Лабораторная диагностика листериоза

Лабораторную диагностику листериоза животных и людей проводят в соответствии с Методическими рекомендациями от 19.02.1987 г.

Материал:

▪ патологический: внутренние органы, головной мозг; ▪ клинический: сыворотка крови больных.

В лаборатории проводят:

▪ бактериоскопическое исследование по Граму;

▪ бактериологическое исследование, когда делают посевы суспензии патологического материала 1:5 на элективные среды, идентифицируют по морфологическим, культуральным свойствам, подвижности, биохимическим свойствам, чувствительности к диагностическим фагам L2A и L4A. Определяют серотип в капельной РА, определяют вирулентность выделенных культур внутрибрюшинным заражением белых мышей в дозе 0,3-0,5мл, гибель через 2-6 суток;

▪ биопроба на морских свинках (конъюнктевальная проба, развивается кератоконъюнктивит) или дермонекротическая проба на кролике, после внутрикожного заражения образуется абсцесс, который затем изъязвляется;

▪ серологическое исследование, ставят РА: у крс титр 1:320, у мрс, свиней титр 1:160, у кроликов 1:40; ставят РСК у всех видов животных, титр 1:5.

Если материлом служит силос, проводят бктериологическое исследование и биопробу.

Иммунитет, биопрепараты. У переболевших напряженный иммунитет и длительное носительство от 30 до 500 дней. Для профилактики заболевания в очагах применяют живую вакцину из штамма АУФ, напряженность 1 год. Основу лечения составляет антибиотикотерапия, используют цефалоспорины и аминогликозиды разных поколений. 

 

Вопросы для обсуждения на следующем занятии

 

1. Возбудитель рожи свиней.

2. Возбудитель листериоза.

3. Клинические формы эшерихиоза, источники инфекции, способы заражения.

4. Биологические свойства E.coli.

5. Антигенные свойства и устойчивость возбудителя эшерихиоза.

6. Лабораторная диагностика эшерихиоза, биопрепараты.

 

ТЕМА 18 Лабораторная диагностика эшерихиоза, биопрепараты

 

Цель занятия. Ознакомиться с морфологическими, культуральными, биохимическими свойствами возбудителя, антигенной идентификацией, лабораторной диагностикой, биопрепаратами для профилактики и лечения.

 

Оборудование и материалы. Посевы возбудителя эшерихиоза, биопрепараты для диагностики заболевания, профилактики, АБП для лечения

 

Задание для самостоятельной работы. 1. Провести бактериоскопию колоний E.coli, посева фекалия больного теленка. 2. Поставить капельную РА с антиадгезивной сывороткой и колонией E.coli.. Познакомиться с биопрепаратами для профилактики, АБП для лечения. 

Рис. 22. Возбудитель эшерихиоза

 

Возбудитель Escherichia coli, впервые выделил Эшерих в 1885 году из фекалий больного ребенка.

Относят к отделу Gracilicutes, семейству Enterobacteriaceae, роду Escherichia, в составе рода два вида E.coli и E.blatta, последний вид заболевания у теплокровных не вызывает. 

 

Лабораторная диагностика эшерихиоза (колибактериоза)

Проводят в соответствии с МУ по диагностике колибактериоза от 27.07.2000г

Материал для исследований:

▪ патологический (доля печени с желчным пузырем, сердце с кровью, содержимое 12-перстной кишки с брыжеечным лимфоузлом, трубчатая кость, трупы цыплят);

▪ клинический (фекалий больных, который берут в стерильную посуду).

В лаборатории проводят бактериологическое исследование, чистую культуру идентифицируют до вида по морфологическим, культуральным и биохимическим свойствам, вирулентность выделенной культуры устанавливают, испытывая:

▪ в капельной РА с антиадгезивными сыворотками, если результат отрицательный, определяют серовариант;

▪ в капельной и пробирочной РА с О-коли агглютинирующими сыворотками, если не удается определить серовариант выделенной культуры, то проводят:

▪ биопробу, заражая внутрибрюшинно по 0,5 мл 1миллиардной культурой белых мышей, гибель в течение 2 суток. Если культура выделена от цыплят, то биопробу проводят на цыплятах 4-5-недельного возраста, внутрибрюшинным заражением 1-миллиардной суспензией, гибель в течение 4 суток.

Культуру, выделенную от поросят сеют на кровяной агар (кровь кролика или барана). Если вырастают колонии с гемолизом, дают заключение о выделении возбудителя.

Определяют чувствительность выделенных культур к АБП.

