Основные клинические показания для обследования на хламидийную инфекцию

Пациенты	Показания
Мужчины	· - уретрит; · - дизурия; · - проктит и/или проктоколит; · - эпидидимит.
Женщины	· - выделения из мочеполовых органов; · - эндоцервицит, эрозия шейки матки; · - ВЗОМТ; · - бесплодие; · - осложнения беременности (невынашивание).
Новорожденные	· - атипичная пневмония; · - конъюнктивит. ·
Другие показания	· - половой контакт с больным хламидийной инфекцией; · - экстрагенитальные образцы (фарингеальные, ректальные) должны быть исследованы, если в анамнезе имеется указание на соответствующий тип сексуального контакта; · - обследование на другие ИППП.

 

В направлении пациента с подозрением на урогенитальную хламидийную инфекцию на лабораторное исследование обязательно указываются:

· пол и возраст пациента;

· анатомическая область взятия материала;

· дата взятия материала;

· клинические проявления;

· предварительный диагноз;

· выбранный метод лабораторной диагностики.

Безопасность персонала. Безопасность лабораторных работников при осуществлении лабораторной диагностики урогенитальной хламидийной инфекции обеспечивается соблюдением правил работы с потенциально инфекционным клиническим материалом (использование перчаток, ламинарного бокса, дезинфицирующих средств, УФ облучения и т.д.).Сбор и обработку клинического материала для выявления или выделения Chlamydia trachomatis проводят, соблюдая режим работы для бактериологических лабораторий.

Необходимо исключать возможность загрязнения исследуемым материалом рук лабораторных работников, его попадания в глаза, нос, рот.

 

Взятие образцов, хранение и транспортировка материала для

исследования

 

Результаты постановки тестов, их чувствительность и специфичность, напрямую зависят от качества получения материала. Самый хороший тест может дать неудовлетворительные результаты при низком качестве образца клинического материала. Поэтому врач, осуществляющий взятие материала у лиц с подозрением на наличие урогенитальной хламидийной инфекции, должен гарантировать:

• качественное взятие материала – материал для исследования на хламидии обязательно должен содержать эпителиальные клетки; получение для исследования на хламидии только экссудата недопустимо!
• специальную маркировку материала с указанием в направлении и медицинской карте пациента его идентификационных данных, пола, возраста, вида материала и анатомической области, откуда он получен;
• избегать задержки при транспортировке материала;

· транспортировку осуществлять при адекватном температурном режиме для каждого метода.

Внимание! Лаборатория должна участвовать в вопросах выбора области получения образца, выборе инструментов для взятия и условий транспортировки.

Инструменты для взятия материала:

· ватные/дакроновые тампоны;

· универсальный зонд (с синтетическим ворсом, предназначенный для взятия урогенитальных образцов);

· специальные щеточки;

· ватный тампон для удаления выделений из цервикального канала;

· контейнер для сбора мочи или эякулята.

 

Тампоны для взятия материала могут содержать остатки волокон, стержня и клея, которые могут быть токсичными для культуры клеток и подавлять рост C. trachomatis. Пластмассовые или металлические стержни лучше, чем деревянные. Дакрон, искусственный шелк и волокна полиэтилентерефталата предпочтительнее альгината кальция. Цитощетки на проволочном или пластмассовом стержне или универсальный зонд являются оптимальными инструментами для получения материала из цервикального канала.

Внимание! Использование щеток во время беременности противопоказано.

Качество результата лабораторного исследования во многом зависит от физиологического состояния пациента на момент взятия клинического материала. Наиболее информативным может быть материал, если он получен при следующих условиях:

• материал взят при наличии клинических признаков заболевания;
• пациент не использовал местного лечения минимум в течение последних 48-72 часов;
• пациент не использовал общего лечения антибактериальными препаратами в течение 7 – 8 суток до обследования, т.к. проведение системной терапии может значительно повлиять на результат исследования и снизить его диагностическую ценность;
• у женщин при исследовании материалов из урогенитального тракта взятие образцов желательно проводить на 2-3 день менструального цикла если заболевание не имеет явных проявлений) или в дни, когда нет кровянистых выделений (при обострении процесса);

· взятие образцов из уретры у мужчин и женщин необходимо проводить при условии задержки мочеиспускания не менее 2 часов;

· при обследовании пациента необходимо брать несколько клинических образцов для различных лабораторных исследований.

