Биохимический анализ мочи здоровых животных

Показатели	Нормативы
Определение кровяных пигментов	Не обнаруживаются
Индикан,г/л	22-24
Определение билирубина качественными пробами	Не выявляют
Определение прямого билирубина количественными пробами,мг%	Не выявляют Не более 1
Уробилиновые тела, мг% Качественными пробами	0,5-1,5 Не обнаруживаются
Желчные кислоты	Не обнаруживаются Не более 0,01%

Желчные пигменты и кислоты

К ним относятся билирубин, биливердин, билигумин, билифусцин и производные билирубина — уробилиноген и уробилин. Основные желчные кислоты - холевая и таурофолиевая.

Проба Богомолова. К 5 мл мочи приливают 1-2 капли 10 % раствора сернокислой меди (медного купороса) и 2 мл хлороформа, закрывают пробирку пробкой, тщательно взбалтывают (перевертывают 15-20 раз). Проба на урибилин положительная, если хлороформ окрашивается в розовый цвет. Она выявляет уробилин при его содержании 0,1 мг % и больше.

Проба с метиленовой синькой. В пробирку наливают 2 мл мочи, добавляют каплю 0,2 % раствора метиленовой синьки. При положительной пробе на билирубин появляется зеленое окрашивание, при отрицательной -синее.

Проба Флоренса. К 5 мл мочи приливают 6-7 капель крепкой серной кислоты, 2-3 мл эфира и осторожно взбалтывают. Дают отстояться. Эфирную вытяжку переносят в другую пробирку, куда предварительно наливают 1-2 мл крепкой соляной кислоты. При положительной пробе на границе слоев образуется в зависимости от количества уроблиниа розовое или красное кольцо. В свежей моче животных преимущественно находится уробилиноген; чтобы он окислился до уробилина, добавляют каплю настойки йода или перосульфата аммония. Для определения уробилина при наличии в моче билирубина освобождают ее от него прибавлением к 5 мл мочи 2 мл 10 % раствора хлористого кальция и нескольких капель аммиака или 2 мл 10 % хлористого бария.

Проба Флоренса дает положительную реакцию у здоровых животных, поэтому ее применяют для выявления полного отсутствия уробилина в моче. Это наблюдается при обтурационной желтухе и при диффузных поражениях почек, когда нарушается концентрационная их функция.

Проба с хлористым барием. К 5-10 мл профильтрованной мочи добавляют 3-5 мл 10 % раствора хлористого бария. Содержимое перемешивают, встряхивают и оставляют на несколько минут до образования осадка. При наличии билирубина в моче образуется осадок желтого цвета.

 

Определение желчных кислот

Проба Штраузбургера. Растворяют в моче немного тростникового сахара, опускают в мочу полоску фильтровальной бумаги, вынимают и высушивают. На полоску наносят каплю концентрированной серной кислоты. Проба положительная, если появляется красное окрашивание.

Проба с серным цветом (Гея). В пробирку наливают мочу и насыпают немного (на кончике ножа) сухого серного цвета. Если он тонет, проба положительная, если нет - отрицательная. Проба положительная при концентрации желчных кислот и солей выше 0,01 %.

Уробилиногеновые, уробилиновые тела и стеркобилиноген обозначают общим термином - уробиленоиды. Уробиленоидурию наблюдают при гепатитах, гепатозе, циррозах, кишечных заболеваниях (энтероколиты), что связано с усиленной реабсорбцией стрекобилиногена слизистой оболочки кишечника.

Билирубин и биливердин в моче выявляются, когда содержание их в крови становится выше почечного порога выделения (более 1 мг %), то есть при повышенном гемолизе эритроцитов, потере способности печеночными клетками улавливать из крови билирубин, нарушении проходимости желчевыводящих путей.

Количество желчных кислот в моче повышается при механической и паренхиматозных желтухах (гепатит, гепатоз). При механической желтухе помимо желчных кислот в моче повышается содержание билирубина, при гемолитической - повышается количество уробилиноидов, а при паренхиматозной — уробиленоидов, билирубина и желчных кислот. Это позволяет отличить один вид желтухи от другого.

Кетоновые тела.

К ним относятся ацетон, ацетоуксусная и бетаоксимасляная кислоты -продукты неполного окисления жиров и отчасти белков, которые образуются главным образом в печени, а расщепляются в тканях.

Проба Лестраде. Реактив Лестраде состоит из нитропруссида натрия -1,0 сульфата аммония - 20,0 карбоната натрия безводного. Реактивы растирают в ступке до получения мелкого однородного порошка, который хранят в закупоренной стеклянной банке в сухом месте. Определение: предметное стекло кладут на лист фильтровальной бумаги, на него помещают небольшое количество (на кончике скальпеля) реактива, капают 2-3 мл мочи. Проба положительная, если реактив окрашивается в течение 1-3 мин от розового до темно-фиолетового цвета.

Проба Ланге. К 5 мл мочи добавляют 5 капель насыщенного раствора нитропруссида натрия и 1 мл ледяной уксусной кислоты. Затем пипеткой осторожно наслаивают 2 мл водного раствора аммиака. При наличии кетоновых тел на границе жидкостей образуется оранжевое или фиолетово-красное кольцо. Иногда оно появляется в течение 2-3 мин.

