Культивирование и репродукция

_____________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Эпидемиология

Источник инфекции____________________________________________________________________

Механизм передачи______________________________________________________________________

Пути передачи___________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Факторы передачи___________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Патогенез

Входные ворота________________________________________________________________________

Инкубационный период______________________________________________________________________

Основные фазы патогенеза___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Назовите основные клинические формы полиомиелита:

____________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Лабораторная диагностика _____________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Неспецифическая профилактика (мероприятия) ____________________________________________________________________________________________________________________________________________

Специфическая профилактика (препараты) ______________________________________________________________________________________________________________________________________________

ГЕПАТИТ А

Таксономическое положениевозбудителя

Семейство__________________________________________________________________

Род________________________________________________________________________

Вид________________________________________________________________________

Структура вириона __________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Антигенная структура ______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Культивирование и репродукция

_____________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Эпидемиология

Источник инфекции____________________________________________________________________

Механизм передачи______________________________________________________________________

Пути передачи___________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Факторы передачи___________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Патогенез

Входные ворота________________________________________________________________________

Инкубационный период______________________________________________________________________

Основные фазы патогенеза___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

 

Основные клинические проявления в зависимости от возраста:

____________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Лабораторная диагностика _____________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Неспецифическая профилактика (мероприятия) ____________________________________________________________________________________________________________________________________________

Специфическая профилактика (препараты) ______________________________________________________________________________________________________________________________________________

ГЕПАТИТ Е

Таксономическое положениевозбудителя

Семейство__________________________________________________________________

Род________________________________________________________________________

Вид________________________________________________________________________

Структура вириона __________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Антигенная структура ______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Культивирование и репродукция

_____________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Эпидемиология

Источник инфекции____________________________________________________________________

Механизм передачи______________________________________________________________________

Пути передачи___________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Факторы передачи___________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Патогенез

Входные ворота________________________________________________________________________

Инкубационный период______________________________________________________________________

Основные фазы патогенеза___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Особенности течения гепатита Е:

____________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Лабораторная диагностика _____________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Неспецифическая профилактика (мероприятия) ____________________________________________________________________________________________________________________________________________

Специфическая профилактика (препараты) ______________________________________________________________________________________________________________________________________________

Подпись преподавателя_________________________________________________________

СИТУАЦИОННЫЕ ЗАДАЧИ

1. В клинику поступил больной с предварительным диагнозом «По­лиомиелит?». В процессе лечения его обследовали на 5-й и 30-й дни болезни для выявления специфических антител с помо­щью цветной пробы. Результаты исследования: на 5-й день - по­ложительная цветная проба в разведении сыворотки 1/10, на 30-й— 1/80. Оценить диагностическую ценность полученного результата.

 

2. В диагностическое отделение инфекционной боль­ницы поступило несколько детей в возрасте 10-12 лет из приго­родного спортивного лагеря. По клиническим симптомам был поставлен предварительный диагноз «Гепатит А?». Какой ис­следуемый материал необходимо взять для лабораторного исследования? Какие методы необходимо использовать для диагно­стики заболевания?

 

Пример решения задачи

В диагностическое отделение инфекционной больницы поступили двое больных с желтухой. Возникло подозре­ние на гепатит А. В целях подтверждения диагноза в лабораторию отправлена сыворотка крови больных для проведения иммуноферментного анализа с использованием диагностикума вируса гепати­та А. Оценить результат, записать протокол, сделать выводы.

Выделяется для учета результатов исследования полистироловый планшет с результатами ИФА.

Вопросы 1. Какую тест-систему взяли для исследования? 2. Зарисовать схему реак­ции (ИФА) в данном исследовании. 3. У кого из больных под­твержден диагноз гепатита А и почему?

Решение. Студент учитывает данные ему результаты иссле­дований, заполняет протокол и делает выводы:

1. Для исследования взята тест-система для ИФА с адсорбиро­ванными на твердой фазе антигенами (HAV-АГ) вируса гепатита А,

где 1 - твердая фаза (дно лунки планшета); 2 - адсорбированный на твердой фазе АГ вируса (HAV-антиген); 3 - сыворотка крови больного; 4 - антиглобулиновая сыворотка, меченная ферментом пероксидазой; 5, 6 - субстрат к ферменту и инди­катор на продукты расщепления субстрата.

3. При проведении лабораторного исследования подтвер­дился диагноз гепатита А у больного А., так как результат иммуноферментного анализа у него положительный, т. е. выявле­ны AT против HAV-антигена вируса.

ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ СПРАВКА

Эпидемиология энтеровирусных инфекций

Для энтеровирусных инфекций характерен фекально-оральный механизм передачи инфекции. Источником инфекции является больной человек, преимущественно дети, в основном, со стертыми субклиническими и безжелтушными формами болезни. Вирус выделяется с фекалиями в конце инкубационного и в течение преджелтушного периодов. С момента появления желтухи, заразность больного резко снижается. Заражение происходит через пищу, воду, предметы обихода, загрязненные фекалиями и содержащими вирус. Вирусы Коксаки и ECHO могут распространяться капельным путём. Мухи и тараканы, которые в естественных условиях соприкасаются с человеческими испражнениями, могут служить механическими переносчиками инфекции. Энтеровирусы регулярно обнаруживаются в сточных водах, даже прошедших очистку. Не исключен парентеральный механизм передачи инфекции. Заболевание регистрируется чаще в осенне-зимний период, преимущественно среди детей в организованных коллективах, с подъемами через 3-5 лет.