Если нет возможности придерживаться упомянутых условий, то следует помнить, что это может повлиять на качество исследования и исказить интерпретацию результатов.

 

Важно помнить, что:

Для диагностики молекулярно-биологическими методами, основанными на амплификации нуклеиновых кислот (МАНК): тампон помещается в транспортную среду, предоставленную производителем. Если производитель не предоставил транспортной среды, может быть использована среда 2SP с добавлением антибиотиков, таких как ванкомицин, гентамицин или амфотерицин В. Исследования показали, что при транспортировке тампона в лабораторию в сухом виде результаты диагностических тестов аналогичны результатам, полученным при транспортировке материала в транспортной среде (14, 15).

Для исследования методом прямой иммунофлюоресценции: тампон прокатывается по поверхности предметного стекла. Предпочтительнее использовать предметные стекла с лунками посередине. На стекле должен быть тонкий слой клинического материала.

Для культурального исследования: материал собирается в специальные пробирки с транспортной средой (например, 2SP с добавлением антибиотиков, таких как ванкомицин, гентамицин или амфотерицин В). Тампон помещается в пробирку, обламывается о край пробирки и оставляется внутри. Если тампон сделан из нетоксичных материалов или не содержит веществ-ингибиторов, то такой тампон можно также оставлять в пробирке для последующего анализа МАНК (если он запланирован).

Способы взятия образцов клинического материала в зависимости от анатомической области или вида материала приведены в таблице 4.

Таблица 4.

Способы взятия клинического материала для диагностики урогенитальной

Хламидийной инфекции

 

Анатоми-ческая область или вид материала	Способ взятия материала	Комментарии
Уретра у мужчин	· ввести тампон в уретру (на 3-4 см); · тампон слегка повращать в уретре в течение нескольких секунд.	· детям препубертатного возраста брать материал из уретры не рекомендуется; · отделяемое берется исключительно из наружного отверстия мочеиспуска-тельного канала маленьким тампоном или собирается моча для исследова-ния методами определения ДНК/РНК.
Уретра у женщин	· при наличии большого количества выделений наруж-ное отверстие очистить с помощью марлевого тампона; · ввести тампон в уретру (на 1-2 см); · тампон слегка повращать в уретре в течение нескольких секунд.	· детям препубертатного возраста брать материал из уретры не рекомендуется; · отделяемое берется исключительно из наружного отверстия мочеиспускательного канала маленьким тампоном или собира-ется моча для исследования методами определения ДНК/РНК.
Эндоцер-викс	· тщательно очистить наруж-ное отверстие цервикального канала от вагинальных выделе-ний при помощи большого ватного тампона; · очистить наружное отвер-стие цервикального канала от вагинальных выделений сте-рильным ватным тампоном или большим марлевым тампоном; · ввести тампон в цервикаль-ный канал на 1-2 см, повращать его в цервикальном канале в течение 15 секунд и вынуть.	· цервикальные мазки не берутся у дево-чек препубертатного возраста. При подо-зрении на хламидийную инфекцию в этом возрасте мазки берутся из влагалища через естественное отверстие гименального коль-ца, а также собирается моча для исследо-вания; · беременные женщины могут проходить обследование на хламидии на любом сроке беременности. Взятие материала проводится из уретры и цервикального канала. У родильниц материал берется из уретры, на 3 день после родов – из цервикального канала. У женщин после экстирпации матки материал на C. trachomatis берется из уретры и влагалища.
Влагалище (например, при взятии образца са- мим паци-ентом*, и у девочек препубер-татного возраста)	· зеркала не используются; · тампон осторожно вводится во влагалище, и материал берется с задней стенки влагалища;
Конъюнктива	· при наличии гнойного отде-ляемого оно удаляется стериль-ным ватным тампоном; · отводится нижнее веко и тампон проводится по поверх-ности конъюнктивы нижнего века по направлению к внутреннему углу глаза.	· процедура иногда бывает болезненной, поэтому можно применять местные анестетики.
Прямая кишка	· тампон вводят на глубину 2 – 3 см в канал и получают материал со всех стенок прямой кишки по направлению изнутри кнаружи, а затем круговыми движениями	Клинический материал из прямой кишки берется: · у пациентов, имевших анальный секс или при подозрении на него; · при проявлениях (субъективных и объек-тивных) проктита, в том числе при наличии слизисто-гнойных выделений из прямой кишки; Материал для исследования из прямой кишки получают с помощью: · ректоскопа под визуальным контролем (более эффективен), · ректальных зеркал, · «слепым» методом – из анального канала. · При наличии на тампоне видимых каловых масс тампон выбрасывается и проводится повторная попытка получения материала. При использовании ректоскопа риск контаминации каловыми массами ниже и сбор материала производится под контролем глаза.
Носоглотка	· тампоном проводят по задней стенке глотки выше нижнего края мягкого неба, а также по поверхности миндалин	· Фарингеальные образцы берутся у пациентов, имевших оро-генитальный контакт или при подозрении на него.
Моча	· Производится забор первой порции мочи пациента (первые 10 – 15 мл) после задержки мочеиспускания не менее 2 часов	· Образцы мочи могут исследоваться при необходимости обследования пациентов неинвазивными методами (например, детей) с применением технологии МАНК.