В моче здоровых животных содержится незначительное количество кетоновых тел, которые качественными пробами не обнаруживаются. Положительная проба (кетонурия) наблюдается при недостатке в рационе углеводов, избытке белков, нарушении сахаро-протеинового отношения (не менее 0,8), при длительном голодании, истощении, тяжелых интоксикациях, хронической атонии преджелудков, заболеваниях с поражением центральной нервной системы (листериоз и кетонурия суягных овец, бешенство), сахарном диабете и др. особое значение имеет определение кетоновых тел при кетозе у коров. Только при кетозе моча имеет запах ацетона, который усиливается при нагревании мочи.

Индикан (индоламинопропионовая кислота) образуется в результате гнилостных процессов в тонком отделе кишечника и распада белков тканей.

Под влиянием гнилостной микрофлоры в тонком кишечнике аминокислота - триптофан - теряет боковую цепь - аминогруппу, образуется индол, который в печени соединяется с серной и глюкороновой кислотами. Индоксилсерная и индоксилглюкороновая кислоты соединяются с калийными солями, в результате чего образуется безвредное для организма вещество -индикан, который почками выделяется из организма.

Проба Яффе. К 2-3 мл профильтрованой мочи добавляют 2-3 мл крепкой соляной кислоты, 2-3 мл хлороформа и 1-2 капли 1% раствора марганцевокислового калия. Пробирку закрывают пробкой и 1 раз переворачивают. При наличии индикана хлороформ окрашивается в синий или фиолетовый цвет, при наличии в моче йодистых солей появляется розовое окрашивание. Добавляют кристаллик гипосульфита - окраска исчезает. Принцип реакции: индикан разрушается соляной кислотой до индоксила, который окисляется марганцевокислым калием до индиго.

Проба Обермейера. К 6 мл мочи добавляют 6 мл хлорного железа (0,2 0,4 г хлорного железа растворяют в 100 мл концентрированной соляной кислоты), через 5 мин. добавляют 1-2 мл хлороформа. Пробирку плотно закрывают пробкой и содержимое перемешивают. В присутствии индикана хлороформ окрашивается в синий цвет. Степень окраски зависит от количества индикана.

В моче здоровых животных индикан находится в незначительном количестве и качественной пробой не обнаруживается. Больше всего его у лошадей. Летом, когда животные питаются травой, индикана содержится меньше, вследствие уменьшения гнилостных процессов в кишечнике.

Различают две формы патологической индиканурии: кишечную и тканевую. Кишечная форма возникает при застое кормовых масс в кишечнике при бродильных и гнилостных процессах (атония, непроходимость, воспаление). Тканевая форма возникает при гнойно-гнилостных процессах в тканях и органах вследствие распада тканевых белков. Инликанурия является ценным диагностическим показателем при ряде заболеваний. Если при симптомокомплексе колик в моче резко увеличивается содержание индикана. это может свидетельствовать о непроходимости кишечника. При гнойных процессах в организме индиканурия сочетается с протеозурией. Увелечение индикана в крови и уменьшение в моче говорит о недостаточности почек и уремии. Увеличение индикана в крови в сопровождении олигоурии свидетельствует о выраженной недостаточности почек.

Пиурия

Появление гноя в моче - симптом многих заболеваний. Моча становится мутной, серо-белого цвета. Гнойный экссудат может появиться в моче при пиелите, гнойном нефрите, гнойном воспалении мочевого пузыря, матки, уретры. Происхождение его можно отдифференцировать следующим образом.

При выделении гнойного экссудата из почек и почечной лоханки при микроскопии осадка находят клетки почечного эпителия и почечной лоханки. Клиническим исследованием не выявляются болевые признаки со стороны мочевого пузыря и уретры. При выделении из мочевого пузыря при цистите мочеиспускание частое с натуживанием, моча выделяется небольшими порциями. При ихорозном и язвенном цистите моча имеет трупный запах. Если имеется уретрит, то моча выделяется свободно, без натуживания, иногда может быть внезапная остановка мочеиспускания.

Эндометрит, вагинит исключают клиническим исследованием этих органов.

 

Микроскопия осадка мочи.

Исследование осадка мочи позволяет дифференцировать заболевания почек, мочеточников, мочевого пузыря и уретры. Осадок получают путем отстаивания или центрифугирования 10-15 мл свежей или консервированной 40 % формальдегидом мочи. Центрифугируют 5-7- мин при 1500-2000 об/мин. Надосадочную жидкость удаляют быстрым опрокидыванием пробирки, размешивают оставшийся осадок. Каплю осадка помещают на предметное стекло и покрывают покровным.

Мочевые осадки разделяют на неорганизованные и организованные. К неорганизованным осадкам мочи относятся кристаллические и аморфные соли, которые выводятся с мочой, как ненужные и вредные для организма (табл. 5); к организованным осадкам мочи - эпителиальные клетки, форменные элементы крови, цилиндры, растительные и животные паразиты (табл. 6).

Таблица№5.