Медико-биологическое обоснование применения Трансфер факторов В комплексе иммунореабилитационных мероприятий

 

    Внедрение в клиническую практику иммунотропных препаратов открыло небывалые перспективы в борьбе с онкологическими, аутоиммунными заболеваниями, иммунодефицитными состояниями и другой иммунозависимой патологией.

    Необходимо отметить, что любые новые знания, полученные в области фундаментальной иммунологии, немедленно внедряются в практическое здравоохранение, будь-то лабораторная диагностика или лечебные препараты (достаточно вспомнить разработку технологии получения моноклональных антител). К настоящему времени созданы и продолжают создаваться многочисленные иммунотропные препараты (иммуномодуляторы). Особое место среди них занимают Трансфер Факторы (от слова трансфер - перенос), эффективность которых доказана при самых различных заболеваниях. История создания трансфер-факторов (ТФ) как лечебно-профилактических средств состоит из двух направлений:

1. Создание фармпрепаратов ТФ, полученных из лейкоцитов, обладающих специфичностью к определенному антигену, и вводимых в организм реципиента с помощью инъекций (т.н. лейкоцитарные антиген-специфические трансфер факторы).

2. Создание ТФ как нутрицевтиков из молозива крупного рогатого скота и желтка кур, обладающих интегрально-регуляторным воздействием на иммунную систему, и вводимых в организм реципиента per os.

 

1.1 Создание лейкоцитарных антиген-специфических ТФ.

Если иммунная система обладает памятью, можно ли ее, эту память, перенести в другой организм? Исходя из этих предположений, впервые Л. Дейч в лаборатории И.И.Мечникова (1953) показал, что клеточный иммунитет (память) можно перенести от иммунизированных животных к интактным при помощи лизатов, полученных из сенсибилизированных к конкретному антигену клеток крови. В дальнейшем Lawrence H.S. (1955) описал диализируемый лейкоцитарный экстракт (DLE), который был способен специфически переносить состояние гиперчувствительности замедленного типа к субстанции М стрептококка и туберкулину от иммунного донора к неиммунному реципиенту. Термин трансфер фактор (фактор переноса) впервые употребил Lawrence, который считал, что в DLE (диализированном лейкоцитарном экстракте) содержится нечто (трансфер фактор), с помощью которого можно перенести в другой организм иммунную память о конкретном антигене. В последующем им было также показано, что ТФ не обладают видовой специфичностью, а их молекулярная масса лежит в пределах 3500-10000 Da.

    По данным Fudenberg H. et al. (1994) диализированный лейкоцитарный экстракт (DLE) содержит до 200 веществ (тимозин, серотонин, гистамин, брадикинин, аскорбат, простагландин, гипоксантин, никотинамид и др.). Определенная часть DLE обладает адъювантными свойствами (антиген-неспецифический иммуностимулирующий эффект). Часть DLE обладает иммуносупрессивным эффектом.

    Другие авторы также обнаружили, что в составе ТФ (DLE) содержатся два антигенспецифических компонента – индукторный/хелперный и супрессорный (

Holzman R.S. et al., 1983; Lawrence H.S., Borkowsky W., 1996.

; Ю.А.Гриневич и соавт., 2008).

    Индукторный и супрессорный компоненты ТФ обладали способностью связываться со специфическим антигеном (Lawrence, 1983;

Kirkpatrick, 1988).

 

    По мнению H.Fudenberg, H.L.Fudenberg (1989) для любого антигена должен быть свой специфический ТФ. Это означает, что ТФ должны отличаться между собой так, как отличаются антиген-связывающие сайты гипервариабельных регионов иммуноглобулинов или антиген-распознающих рецепторов Т- и В-лимфоцитов.

    D.C.Dumonde (1999)

 считает, что активное начало ТФ – низкомолекулярные антигенспецифические цитокины Т-клеточного происхождения.

Они способны переносить антигенспецифическую иммунореактивность от иммунного донора к неиммунному реципиенту. Предположили, что ТФ, в зависимости от конкретных условий в организме конкретного реципиента, могут оказывать регуляторный эффект.