Гепатитом Е, в отличие от гепатита А, преимущественно поражаются люди в возрасте 15-29лет. Заболеваемость среди детей составляет около 30%. Инкубационный период составляет 10-60 дней. Гепатит Е часто протекает в виде хронической инфекции с высоким процентом летального исхода у беременных (до 20% и более). Вирусемия при этом гепатите сохраняется длительное время — до 6 мес. Для данной инфекции характерна эндемичность, заболевания возникают в районах с жарким климатом и недостаточным водоснабжением (Азия, Африка, Туркменистан и др.). При гепатите Е типичен взрывной характер эпидемий, связанных с определенными источниками водоснабжения.

Особенности лабораторной диагностики энтеровирусных инфекций

Лабораторная диагностика проводится путем выделения вируса из организма больного, а также по нарастанию титра вирусспецифических антител. Вирусы выделяют из фекалий, крови, смывов носоглотки и другого материала, в зависимости от периода заболевания одновременно на первичных и перевиваемых культурах клеток, а также путем заражения мышей сосунков. Для идентификации вируса применяется реакция нейтрализации.

Выделение энтеровирусов из организма больного, особенно из фекальных масс, не является абсолютным основанием для постановки диагноза, учитывая распространение бессимптомного носительства. Поэтому необходима серологическая диагностика с использованием парных сывороток, взятых в первые дни и на 2-3 неделе после начала заболевания. В положительном случае отмечается нарастание титра Ат во второй сыворотке, не менее чем в 4 раза в реакциях нейтрализации, РСК, РТГА.

Исследуемый материал: испражнения, отделяемое носоглотки, СМЖ, кровь и др.

Заражение однодневных мышей-сосунков

Индикация: клинические симптомы, патоморфологические исследования Идентификация: РН, РТГА

Серодиагностика: сыворотка для обнаружения антител – РН, РСК, РП, РТГА (при заболеваниях, вызываемых вирусами Коксаки и ECHO

Индикация по ЦПД Идентификация: РН по методу цветной пробы с сыворотками против полиовирусов; РН в культуре клеток с поливалентными сыворотками Коксаки и ECHO

Заражение первичных и перевиваемых культур клеток человека и обезьян, Hela, Hep-2 и др.

Лабораторная диагностика гепатитов А и Е

Испражнения, моча, кровь, биопсия

ИЭМ, ИФА, РИА, ПЦР – для выявления специфических антигенов

Серодиагностика: сыворотка для обнаружения антител (IgM, G) – ИФА, РИА

Маркеры гепатитов А и Е

Возбуди-тель	Маркеры	Диагностическое значение
Вирус HA	Антиген HAV Ag     анти-HAVIgM     анти-HAVIgG	Определяется в фекалиях уже через 10–20 дней после заражения и обычно сохраняется там короткое время (не более 1–2 недель).   Появляются в сыворотке в начале желтушного периода и сохраняются до 6 месяцев. Таким образом, выявление антител анти-НAV IgM указывает на острое заболевание вирусным гепатитом А.   Появляются в начальной стадии инфекции и сохраняются в крови всю жизнь.Обнаружение в крови антител анти-HAV IgG при отсутствии анти-HAV IgM указывает на перенесенный в прошлом вирусный гепатит А.
Вирус HE	антигеныВГЕ   анти-HEVIgM     анти-HEVIgG	Определяют методом иммуноэлектронной микроскопии, ПЦР, иммунофлюоресцирующих антител (МФА) в фекалиях больных   определяются с высокой частотой в сыворотках больных ГЕ в острой стадии заболевания и в период ранней реконвалесценции;     свидетельствуют о перенесенной в прошлом ГЕ - инфекции.

Ротавирусы

Лабораторная диагностика заболеваний, вызванных данным возбудителем, проводится путем выявления вируса в фекальных массах больных в первую неделю заболевания, с одной стороны, и регистрация нарастания титра специфических антител в парных сыворотках - с другой. Ротавирусы обнаруживаются в фекальных массах в 100% случаев в первые дни заболевания с помощью иммунной и электронной микроскопии. Вирусный антиген выявляют в фекалиях иммуноферментным и радиоиммунным методами, в реакциях иммунофлюоресценции, а также с помощью нуклеиновых зондов. Вирусы могут быть выделены в культурах клеток в первые дни болезни. Серологическую диагностику проводят в реакциях нейтрализации вируса в культуре клеток, РСК, а также в РТГА с эритроцитами человека группы 0. В качестве диагностикума используют ротавирусы обезьян и телят.