Перспективы применения КВЧ-терапии у пациентов пожилого и старческого возраста с хроническим пародонтитом

Высокая распространённость и склонность к прогрессированию заболеваний пародонта, а также многогранное воздействие различных факторов на зубочелюстную систему и организм в целом позволяют отнести эту патологию к числу актуальных проблем современной медицины. Воспаление пародонта у пожилых пациентов усугубляется соматическими заболеваниями, увеличением чувствительности опорно-удерживающего аппарата зуба к возникновению и развитию воспалительных заболеваний пародонта и другими факторами. Значимость патологии пародонта воспалительного характера определяется не только распространенностью и тяжестью заболевания, отрицательным влиянием на организм в целом, но и малой эффективностью проводимого лечения. Медикаментозная терапия является важнейшей составляющей комплексного лечения, однако многостороннее воздействие, оказываемое на организм, не всегда приводит к желаемому результату. Одним из перспективных направлений в профилактике и комплексном лечении пародонтита у пациентов пожилого и старческого возраста является применение КВЧ-терапии. Поскольку одним из основных механизмов КВЧ-терапии является повышение неспецифической резистентности организма, мобилизация иммунных и регуляторных функций, назначение этого метода пациентам с пародонтитом патогенетически оправдано. Цель исследования -выявить молекулярно-биологические аспекты эффективности применения КВЧ терапии и разработать клинические подходы к его применению в комплексном лечении пациентов с хроническим пародонтитом. Было обследовано 165 больных (75 пожилого возраста (60-74 года) и 90 – старческого возраста (75-89 лет), страдающих хроническим генерализованным пародонтитом средней степени тяжести и 30 больных пожилого возраста без признаков патологии пародонта. Все пациенты обследованы по общему стоматологическому статусу в соответствии с рекомендациями В.С.Иванова (1998): индекс гигиены OHI-S, степень деструкции при помощи пародонтального индекса (PI) по A.Russel, папиллярно-маргинально-альвеолярный индекс, степень кровоточивости по H.MullemannиS.Son, глубина пародонтальных карманов, патологическая подвижность зубов. Клиническое состояние тканей пародонта оценивали с помощью пробы Шиллера-Писарева. При объективном обследовании в 100% выявлено частичное отсутствие зубов и наличие несъёмных ортодонтических конструкций, состояние которых было неудовлетворительным. Всем больным были проведены мероприятия профессионально гигиены (удаление зубных отложений, чистка зубов, шлифовка, закрытыйюоретаж и промывание десневых карманов), местное применение нестероидных противовоспалительных препаратов, десенсибилизирующая и антибактериальная терапия в течение 10 дней. Все пациенты были разделены на 7 групп: 1 (n=25) - пациенты пожилого возраста (плацебо-воздействие), 2 (n=25) - пациенты пожилого возраста (КВЧ-воздействие, 1 мкВт/см²), 3 (n=25) - пациенты пожилого возраста (КВЧ-воздействие, 5 мкВт/см²), 4 (n=25) - пациенты старческого возраста (плацебо-воздействие), 5 (n=30) - пациенты старческого возраста (КВЧ-воздействие, 1 мкВт/см²), 6 (n=30) - пациенты старческого возраста (КВЧ-воздействие, 5 мкВт/см²), 7 (n=30) – здоровые (без пародонтита) люди пожилого возраста. Всего проводилось 20 процедур, по 1 в день. КВЧ-терапия проводилась на аппаратеКВЧ-ИК терапии «Триомед», (ООО «Триомед», Санкт-Петербург, Рег.уд.ФСР № 2009/06554 от 17 августа 2012 г.). В качестве объекта исследования выбран буккальный эпителий (БЭ) поскольку он может рассматриваться в качестве доступного биологического материала для прижизненных молекулярно-клеточных исследований [5]. Для исследования БЭ использовали иммунофлуоресцентный метод исследования. Забор БЭ со слизистой оболочки щеки осуществляли не ранее чем через 4 часа после приема пищи. Мазки БЭ готовили с использованием автоматизированной системы системыNovoprep<<NRS>> (Франция). Иммунофлуоресцентную конфокальную микроскопию проводили с использованием первичных антител к TNFα, IL-1, р53 и наборов для иммунофлуоресцентной визуализации щелочной фосфатазы VectorRed. Изучение препаратов проводили в конфокальном микроскопе OlympusFluoView FV1000при х400, морфометрический анализ изображений - в программе «Видеотест-Морфология 5.2». Площадь экспрессии (%) рассчитывали как отношение площади, занимаемой иммунопозитивнымиклетками, к общей площади поля зрения. Для оценки межгрупповых различий применяли t-критерий Стьюдента. Статистическую обработку результатов выполняли в пpогpаммеStatistica 7.0.

Результаты исследования

В 1 группе площадь экспрессии TNFα составила 5,04±0,26%, в 4 группе - 5,16±0,29%. После облучения 1мкВт/см² экспрессия TNFα в БЭ во 2 и 3 группах снижалась на 34% и 14% соответственно по сравнению с группами 1 и 4 (рис. 47). При этом увеличение интенсивности воздействия до 5 мкВт/см² приводило к еще более сильному уменьшению экспрессии TNFα в БЭ только у лиц старческого возраста - до 22% (4,07±0,1%) (рис. 47А). При изучении влияния КВЧ-излучения на уровень экспрессии IL-1, выявлено существенное снижение исследуемой сигнальной молекулы практически до уровня группы здоровых людей пожилого возраста при мощности облучения 5 мкВт/см² (рис. 47Б, рис. 48). Так площадь экспрессии у лиц пожилого возраста (контрольная группа 1, «плацебо-воздействие») составила 2,11±0,14%, а у лиц старческого возраста 3,24±0,22%. У лиц старческого возраста так же наблюдалось уменьшение интенсивности экспрессии IL-1: при мощности излучения 5мкВт/см² значение площади экспрессии составило 0.54±0.09% и уменьшилось на 84%. При этом при мощности излучения 1 мкВт/см² так же наблюдалось уменьшение интенсивности экспрессии IL-1, но на чуть меньшее значение - на 49% и 71% по сравнению со значением в контрольной группе.

