадка (подсчитывают число лейкоцитов, эритроцитов, цилиндров и кристаллов солей). В лабораторных условиях мочу оценивают визуально, проводят скрининговые исследования с помощью специальных тест-полосок, рефрактометрию для определения относительной плотности и микроскопию мочевого осадка (после центрифугирования пробы мочи). Собирают не менее 15 мл мочи (можно использовать произвольно взятую порцию, но желательно - утреннюю).

Рисунок 1. Коленный рефлекс

б/ Ахиллов рефлекс. Испытуемого просят встать на стул на колени так, чтобы стопы свободно свисали. Молоточком производят отрывистый легкий удар по ахиллову сухожилию сначала одной, а затем второй ноги и наблюдают подошвенное сгибание стопы. Рефлекторная дуга замыкается на уровне 1-2 крестцового сегмента спинного мозга.

Рисунок 2. Ахиллов рефлекс

в/ Локтевые рефлексы. Экспериментатор берет руку испытуемого за кисть и просит полностью расслабить мышцы руки, слегка согнутой в локтевом суставе. Производят удар по сухожилию трехглавой мышцы плеча выше локтевого сустава и наблюдают разгибание в локтевом суставе (локтевой разгибательный рефлекс). При ударе по сухожилию двуглавой мышцы плеча в локтевом сгибе происходит сгибание (сгибательный рефлекс). Рефлекторная дуга замыкается в нейронах четвертого-пятого шейного сегмента спинного мозга.

Рисунок 3. Локтевой рефлекс сгибания.

+ Рисунок 3. Локтевой рефлекс разгибания.

 

Бинауральный слух

Оборудование: фонендоскоп с трубками разной длины.

Ход работы: испытуемого усаживают на стул спиной к эксперементатору. Наконечники резиновых трубок фонендоскопа вставляют в уши испытуемого и слегка постукивают по фонендоскопу. Просят испытуемого указать, с какой стороны он слышит звук. Затем трубки фонендоскопа меняют и повторяют опыт. Испытуемый опять сообщает, в каком направлении находится источник звука, указывая источник звука со стороны короткой трубки фонендоскопа.

Определение количества эритроцитов.

Оснащение: микроскоп, донорская кровь, капилляр 0,02 мл (от гемометра Сали), штатив с пробирками, 3% раствор NaCl, пипетка на 5 мл, счетная камера Горяева с покровным стеклом, стеклянная палочка, ватные шарики, марлевые салфетки.

В сухую, чистую пробирку наливают 4 мл 3% раствора NaCl для разведения крови. Кровь набирают в капилляр до метки (0,02 мл) и добавляют в пробирку, следят за тем, чтобы в капилляре не было воздуха. Кончик капилляра протираем салфеткой,и затем суспензией эритроцитов заполняют камеру Горяева и, поместив ее под микроскоп, производят подсчет эритроцитов в маленьких квадратах, расположенных по диагонали (5 больших квадратах, разделенных на 16 маленьких квадратов). При подсчете 4 количества эритроцитов руководствуются правилом Егорова: к данному квадрату относятся эритроциты, лежащие внутри квадрата, а также на его верхней и левой границах.Эритроциты, лежащие на правой и нижней границах в данном квадрате не подсчитываются.

 Количество эритроцитов (Эр) в 1 л крови рассчитывают по формуле:

где А – сумма эритроцитов в 80 маленьких квадратах,

1/4000 мм3 – объем камеры Горяева над одним маленьким квадратом,

200 – разведение крови в 3% NaCl,

80 – число маленьких квадратов, в которых подсчитывают эритроциты.