· МАНК для диагностики урогенитальной хламидийной и гонококковой инфекции при исследовании влагалищных образцов, полученных самими пациентами, высоко чувствительны и специфичны, а сама процедура получения материала хорошо воспринимается пациентами (16, 17, 18, 19)

 

Хламидии являются микроорганизмами, очень требовательными к соблюдению надлежащих условий их транспортировки (состав транспортной среды, температура, при которой осуществляется доставка и хранение материала, длительность транспортировки и хранения), поэтому условия транспортировки должны соблюдаться очень точно.В случае несоблюдения правил взятия и условий доставки биологического материала (разбитые, не промаркированные, склеенные друг с другом стекла, отсутствие материала на стекле) образцы не подлежат исследованию; об этом сообщается врачу, направившему биологический материал на исследование; разбитые стекла подлежат уничтожению.При взятии и транспортировке материала для проведения молекулярно-биологических и иммунологических методов исследования на C. trachomatis и использовании рекомендуемой для этого транспортной среды необходимо четко соблюдать инструкцию производителяиспользуемой тест-системы. Рекомендации по транспортировке и хранению образцов, используемых для проведения разных диагностических методов для выявления C. trachomatis приведены в таблице 5.

Таблица 5.

Рекомендации по транспортировке и хранению образцов, используемых для основных методов диагностики урогенитальной хламидийной инфекции

Метод исследования	Условия транспортировки и хранения образцов
Молекулярно-биологический (методы амплификации нуклеиновых кислот - МАНК)	· Образцы могут транспортироваться и храниться в транспортной среде, предоставленной производителем, в других случаях (для большинства тестов) - в среде 2 SP (с добавлением антибиотиков) или сухими (14, 15); · в других случаях во время транспортировки материала в лабораторию образцы должны находиться в сумке-холодильнике при +6±2^оC. Образцы мочи могут храниться при +6±2^оC в течение одной недели и их не надо замораживать.
Иммунологический: прямая иммунофлюоресценция (ПИФ)	· Стекла с мазками клинического материала для ПИФ, взятые врачом - клиницистом, необходимо в тот же день доставить в лабораторию; · мазок может быть фиксирован в течение 1-2 минут холодным ацетоном на месте взятия материала, в этом случае его можно хранить при +6±2^оC в течение 3 дней, при – 20^оС – в течение 1 месяца.
Иммунологический: иммуно- ферментный анализ для определения антигена хламидий (ИФА)	· Материал должен собираться в специальную транспортную среду, которая до момента отправки в лабораторию хранится при +4^оC - +8^оC. Если время транспортировки соскобного материала с момента его взятия до момента доставки в лабораторию составляет более 2-х часов, то пробирку необходимо заморозить при –20^оC.
Культуральный (культура клеток)	· До транспортировки материал следует поместить в специальную транспортную среду (например, 2SP с добавлением антибиотиков) и хранить в холодильнике при +6±2^оC и в течение 24 часов доставить в лабораторию в сумке-холодильнике; · исследование требует сохранения живых хламидий, и изменение температуры при транспортировке может быть решающим для получения достоверного результата; · в лаборатории пробы хранятся при +6±2^оC в течение 24 часов. В случае необходимости выделенную культуру C. trachomatis можно хранить в среде 2SP в низкотемпературной морозильной камере (-70^0С).