В эксперименте с помощью аффинной иммуносорбции на твердофазных специфических антигенах выделены и охарактеризованы препараты ТФ; их свойства в обобщенном виде представлены в табл. 1.

 

Таблица 1 – Общая характеристика ТФ (Ch. H. Kirkpatrik, 2000; А.Н.Мац и соавт., 2008).

Общая характеристика ТФ	Гидрофильные негативно заряженные a-глобулины относительно термостабильны
Молекулярная масса	5-8 кД
Структура	40-60 аминокислотных остатков, вариабельная (V) и константная (С) части; в С-фрагменте сиквенирован общий для всех ТФ декапептид LLYAQDL/VEDN
Аффинность к гомологичному антигену	Прямое связывание с нативным антигеном
Взаимодействие с антителами и антигеном	Оказывают вспомогательный эффект при связывании комплекса «антиген+ТФ» с антителами
Взаимодействие с клетками	Адсорбция на Т-хелперах 1, гранулоцитах, моноцитах и макрофагах
Иммуноспецифическая активность	Активны в пикомолярной концентрации

 

Как видно из таблицы, ТФ обладали способностью прямо связываться с нативным антигеном, оказывая в последующем вспомогательный эффект при связывании комплекса антиген + ТФ с антителом. Крайне важно для понимания механизма действия ТФ их свойство адсорбироваться на Т-хелперах 1 типа, а также на моноцитах/макрофагах и гранулоцитах, вызывая их последующую активацию.

В настоящее время существует несколько гипотез относительно механизма действия лейкоцитарных специфических ТФ, которые дополняют друг друга.

Механизмы, с помощью которых действуют специфические ТФ:

1. Являются фрагментами антиген-распознающих рецепторов (H.Fudenberg, 1993);

2. Усиливают экспрессию рецептора ИЛ-2 (Gotlieb A.A., 1991);

3. Повышают продукцию gИНФ (Ch.H. Kirkpatrick, 1993);

4. Повышают уровень Са+2 в клетке, активируя кальцинейрин (Fadeenko N.P. et al., 1999);

 

5. Связываются с мембраной лимфоцитов, делая их пассивно АГ-специфическими (Ch.H. Kirkpatrick, 1993);

6. Связываются с АГ, ассистируя при его распознавании (Ch.H. Kirkpatrick, 1992);

7. Являются цитокинами (или их фрагментами) Т-клеточного происхождения, участвуя в регуляции иммунного ответа (D.C.Dumonde, 1999);

8. Повышают количество стволовых клеток в селезенке (V.Kofranek et al., 1989).

    Говоря о том, что же представляют собой ТФ, что является их действующим началом, приведем высказывание H.Fudenberg, G.Pizza (1993), которое с нашей точки зрения полностью соответствует действительности и объясняет разносторонние механизмы действия ТФ: «Мириады пептидов, присутствующих в ТФ (DLE), соответствуют сумме иммунного опыта конкретного индивидуума. ТФ являются инструментами иммунной системы».

Многочисленные исследования доказали, что ТФ, полученные от человека или животных не обладают видовой специфичностью и обладают эффективностью при их перекрестном введении, даже от низшего вида животных высшему. Считают, что ТФ, представляя собой пептид с низкой молекулярной массой, являются теми консервативными структурами в рамках иммунной системы, которые отобрала в течение миллионов лет природа для реализации иммунных защитных реакций (J.M.Dwyer, 1996).

    К настоящему времени в разных странах ТФ зарегистрированы под разными названиями в виде фармпрепаратов, полученных из лейкоцитов: «Immodin» (Чехия), «RCTF» (Япония), «Transfer Factor» (Франция, Германия, Швейцария), «Imreg-1» и «ISS» (США), «Аффинолейкин» (Россия). Все они используются при различных патологических процессах с нарушением клеточных механизмов иммунного воспаления (Espinosa Padilla S.E. et al., Ch.H. Kirkpatrick, 2000, 2009; Berron-Perez R. et al., 2007).