Иммунитет, биопрепараты. У переболевших иммунитет нестерильный. Формируется колостральный у молодняка от вакцинированных матерей. Плановая вакцинация у телят с использованием вакцин:

▪ Вероколивак содержит сорбированные на гидрооксале алюминия протективные антигены: соматические К88,К-99, Р-987, F-41, анатоксины: ТЛ, ТС, VT1, VT2;.

▪ вакцина Коли-Вак представляет сорбированные на гидрооксале алюминия протективные антигены: соматические (О₉ , О₇₈ , О₁₄₁), адгезивные (К-88,К-99,Р-987, F-41), капсульные (К-80, К-90,К87), термолабильный и термостабильный анатоксины. Предложена вакцина в 1997 году. Применяют самкам за 1,5-2 месяца до отела, опороса, лисам песцам за 2-3 недели до гона, двукратно для создания колострального иммунитета молодняка. Поросятам, ягнятам перед отъемом, щенкам песцов, лис в 30-40-дневном возрасте.

▪ Колипротектан–взвесь инактивированных нагреванием распространенных серовариантов E.coli, применяют внутрь 5 раз в день в дозе 10-15 мл с теплой кипяченой водой.

▪ Формолвакцина поливалентная гидроокисьалюминиевая против колибактериоза (эшерихиоза) телят, ягнят, применяют внутримышечно, двукратно самкам за 2 месяца до родов.

Для профилактики эшерихиоза поросят выпускают:

▪ вакцина против эшерихиоза, псевдомоноза и энтерококковой инфекции поросят

Для профилактики колибактериоза у птиц применяют:

▪ вакцина инактивированная против колибактериоза птиц нативная.

Для профилактики и лечения заболевания у сельскохозяйственных животных применяют:

▪ сыворотку поливалентную против колибактериоза с/х животных;

▪ сыворотку антиадгезивную, антитоксическую против эшерихиоза с/х животных.

Для лечения применяют АБП, к которым чувствителен возбудитель, при септической форме внутримышечно, при других внутрь:

▪ антибиотики (левомицетин, гентамицин, тетрациклины, тилозин);

▪ сульфаниламидные препараты (сульфадимезин,

фталазол, этазол, сульфален);

▪ нитрофурановые (фуразолидон, фурагин, фурадонин);

▪ фторхинолоновые (энрофлоксацин, офлоксацин), другие (диоксинорм, фармоксидин). Применяют симптоматические средства против обезвоживания.

 

Вопросы для обсуждения на следующем занятии

 

1. Характеристика сальмонеллезов.

2. Биологические свойства сальмонелл.

3. Лабораторная диагностика сальмонеллезов.

4. Биопрепараты для профилактики, АБП для лечения.

 

ТЕМА 19 Лабораторная диагностика сальмонеллезов, биопрепараты

 

Цель занятия. Ознакомиться с морфологическими, культуральными, биохимическими свойствами сальмонелл, антигенной идентификацией, лабораторной диагностикой, биопрепаратами для профилактики и лечения.

 

Оборудование и материалы. Посевы вакцинного штамма Salmonella typhisuis ТС-177, биопрепараты для диагностики сальмонеллезов, профилактики, АБП для лечения.

 

Задание для самостоятельной работы. 1. Провести бактериоскопию колоний сальмонелл, результат зарисовать 2. Поставить капельную РА с комплексными сальмонеллезными сыворотками и колонией Salmonella typhisuis.

3. Познакомиться с биопрепаратами для профилактики, АБП для лечения. 

 

 

 

 

 

Рис. 23. Сальмонеллы

 

Сальмонеллезы – инфекционные заболевания человека, животных, птиц, вызываемые разными серовариантами сальмонелл – микроорганизмами рода Salmonella, семейства Enterobacteriaceae, 1 и 2 подвида.

У человека заболевание может протекать в виде брюшного тифа, возбудитель которого S.typhi. Заболевание с симптомами брюшного тифа может возникнуть от внедрения S.paratyphi A и S.paratyphi C. Перечисленные сероварианты сальмонелл для животных не опасны и не циркулируют у них.

Сальмонеллез человека распространенное заболевание от проникновения сальмонелл разных серовариантов.

Наибольшее эпидемиологическое значение   имеют

S.typhimurium, S.enteritidis. Сальмонеллез человека может протекать в гастроэнтеритной и генерализованной формах, последняя имеет два варианта:

▪ тифоподобная; ▪ септикопиемическая.

Источником сальмонеллеза человека могут быть больные животные, носители, продукты, полученные от больных, носителей, а также больной человек, переболевший.

