Биологические свойства возбудителей бруцеллеза

Бруцеллез хроническое инфекционное заболевание человека, животных с лихорадкой, поражением опорнодвигательного аппарата, нервной, сердечно-сосудистой, половой систем.

У животных поражается половые органы, суставы, бурсы. Клинически у самок мертворожденные, задержание последа, эндометрит, бесплодие, затем поражение суставов, бурс. У самцов поражение суставов и бурс. 

Источник больные, которые выделяют возбудителей с мочой, молоком, фекалием, околоплодными водами, последом, кровью.

Способ заражения: контактный, алиментарный, половой. 

Возбудителей относят к отделу Gracilicutes, роду Brucella. Впервые возбудителя бруцеллеза выделил Брюс в 1886-87 г.г., в честь ученого возбудителей называют бруцеллами. У животных циркулирует 6 видов бруцелл:

▪ Brucella melitensis –циркулирует у овец и коз, имеет 3 биовара, 1 и 3 биовары поражают человека;

▪ Brucella abortus bovis – возбудитель бруцеллеза у крс, известно 9 биоваров к 1, 6, 9 чувствителен человек;

▪ Brucella suis имеет 5 биоваров, циркулирует у свиней, ко всем биоварам чувствителен человек;

▪ Brucella canis – возбудитель бруцеллеза собак;

▪ Brucella ovis – возбудитель инфекционного орхита и эпидидимита баранов, самки не болеют;

▪Brucella neotomae – циркулирует у древесных крыс.

Морфологические свойства. Мелкие грамотрицательные коккоподобные палочки, по Козловскому красятся в красный цвет, аэробы. Brucella abortus bovis микроаэрофил.

Культуральные свойства. Растут медленно 30 дней на элективных средах: 

▪ МППБ, МППА (мясопептоннопеченочный бульон и

агар);

▪ ПГГБ и ППГА (печеночноглюкозный глицериновый бульон и агар).

На жидких средах возбудители образуют помутнение с крошковидным осадком, на плотных – выпуклые, прозрачные колонии.

Биохимические свойства. Слабые, все виды образуют сероводород.

Факторы вирулентности.  

▪ эндотоксин вызывает воспаление в местах скопления, при циркулировании в крови повышение температуры, интоксикацию, ГЗТ;

▪ ферменты проникновения: гиалуронидаза, нейрамидаза, возбудитель проникает через неповрежденную кожу, слизистые;

▪ ферменты патогенности: уреаза, ее накопление формирует сильный токсикоз с поражением сердечнососудистой и нервной системы.

Антигенные свойства. Все виды имеют соматический О-антиген. Два вида соматических антигенов имеют Brucella melitensis, Brucella abortus bovis, Brucella suis и взаимодействуют с S-, R- диагностическими сыворотками. Brucella canis, Brucella ovis постоянно агглютинируют с R- сывороткой.

Устойчивость. В земле 40 дней, в навозе 120 дней, в воде 5 месяцев. В мясе 320 дней, в шкурах 2 месяца, в шерсти 3-4 месяца. Чувствителен к 2%-ному фенолу, 0,5%-ному лизолу, 2%-ному формалину, 1%-номй хлорамину, 1%-ной соляной кислоте, гибель за несколько мин.

Лабораторная диагностика бруцеллеза

Диагностику бруцеллеза проводят согласно Наставления по диагностике бруцеллеза сельскохозяйственных животных от 2003г.

Диагностика заболевания включает: серологические исследования, аллергическое исследование, бактериологическое исследование, молекулярно-генетическое исследование. ● Серологические исследования предусматривают исследование сыворотки крови животных в серологических реакциях:

▪ крс исследуют в РА (диагностический титр 1:200), РБП (розбенгалпробе), РСК, РДСК (положительный титр 1:5, 1:10), РИД с О-полисахаридным антигеном и КР

(кольцевая реакция с молоком);

▪ мелкий рогатый скот исследуют в РА (положительный титр 1:100), РСК, РДСК (положительный титр 1:5, 1:10), РИД с О-полисахаридным антигеном;

▪ свиней исследуют в РСК, РДСК (положительный

титр 1:5, 1:10);

▪ собак исследуют в РА (положительный титр 1:50), РСК (положительный титр 1:5,1:10).

● Кольцевая реакция с молоком с целью определения благополучия ферм по бруцеллезу крс и проверки молока на рынках, когда к 2 мл молока добавляют 0,1 мл антигена, помещают в термостат или водяную баню 37 -38⁰ С на 1 час и 30 мин выдерживают при комнатной температуре, если в слое сливок появляется синее или красно-вишневое кольцо – положительный результат, если равномерное окрашивание – отрицательный.

● Аллергическое исследование проводят у свиней с бруцеллином ВИЭВ, внутрикожной пробой, учет через 24, 48 часов.

● Бактериологическое исследование мертворожденного, лимфоузлов положительно реагирующих в серологических реакциях животных, содержимого бурс включает бактериоскопию по Граму мазков отпечатков, затем посевы. Выделенную чистую культуру, идентифицируют по морфологическим, культуральным, антигенным свойствам, в капельной (пластинчатой) РА с диагностическими S- и R- бруцеллезными сыворотками.