Таким образом, исследования первых 3-4 десятилетий, посвященные лейкоцитарным антигенспецифическим трансфер факторам, создали прочную научно-методическую базу для разработки пероральных нутрицевтиков трансфер-факторов.

 

    1.2 Создание трансфер факторов как нутрицевтиков

 

    Переходя к ТФ нутрицевтикам напомним, что поступление пищи в организм - одно из важнейших условий для поддержания жизни.

Молозиво и желток птиц представляют собой первый пищевой продукт (нутриент), включающий в себя огромное количество инструктивных и питательных компонентов, отобранных природой за миллионы лет эволюции (включая конкретную маму и частично папу).

В 1973 году J.A. Mohrвпервые сообщил об успешном переносе (индукции) клеточной гиперчувствительности от донора к реципиенту при употреблении молозива per os и предположил, что это может быть обусловлено ТФ.

    Вначале это вызвало сомнение, поскольку считали, что пептиды ТФ разрушаются в желудочно-кишечном тракте. Однако, после того, как Jeter W.S. et al (1979) показали, что трансфер фактор, введенный добровольцам per os, эффективно индуцировал у них замедленную гиперчувствительность к туберкулину и кокцидиоидину, сомнения рассеялись. В настоящее время описывают несколько механизмов, с помощью которых трансфер фактор проникает в организм и оказывает свое действие:

I. Прежде всего молекула ТФ, будучи полипептидом (44 аминокислотных остатков), расщепляется на более мелкие функционально активные пептиды (пептидолиз). Часть образовавшихся пептидов (2-3 аминокислотных остатка) проникает через межэпителиальные щели, другая часть связывается с рецепторами лимфоидных и эпителиальных клеток кишечника, захватывается отростками дендритных клеток.

II. Среди традиционных клеток эпителия тонкого кишечника есть т.н. М-клетки. Они обладают способностью к пиноцитозу и последующей транслокации захваченного в просвете кишечника материала в собственный «карман», где присутствуют клетки иммунной системы – дендритные клетки, макрофаги, распознающие доставленный материал и подающие организму соответствующий сигнал.

По мнению H.Fudenberg (1994) потенциал в лечении человеческих заболеваний ТФ, выделенными из коровьего молозива, фантастический.

    Сегодня известно, что особенно молозиво, а вслед за ним и материнское молоко - это своеобразный коктейль инструктивных веществ, которые дают первый толчок и далее помогают правильно созревать иммунной системе родившегося организма. Более того, эти же вещества в первые месяцы жизни несут заместительную функцию. По данным разных авторов (R. Garofalo (2010), Brandtzaeg (2010), Lönnerdal Bo (2010)) в молозиве содержатся: sIgA; IgA, IgM, IgG; лизоцим;

лактоферин;

Т-лимфоциты, в основном Т-хелперы; В-лимфоциты:

дендритные клетки;

гормоны;

цитокины (ИЛ-6, TGFβ, ИЛ-8, ИЛ-10, ГМКСФ и др.).

Суммируя, можно сказать, что сегодня к основным функциям молозива и грудного молока относятcя:

1. Индукция дозревания иммунной системы и эпителиальных покровов.

2. Пищевой (трофический) эффект.

3. Защита от внешних и внутренних патогенов.

4. Поддержание антигенного постоянства (гомеостаза) организма (интегрально-регуляторное воздействие цитокинов и их фрагментов).

В 1989 г. G.B.Wilson и G.B.Paddock запатентовали метод получения ТФ из молозива коров. Фирмой «4 Life Research» (США) были созданы с использованием указанной технологии, а также собственной патентованной технологии получения ТФ из желтков яиц птиц, были созданы и зарегистрированы в виде биологически активных пищевых добавок ТФ, получившие название Трансфер Фактор  классический, Трансфер Фактор Плюс и Трансфер Фактор  Эдвенсд. По данным разработчика они:

- представляют собой концентрат природных пептидов, получаемых из молозива коров или желтка яиц;

-

- молекулярная масса – 1000-10000 дальтон.

Длина – 44 аминокислоты;

- вырабатываются клетками иммунной системы и относятся к цитокинам.