А

 

 

Б

В

Рис. 47. Влияние излучения миллиметрового диапазона на экспрессию фактора некроза опухоли TNFα (А), интерлейкина – 1 (Б) и маркера апоптоза р53 (В) буккальном эпителии человека.

А Б

Рис. 48. Иммунофлуоресцентная конфокальная микроскопия, х400. Для визуализации экспрессии IL-1 использовали вторичные антитела, конъюгированные с AlexaFluor 488 (зеленая флуоресценция). Для окраски ядер использовали краситель Hoechst 33342 (голубая флуоресценция). А – 1 группа, Б – 3 группа.

 

В 1 группе площадь экспрессии р53 составила 1,99±0,12%, у людей старческого возраста 2,11±0,24% (группа 4). После облучения 1мкВт/см² экспрессия р53 в БЭ во 2 и 3 группах достоверно снижалась на 52% и 42% соответственно и составила 0,95±0,08% и 1,23±0,12 (рис. 46В) по сравнению с группой «плацебо-воздействие» (группы 1 и 4 соответственно). При этом увеличение интенсивности воздействия до 5 мкВт/см² приводило к еще более сильному уменьшению экспрессии р53 в культуре клеток БЭ только лиц пожилого возраста - до 64% (0,73±0,06%), в то же время уровень экспрессии р53 у лиц старческого возраста практически не изменялся (рис. 48Б).

 

Заключение

Экспрессия TNF-α, индуктора острой фазы воспаления пародонта, у пожилых людей без патологии практически не регистрировалась. При этом у лиц пожилого и старческого возраста с хроническим пародонтитом этот показатель возрастал более чем в 10 раз, а КВЧ-излучение снижало этот показатель в 1,6 раза в пожилом и в 1,25 раза – в старческом возрасте.В норме у лиц пожилого возраста экспрессия IL-1 в БЭ находилась на довольно низком уровне. С одной стороны, синтез этих цитокинов необходим для поддержания барьерной функции иммунной системы, однако повышение их синтеза указывает на развитие хронического или острого воспаления. При хроническомгенерализованном пародонтите экспрессия IL-1 у лиц пожилого и старческого возраста повышалась в 6 раз. При этом КВЧ-излучение способствовало снижению этого показателя. Хронической пародонтит у пожилых приводил к повышению уровня р53-зависимого апоптоза, а КВЧ-излучение способствовало снижению уровня апоптоза у лиц пожилого и старческого возраста – в 1,5-2 раза.Применение КВЧ-терапии в комплексном лечении хронического пародонтита у людей старшего возраста способствует снижению выраженности воспаления и апоптоза, что свидетельствует о возможности рекомендации данного физического воздействия для повышения эффективности терапии данной патологии.

Библиографический список

1. Линькова Н.С., Горшкова О.П., Шуваева В.Н., Дворецкий Д.П. Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения красного спектра на некоторые свойства эритроцитов крыс Вистар// Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2008. - Т. 145, №1. -С. 12-14.

2. Медведев Д.С., Молодцова И.Д., Мурсалов С.У., Линькова Н.С., Мальцев Д.С.,Лапотников А.В. Применение КВЧ-терапии в лечении пациентов старших возрастных групп с сердечно-сосудистыми заболеваниями: клеточно-молекулярные и биофизические аспекты: учебноепособие / ЧОУВПО СПбМСИ, 2015. – 56 с.

3. Молодцова И.Д., Медведев Д.С., Полякова В.О., Линькова Н.С., Гурко Г.И. Влияние электромагнитного излучения миллиметрового диапазона на синтез оксида азота при старении эндотелиясосудов invitro // Успехи геронтологии. – 2015.- Т.28, №1. – С. 68-71.

4. Прикладная лазерная медицина/Под редакцией Х.-П. Берлиена, Г.Й. Мюллера//Учебное и справочное пособие: М.: Интерэксперт, 1997. 343 с.

5. Севостьянова Н.Н., Трофимов А.В., Линькова Н.С., Полякова В.О., Кветной И.М. Индуцированное старение тимуса: радиационная модель и перспективы применения низкоинтенсивного лазерного излучения // Успехи геронтол. - 2010. - Т. 23, N 4. С.547-553.

6. ШуваеваВ.Н., КостылевА.В., ЛиньковаН.С., ГоршковаО.П. ВлияниеHe-Neлазерногоизлучениянизкоймощностинаадренореактивность пиальных артериальных сосудов и деформируемость эритроцитов у крыс // Регионарное кровообращение и микроциркуляция. – 2008. – Т. 7, №1 (25). - С. 31-37.

7. Янова О.А., Медведев Д.С., Линькова Н.С., Иорданишвили А.К. Перспективы применения КВЧ-терапии у пациентов пожилого и старческого возраста с хроническим пародонтитом// Клиническая стоматология. – 2015. – № 3. - С. 50-51.