● Биопроба (биологическое исследование) проводят

на морских свинках, используя тот же материал, из которого готовят суспензию 1:10 на физиологическом растворе. Морским свинкам вводят 1 мл суспензии, на 15,25, 40 сутки после заражения берут кровь и сыворотку исследуют в пробирочной РА в разведениях 1:10 до 1:80. Положительно реагирующих умертвляют, из лимфоузлов, селезенки, печени, костного мозга выделяют чистую культуру, идентифицируют. Срок исследования два месяца.

● Молекулярно-генетическое исследование ПЦР суспензии патматериала, содержимого гигром, стабилизированной крови, молока, спермы самцов с признаками орхита и эпидидимита, обнаруживают ДНК бруцелл животных.

Иммунитет. Формируется медленно, сопровождается накоплением Ig М и IgG, неполных антител, сенсибилизацией организма к возбудителю. Накопление антител не имеет существенного значения для освобождения организма от возбудителя. Элиминирование возбудителя обеспечивают Т-клетки.

В зонах пастбищного содержания животных, северных оленей целесообразно использовать вакцины для крс: ▪ живая бруцеллезная вакцина из штамма №19; ▪ живая бруцеллезная вакцина из штамма №82.

У вакцинированных высокие титры антител, но нет мертворожденных и распространения заболевания.

В овцеводстве используют живую вакцину из штамма Rev-1.

Лечение. Бесперспективно, больных выбраковывают. У человека применяют аминогликозиды разных поколений, рифампицин, тетрациклин, а для профилактики вакцину из штамма №19.

 

Вопросы для обсуждения на следующем занятии

 

1. Биологические свойства бруцелл.

2. Лабораторная диагностика бруцеллеза.

ТЕМА 15 Возбудитель туляремии. Патогенные иерсинии

 

Цель занятия. Ознакомиться с биологическими свойствами возбудителя туляремии, лабораторной диагностикой заболевания. Разобрать лабораторную диагностику антропозоонозной чумы, псевдотуберкулеза.

 

Оборудование и материалы. Таблицы, слайды биологических свойств иерсиний, возбудителя туляремии, биопрепараты.

 

Задание для самостоятельной работы. 1.Провести учет РА для диагностики бруцеллеза, результат зарисовать. 2. Познакомиться с биологическими свойствами возбудителя туляремии, лабораторной диагностикой, таблицами, слайдами биологических свойств возбудителей, клиническими признаков изучаемых заболеваний.

 

 

Рис. 19. Результаты РА

 

Биологические свойства возбудителя туляремии

Туляремия – природно-очаговая, зооантропонозная болезнь с септицемией, гнойным воспалением лимфоузлов, поражением нервной системы.

У больных внезапно высокая температура, воспаление лимфоузлов, маститы, мертворожденные, парезы, параличи.

Восприимчивы 125 видов позвоночных и 101 вид беспозвоночных, человек.

В природе возбудителя поддерживают зайцы, мыши, водяные крысы, ондатры, птицы, клещи, слепни, комары. Природные очаги в поймах рек.

Из сельскохозяйственных животных чувствительны ягнята и поросята у них септицемия, воспаление лимфоузлов, менингит.

Источник инфекции больные животные, инфицированные корма, вода, кровососущие насекомые.

Способ заражения: алиментарный, трансмиссивный, контактный, аэрогенный. Человек заражается от употребления воды, пищевых продуктов, укусов клещей, слепней, комаров.

Возбудитель Francisella tularensis назван в честь Э.

Фрэнсиса, изучившего возбудителя и предложившего заболевание назвать туляремией. Впервые возбудителя выделили в 1911 году Г. Мак-Кой и Ш. Чепин в районе озера Туляре, в Калифорнии. Относят к отделу Gracilicutes, семейство не определено, роду Francisella. В составе рода три подвида F.tularensis subsp.holarctica умеренно - патогенный циркулирует в РФ. 

Морфологические свойства. Грамотрицательная коккоподобная палочка, имеет капсулу, слабо воспринимает красители, размножается почкованием, может размножаться внутри фагоцитов, от чего снижается эффективность антибактериального лечения, строгий аэроб.

Культуральные свойства. Растет на элективных питательных средах с добавлением желтка, цистина. Лучшая среда – среда Мак-Коя, образует S-формы мелкие прозрачные голубоватые колонии. R- формы авирулентные.

Биохимические свойства. Каталаза – положительные, восстанавливают (обесцвечивают) красители, ферментируют глицерин, содержат цитруллинуреидазу.

Факторы вирулентности:

▪ эндотоксин вызывает гнойное воспаление, повышение температуры тела, сенсибилизацию организма, общую интоксикацию;

▪ капсула защищает от завершенного фагоцитоза, обеспечивает пролиферацию в фагоцитах, воспаление лимфоузлов;

▪ ферменты патогенности: гиалуронидаза, фибринолизин, аспарагиназа и др.

Антигенная структура. Имеет два антигенных комплекса, локализованные на поверхности клетки:

▪ Vi –антиген содержит липиды и белки, против него образуются Ig;

▪ О-антиген находится в клеточной стенке и капсуле.

Устойчивость. Длительно сохраняется в окружающей среде при низкой температуре 8-10 месяцев, под действием УФЛ погибает через 20-30 мин. В трупах грызунов жизнеспособен 3 месяца. Чувствителен к дезинфектантам: 5%-ные растворы фенола, лизола, формальдегида, хлорамина за несколько мин.