За период с 2000 по 2011 гг. в различных клиниках России, Украины и Казахстана проведены исследования, показавшие высокую клинико-иммунологическую эффективность ТФ фирмы «4 Life Research» (США) при лечении больных различными заболеваниями.

Показано, что Трансфер Фактор Плюс вызывал существенное улучшение иммунного статуса у ВИЧ-инфицированных больных (Н.В. Карбышева и соавт., 2003). Было показано, что применение Трансфер Фактор Плюс снижает резистентность к противотуберкулезным препаратам; оказывает протективный эффект при химиотерапии рака; помогает нивелировать последствия гестационного пиелонефрита; усиливает функцию естественных киллерных клеток; улучшает состояние гуморального и клеточного звена иммунитета при эрадикационной терапии H.pylori; показана более высокая эффективность при лечении псориаза и атопического дерматита (М.В.Киселевский, Е.О.Халтурина, 2003; Д.В.Киприянов, 2003; И.Г.Цой, А.М.Есенгельдиева, 2007; И.Г.Цой, Сактаганов М.И., 2007).

    Согласно данных Д.В.Куприянова (2003). Доведена эффективность применения Трансфер Фактора Плюс при урогенитальным хламидиозе. Автор наблюдал две группы больных с урогенитальным хламидиозом. Одна из них получала 3 антибиотика, другая – один антибиотик в комплексе с Трансфер Фактором Плюс. Частота возникновения побочных эффектов во второй группе была намного меньше при более высокой эффективности.

В.А. Дадали и соавт. (2002) изучали эффективность применения ТФ у больных остеомиелитом в до- и послеоперационном периоде. По данным авторов ТФ, являясь иммуномодулятором, одновременно оказывал разностороннее влияние на биохимические механизмы неспецифической резистентности, включая систему свободно-радикального окисления, повышал устойчивость клеточных мембран, активность антиоксидантной защиты. Авторы считают, что ТФ обладает более широким спектром действия на организм, чем только иммунотропным, и может рассматриваться как адаптоген. Полученные данные позволяют говорить о возможности использования ТФ с целью профилактики и иммунореабилитации в группах риска и у больных с хронической бактериальной и персистирующей вирусной инфекцией.

    Снижение свободно-радикального окисления липидов и повышение стабильности цитомембран оказывает протекторное действие на эпителиальный покров слизистых, увеличивая тем самым конкурентную адгезию на них физиологической микрофлоры и усиливая местный иммунитет.

    Обнадеживающие результаты получены при использовании ТФ у больных псориазом и атопическим дерматитом (Головина Е.В., 2003). После назначения ТФ в комплексе с традиционной терапией уже через 7-10 дней значительно уменьшался зуд, шелушение и резко сокращалось количество высыпаний на коже; при продолжении приема препарата до 20 дней у всех пациентов наступила ремиссия.

    Ищейкин К.Е. в серии работ (2008, 2008, 2009) опубликовал результаты исследования рациональной иммуномодулирующей терапии у детей, больных атопическим дерматитом, с учетом современных взглядов на патогенетические механизмы развития дерматоза. Автор делает общий вывод, что назначение комплексной терапии детям, больным атопическим дерматитом (IgE ассоциированный вариант) и детской экземой (не IgE ассоциированный вариант), в составе антигистаминного препарата эриус, иммуномодулирующего средства Трансфер Фактор классический и иммуносупрессивного средства для местного использования элидел, показало его эффективность (исчезновение субъективных ощущений и регресс клинических проявлений) и привело к увеличению клинической ремиссии на 2-3 месяца.

 По данным Добровольского М.А., Тюевой Н.В. и соавт. (2008) применение Трансфер Фактора Плюс в комплексе с химиолучевой терапией распространенных форм рака шейки матки достоверно повышает темпы и степень резорбции опухоли в сравнении с традиционной лучевой терапией.

Г.Н. Дранник и соавт. (2008) изучали in vitro влияние Трансфер Фактор Эдвенсд на продукцию ИЛ-12, -15 и -18 мононуклеарными клетками периферической крови больных с частыми рецидивами герпесвирусной инфекции.

