Тема: Возбудители холеры, ботулизма. Патогенные хеликобактерии

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:

1. Знать теоретический материал по теме занятия.

2. Освоить лабораторную диагностику хеликобактерной инфекции методом ИФА и ПЦР.

3. Промикроскопировать демонстрационный препарат и правильно его зарисовать.

4. Изучить биопрепараты по теме занятия.

ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:

1. Возбудители ботулизма: таксономия, свойства, резистентность.

2. Факторы патогенности, механизм действия ботулотоксинов, патогенез ботулизма.

3. Лабораторная диагностика ботулизма. Профилактика и лечение.

4. Вибрионы – возбудители холеры, свойства, резистентность.

5. Факторы патогенности холерных вибрионов. Механизм действия токсина, генетический контроль токсинообразования. Патогенез холеры.

6. Лабораторная диагностика холеры. Профилактика и лечение.

7. Хеликобактерии: таксономия, свойства, факторы патогенности, роль в развитии язвенной болезни и рака желудка.

8. Лабораторная диагностика хеликобактерной инфекции. Профилактика и лечение.

9. Биопрепараты: ботулинические антитоксические сыворотки, агглютинирующая холерная О₁-сыворотка, холерная вакцина, холерные фаги «С» и Эль-Тор.

 

ЛИТЕРАТУРА:

1. Лекционный материал.

2. Учебник «Медицинская микробиология» под редакцией проф. Д.К. Новикова, проф. И.И. Генералова, 2003, стр. 186-188, 237-243, 281-282.

3. «Практикум по медицинской микробиологии» С.А.Павлович, 1993, стр. 127-131, 143-145.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:

 

1. Лабораторная диагностика хеликобактерной инфекции:

а) Оценка результатов ПЦР;

б) Постановка ИФА для серологической диагностики инфекции H. pylori:

Реагенты

1) Иммуносорбент – планшет полистироловый с адсорбированными на поверхности лунок антигеном CagA Helicobacter pylori.

2) Исследуемые сыворотки.

3) Положительный контрольный образец сыворотки (К+), содержащий антитела к антигену CagA Helicobacter pylori.

4) Отрицательный контрольный образец сыворотки (К–), не содержащий специфических антител.

5) Конъюгат – антитела против IgG человека, меченые пероксидазой хрена.

6) Субстратный буферный раствор, содержащий пероксид водорода.

7) Раствор хромогена тетраметилбензидина (ТМБ).

8) Стоп-реагент – раствор 2M серной кислоты.

 

Таблица. Результаты серологической диагностики хеликобактерной инфекции методом ИФА.

 

A

K1(+)

K2(+)

B

K1(-)

K2(-)

C

D

Заключение

 

2. Микроскопия и зарисовка препарата

ПРЕПАРАТ №1

Vibrio cholerae

окраска по Граму

 

3. Демонстрация роста вибрионов на плотной питательной среде.

ЗАНЯТИЕ №6

Тема: Возбудители бактериальных воздушно-капельных инфекций. Менингококки. Коринебактерии дифтерии, бордетеллы

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:

1. Знать теоретический материал по теме занятия.

2. Освоить реакцию преципитации для выявления менингококкового антигена в ликворе.

3. Научиться распознавать менингококки, коринебактерии и бордетеллы в демонстрационных препаратах.

4. Научиться оценивать ПЦР для определения токсигенности возбудителя дифтерии.

5. Промикроскопировать демонстрационные препараты и правильно их зарисовать.

6. Изучить биопрепараты по теме занятия.

 

ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:

1. Менингококки, таксономия, свойства. Серогруппы менингококков. Резистентность.

2. Факторы патогенности менингококков. Патогенез и виды менингококковых инфекций. Иммунитет.

3. Материал для исследования, забор и транспортировка. Методы диагностики менингита, менингококцемии, бактерионосительства. Профилактика и лечение менингококковых инфекций.

4. Возбудители дифтерии: таксономия, свойства, резистентность.

5. Факторы патогенности коринебактерий дифтерии, характеристика токсина, механизм его действия. Генетический контроль образования токсина. Способы определения токсигенности коринебактерий дифтерии.

6. Патогенез и клинические формы дифтерии. Иммунитет. Методы его выявления.

7. Лабораторная диагностика, профилактика и лечение дифтерии.

8. Бордетеллы: таксономия, свойства, факторы патогенности, роль в патологии человека.

9. Лабораторная диагностика, профилактика и лечение коклюша.

