Методика изготовления шлифов отолитов

К обратной стороне предметного стекла с закрепленным на нем отолитом (рис. 6) прикрепляли присоску, благодаря которой прочно удерживали стекло при различных манипуляциях.

Рис. 6 – Фото препаратов отолитов личинок горбуши.

 

Шлифовку и полировку отолитов взрослых особей Oncorhynchus gorbuscha (Walbaum, 1792), Oncorhynchus keta (Walbaum, 1792) осуществляли на шлифовальной установке Buehler Metaserv 250. Для отолитов кеты и горбуши использовали силикон-карбидные диски (фирмы Struers) № 1200. Число оборотов шлифовальной установки от 40 до 60 в минуту. Шлифовали каждый отолит в течение двух-трех секунд. Периодически осматривали поверхность отолита под микроскопом, прекращали шлифовку, когда шлиф проходил в достаточной близости от центра отолита. Шлифовку проводили при подаче на обрабатываемый диск воды для охлаждения трущихся поверхностей и смывания отшлифованных частиц.

Шлифовку и полировку отолитов личинок горбуши осуществляли на алюминий-оксидных дисках (фирмы Buеhler, США) (рис.7).

 

Рис. 7 – Фото алюминий-оксидных дисков (фирмы Buеhler).

К предметному стеклу с закрепленным на нем отолитом так же прикрепляли для удобства присоску. На начальном этапе для шлифования использовали диск зернистостью девять мкм, затем пять мкм, при необходимости три мкм. Шлифовали плавными круговыми движениями, периодически осматривали под микроскопом отолит (рис.8).

Рис. 8 – Фото микроскопа Olympus BX 53 и

Монитора с изображением отолита.

 

Шлифовали препарат в течение 15-20 минут до обнаружения четких полос метки. Чтобы избавиться от появившихся после шлифовки царапин, мешающих при идентификации метки, полировали отолит на диске зернистостью 0,3 мкм (рис. 9).

Рис. 9 – Фото алюминий-оксидного диска для полировки

Отолитов (фирмы Buеhler).

 

Собственные исследования

За время прохождения практики в секторе отолитометрии и искусственного воспроизводства лаборатории лососевых рыб обработали препараты отолитов мальков (рис. 10) и взрослых особей кеты и горбуши.

 

Рис. 10 – Фото отолита горбуши под микроскопом с Пугачевского ЛРЗ.

На шлифовальной установке Buehler Metaserv250 обработали более 600 препаратов отолитов. Препараты просматривали с использованием микроскопа в проходящем свете при увеличении 10х, 20х, 40х (рис. 11).

Рис. 11 – Фото шлифовальной установки Buehler Metaserv250.

На алюминий-оксидных дисках обработали более 250 отолитов личинок. (рис.12).

 

Рис. 12 – Фото отолитов горбуши

(А – до обработки, Б – после обработки).

 

 

Просмотрели около 300 отолитов производителей кеты, собранных сотрудниками СахНИРО в июле 2016 года в заливе Терпения. Среди представленных на анализ отолитов кеты, маркированных рыб не было обнаружено.

Обработав более 250 препаратов отолитов личинок, у большинства обнаружили четкие метки (рис.13). Незначительное количество отолитов было с трудноразличимой меткой, 15 препаратов были повреждены, поэтому обнаружить и идентифицировать метки не удалось.

 

Рис. 13 – Фото отолита под микроскопом до обработки.

Заключение

Во время прохождения производственной практики получили сведения о деятельности сектора отолитометрии и искусственного воспроизводства лаборатории лососевых рыб.

Ознакомились с методиками подготовки и обработки препаратов отолитов горбуши и кеты для дальнейших отолитометрических исследований.

Освоили технологию шлифовки и полировки отолитов на шлифовальной установке и алюминий-оксидных дисках для последующей работы с ними.

Таким образом, на практике закрепили теоретические навыки, которые получили в процессе изучения специальных дисциплин, научились обрабатывать препараты отолитов лососевых рыб в лабораторных условиях.

Обработали более 850 отолитов горбуши и кеты, из которых около 300 отолитов, собранных в заливе Терпения, принадлежали производителям кеты, однако среди представленных на анализ отолитов кеты, маркированных рыб не было обнаружено.