Авторы обнаружили, что Трансфер Фактор Эдвенсд обладает способностью усиливать продукцию ИЛ-12, -15, -18; считают, что это объясняет его активирующее влияние на ЕК-клетки и Т-лимфоциты, описанное в многочисленных публикациях.

По мнению авторов, Трансфер Факторы – перспективные препараты для иммунореабилитации и иммунопрофилактики. Следует отметить Информационное письмо, посвященное применению трансфер факторов для лечения и профилактики гриппа и ОРВИ (Гарник Т.П. и соавт., 2009).

Суть внедрения: возможность использования естественных иммуномодуляторов ТФ в комплексной терапии и профилактике гриппа и ГРВИ.

В.И. Донцов и В.Р. Крутько из Национального геронтологического центра Российской Федерации выдвинули свою теорию старения организма. Согласно ей вместе с организмом стареет и иммунная система, что сопровождается:

– прогрессирующей атрофией тимуса и всей лимфоидной ткани с возрастом;

– накопление с возрастом субпопуляций Т-лимфоцитов супрессоров;

– снижением количества и функциональной активности циркулирующих Т-лимфоцитов;

– снижением количества и функциональной активности естественных киллеров.

Согласно этой теории снижение функции иммунной системы приводит к развитию жизнеугрожающих заболеваний. Это подтверждается данными литературы. В настоящее время в т.н. анти-aging программах (программы предупреждения старения) ведущее место занимают иммунотропные препараты, среди которых своим потенциалом выделяются Трансфер Факторы, в особенности Трансфер Фактор Плюс.

По итогам клинических испытаний в Российской Федерации в 2004 году опубликовано Методическое письмо, в котором Трансфер факторы рекомендуется применять:

1. При хронических стрессовых ситуациях.

2. При переутомлении, повышенных физических нагрузках.

3. В программах anti-age (профилактика старения).

4. Для профилактики иммунодефицитных состояний.

5. При дисрегуляции иммунных процессов.

Многочисленные экспериментальные и клинические исследования позволили суммировать иммуно-биологические эффекты Трансфер-факторов:

Биологическое действие трансфер фактора:

- модулирует функции хелперных, киллерных и регуляторных Т-лимфоцитов;

- вызывает неспецифическую активацию макрофагов;

- оказывает активизирующее влияние на ЕК-клетки (естественные киллеры);

- способствует завершенному фагоцитозу;

- способствует распознаванию антигенов макрофагами;

- ускоряет презентацию антигенов иммунокомпетентным клеткам;

- сокращает время выработки антител;

- усиливает местный иммунитет за счет снижения свободно-радикального окисления липидов и повышения стабильности цитомембран.

С учетом приведенных выше данных, а также принимая во внимание, что Трансфер Факторы для перорального применения происходят из натурального пищевого продукта, они с полным основанием могут быть отнесены к разряду нутрицевтиков, а еще более конкретно, к иммуноцевтикам, представляющим собой множественную совокупность функционально активных пептидов, происходящих прежде всего из цитокинов и оказывающих интегрально-регуляторное воздействие на клетки организма, в том числе на клетки иммунной системы. Сегодня известно, что адаптогенно-гомеостатический потенциал цитокинов обусловлен их способностью объединять в функционально-единую сеть иммунную, нервную и эндокринную системы, а также эпителиальные и эндотелиальные покровы организма.

Мы привели историю создания и сравнение двух разновидностей трансфер факторов – фармпрепаратов и биологически активных пищевых добавок – нутрицевтиков – для того, чтобы показать преемственность, перспективность и безопасность ТФ-нутрицевтиков в программах иммунореабилитации и иммунопрофилактики. Наступил период проведения серьезных клинических контролированных исследований для создания рекомендаций по применению Трансфер Факторов с указанием нозологии, доз, схем и длительности назначения.                            

Таким образом, использование ТФ открывает новые перспективы модулирования локальных и общих иммунных реакций при пищевой аллергии, атопических кожных реакциях и при заболеваниях, в патогенезе которых ведущее место занимают иммуно-опосредованные механизмы.