10. Биопрепараты: менингококковая химическая вакцина; преципитирующая менингококковая сыворотка; АКДС; агглютинирующие коклюшная и паракоклюшная сыворотка; противодифтерийная антитоксическая сыворотка; дифтерийный анатоксин.

 

ЛИТЕРАТУРА:

1. Лекционный материал.

2. Учебник «Медицинская микробиология» под редакцией проф. Д.К. Новикова, проф. И.И. Генералова, 2003, стр. 168-170, 228-231, 248-253.

3. «Практикум по медицинской микробиологии» С.А. Павлович, 1993, стр. 107-109, 138-140, 150-154.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:

1. Постановка реакции кольцепреципитации для выявления менингококкового антигена в ликворе.

Ингредиенты: 1. Ликвор

2. Сыворотка преципитирующая (менингококковая)

3. Сыворотка преципитирующая (пневмококковая)

В пробирку № 1 внести пипеткой 1 мл сыворотки преципитирующей менингококковой, осторожно по стенке наслоить такое же количество ликвора. В пробирку №2 внести сыворотку преципитирующую пневмококковую и также наслоить ликвор. Полученный результат зарисовать в альбоме и сделать заключение о наличии специфического антигена в ликворе.

2. Оценка роста менингококков и бордетелл на питательных средах.

 

3. Микроскопия и зарисовка препаратов:

ПРЕПАРАТ №1 ПРЕПАРАТ №2

Corynebacterium diphteriae Bordetella pertussis

окраска по Нейссеру окраска по Граму

ПРЕПАРАТ №3

Neisseria meningitidis в гное

окраска метиленовым синим

 

4. Оценка результатов ПЦР для выявления токсигенности возбудителя дифтерии.

ЗАНЯТИЕ №7

ТЕМА: Возбудители туберкулеза, лепры. Патогенные микоплазмы

 

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:

1. Знать теоретический материал по теме занятия.

2. Научиться в мазках выявлять возбудителей туберкулеза.

3. Изучить морфологию туберкулезной палочки в конфокальном микроскопе.

4. Изучить характер роста туберкулезных бактерий на среде Финна.

5. Научиться оценивать ПЦР для серодиагностики микоплазменной инфекции.

6. Изучить биопрепараты по теме занятия.

ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:

1. Микобактерии: таксономия. Возбудители туберкулеза, свойства, резистентность.

2. Факторы патогенности микобактерий туберкулеза, механизм их действия, патогенез туберкулеза, иммунитет.

3. Лабораторная диагностика туберкулеза. Дифференциация возбудителей туберкулеза, микобактериозов и кислоустойчивых сапрофитов.

4. Профилактика проказы: свойства, роль в патологии человека.

5. Лабораторная диагностика проказы, профилактика и лечение.

6. Микоплазмы: таксономия, свойства. Виды микоплазм – возбудителей респираторных инфекций.

7. Лабораторная диагностика микоплазменной пневмонии.

8. Биопрепараты: вакцина БЦЖ, туберкулин ППД.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Лекционный материал.

2. Учебник «Медицинская микробиология» под редакцией проф. Д.К. Новикова, проф. И.И. Генералова, 2003, стр. 253-260, 297-300.

3. «Практикум по медицинской микробиологии» С.А. Павлович, 1993, стр. 154-158.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:

1. Постановка ИФА для серологической диагностики микоплазменной пневмонии: определение АТ класса IgМ к специфическим антигенам микоплазм.

Реагенты

1) Иммуносорбент – планшет полистироловый с адсорбированными антигенами микоплазм.

2) Исследуемые сыворотки.

3) Положительный контрольный образец сыворотки (К+), содержащий антитела к микоплазменным АГ.

4) Отрицательный контрольный образец сыворотки (К–), не содержащий антител к микоплазменным АГ.

5) Конъюгат – антитела против IgМ человека, меченые пероксидазой хрена.

6) Субстратный буферный раствор, содержащий пероксид водорода.

7) Раствор хромогена тетраметилбензидина (ТМБ).

8) Стоп-реагент – раствор 2M серной кислоты.

 

Таблица. Результаты серологической диагностики микоплазменной пневмонии методом ИФА.

 

A

K1(+)

K2(+)

B

K1(-)

K2(-)

C

D

Заключение

 

2. Микроскопия и зарисовка мазков:

ПРЕПАРАТ №2

M.tuberculоsis в мокроте

окраска по Циль-Нильсену

3. Конфокальная микроскопия возбудителей туберкулеза.

 

ЗАНЯТИЕ №8