Сальмонеллезу, обусловленному S.enteritidis, свойственно преобладание в качестве источника инфекции птицепродуктов, инфицированных этим серовариантом сальмонелл.

Сальмонеллезом (паратифом) болеют телята от 10 дней до 2 месяцев. Возбудитель Salmonella dublin, реже Salmonella typhimurium. Заболевание протекает тяжело с септицемией, интоксикацией, сердечной недостаточностью, пневмонией, пиелонефритом, энтеритом. На определенной стадии болезни преобладают те или иные признаки, которые приводят к гибели больных. Заболевание может принимать хроническое течение, больные телята имеют признаки хронической пневмонии, артрита, энтерита. Паратифом (сальмонеллезом) болеют овцематки и ягнята. Возбудитель Salmonella abortusovis. У овцематок мертворожденные или больные ягнята, которые умирают в первые сутки жизни, задержание последа, эндометрит, бесплодие. Здоровые ягнята заражаются от больных и овцематок-носителей. Заболевание протекает тяжело, по механизму развития подобно паратифу телят.

Паратифом болеют поросята с первых дней жизни и до 4 –месячного возраста. Возбудитель Salmonella choleraesuis, Salmonella typhisuis. Заболевание протекает с септицемией, энтеритом, пневмонией, поражением суставов.

Сальмонеллезом (паратифом) болеют конематки и жеребята. Возбудитель Salmonella abortusequi. У конематок мертворожденные или больные жеребята, задержание последа, бесплодие. Новорожденные больные не встают на ноги, у них диарея, септицемия, гибель на 2-3 день. Если жеребята заразились, то заболевание протекает 7-10 дней с такими же признаками.

У млекопитающих источник инфекции больные и переболевшие – носители.

Способ заражения контактный, алиментарный.

Сальмонеллезом болеют цыплята до 50-дневного возраста, заболевание называют пуллороз, возбудитель Salmonella pullorum. Заболевание протекает в виде септицемии или септикопиемии, а также с энтероколитом, перитонитом, интоксикацией. Если гибель цыплят от септицемии или септикопиемии, то на вскрытии обнаруживают абсцессы на сердце, легких, печени. Такую форму заболевание наблюдают в первые 10 дней жизни, если заражение произошло трансовариально, или аэрогенно в период инкубации. Энтероколитную форму заболевания с интоксикацией выявляют у цыплят, погибших в период оперения и заразившихся алиментарно на объекте.

Цыплята старше 50 дней и взрослые куры болеют сальмонеллезом, заболевание называют тиф. Возбудитель Salmonella gallinarum. Заболевание протекает с септицемией, энтероколитом, интоксикацией.

Куры могут быть носителями многих видов сальмонелл, которые не вызывают у них заболевания, но инфицируют птицепродукцию. К представителям транзиторной микрофлоры кишечника кур относят Salmonella enteritidis, Salmonella typhimurium, Salmonella anatum.

Паратифом (сальмонеллезом) болеют водоплавающие. Возбудитель Salmonella typhimurium, Salmonella enteritidis, Salmonella anatum. Заболевание протекает в септической и энтероколитной форме.

 

Лабораторная диагностика сальмонеллезов В соответствии с МУ от 1990 года и дополнениями в МУ от 1994г., МУ 4.2.2723-10 и МУ по обнаружению сальмонелл в пищевых продуктах, объектакх окружающей среды Федерального центра Роспотребнадзора от 2011г.

Материал для исследований:

▪ патологический (внутренние органы, трупы птиц); ▪ клинический (фекалий больных, сыворотка крови); ▪ яйцо, тушки птиц.

В лаборатории проводят:

▪ бактериологическое исследование с выделением чистой культуры и идентификацией по морфологическим, культуральным, биохимическим свойствам, определяют серовариант в капельной РА с О-комплексными сыворотками, О-,Н- монорецепторными сыворотками, определяют чувствительность сальмонелл к АБП;

▪ серологическое исследование с целью выявления носительства сальмонелл у кур родительского стада, ремонтного молодняка в возрасте 50-55 дней в кровянокапельной РНГА, используя пуллорный эритроцитарный антиген. Положительно реагирующих выбраковывают, в помещении дезинфекция;

▪ серологическое исследование сыворотки крови хронически больных телят в РА с сальмонеллезным антигеном серогруппы Д₁;

▪ серологическое исследование сыворотки крови овцематок в РА с сальмонеллезным антигеном серогруппы В или в РНГА с эритроцитарным антигеном серогруппы В;

▪ бактериологическое исследование яиц, мяса птицы.