Антикоагулянтами. В качестве антикоагулянтов используют трилон Б (ЭДТА - динатриевая

соль этилендиаминтетрауксусной кислоты) из расчета 0,1мл 10%-ного раствора на 1 мл крови,

гепарин (5 ед. на 1 мл крови) или 6%-ный раствор лимоннокислого натрия (0,1 мл на 1 мл

Крови).

Для предотвращения свертывания крови содержимое пробирки сразу же тщательно

Перемешивают. Стабилизированную кровь до исследования хранят в холодильнике при

температуре 2-4°С и исследуют не позднее, чем через 36 час с момента взятия.

Определение количества лейкоцитов.

Подсчет количества лейкоцитов при помощи электронного счетчика частиц типа

«Целлоскоп», «Культер», «Пикоскел» выполняют в соответствии с наставлением

(инструкцией) по их эксплуатации.

Наряду с указанными счетчиками в настоящее время выпускаются модели

Полуавтоматических счетчиков клеток крови, автоматические анализаторы, позволяющие

Определять от 4 до 20 параметров, то есть проводить развернутый анализ крови, включая

Полную дифференцировку лейкоцитов (нейтрофилы, эозинофилы, базофилы, моноциты и

Лимфоциты), расчетные показатели красной крови и тромбоцитов и т.д.

Подсчет лейкоцитов в счетной камере с сеткой Горяева.

В пробирки Флоринского или в лунки полистироловых пластин разливают по 0,4 мл

жидкости Тюрка (ледяная уксусная кислота - 1,3 мл; 1%-ный водный раствор метиленового

Синего или генциан-виолета - 1 мл; дистиллированная вода до 100 мл). Автоматической

пипеткой или стеклянным капилляром набирают 0,02 мл предварительно перемешанной крови.

Марлевой салфеткой протирают наружную поверхность наконечника пипетки или капилляра

От крови и переносят содержимое на дно пробирки (лунки) с жидкостью Тюрка.

В подготовленную для работы камеру Горяева при помощи пипетки вносят

разведенные в жидкости Тюрка (предварительно пропипетировав) пробы крови от двух

Животных. Для удобства учета проб в верхнюю половину вносят нечетные, а в нижнюю -

Четные пробы. Если в камере будут обнаружены пузырьки воздуха, то ее перезаряжают вновь.

Выждав 1-2 мин, пока клетки осядут, их подсчитывают под микроскопом при увеличении

Х10 или 10х20.

В каждом малом или большом квадрате считают клетки, находящиеся внутри них, а

Также лежащие на левых и нижних линиях и в левых углах квадрата. Клетки, которые не

Входят частично в квадрат со стороны верхней и правой линий, а также в правых углах,

Досчитывают в следующем, рядом лежащем квадрате. Подсчитывают обычно клетки в 100

Больших квадратах.

Для подсчета лейкоцитов применяют следующую формулу:

М*4000*Y

X=------------

  1600

где Х - количество лейкоцитов в 1 мкл крови;

М - количество клеток, подсчитанных в 100 больших квадратах;

Y - степень разведения;

4000 - объем малого квадрата;

Число малых квадратов в 100 подсчитанных больших квадратах.

Пример: В 100 квадратах подсчитано 256 клеток. Степень разведения крови 1:20.

Лейкоцитов в 1 мкл будет:

256*4000*20

X=---------------=12800

   1600

То есть число клеток в 100 квадратах следует умножить на 50, получается общее

количество лейкоцитов в 1 мкл крови 256 * 50 = 12800.

При массовых гематологических исследованиях можно ограничиться подсчетом клеток

В 25 квадратах. С левого верхнего угла сетки (по 4 квадрата в каждом ряду) по диагонали

Вниз направо подсчитывают количество клеток в 20 квадратах. Затем по правой границе сетки

Поднимаются вверх и подсчитывают клетки в 4 квадратах в верхнем правом и в одном левом

Нижнем углах сетки. Число клеток в 25 квадратах следует умножить на 200.

При достаточном навыке врач-гематолог может определять пробы заведомо

Нормальной крови, исходя из общей картины распределения клеток в поле зрения микроскопа,

оцененной визуально (без поклеточного подсчета) при однократном и достаточно быстром пере-

Мещении в вертикальном направлении всей сетки камеры Горяева. В этом случае в ведомости

вместо количества лейкоцитов ставится индекс «N» (норма).

Пробы, вызвавшие даже самое малое подозрение на лейкоцитоз, подлежат подсчету в