Энзимодиагностика: механизмы изменения уровня активности ферментов в крови.

Энзимодиагностика заключается в постановке диагноза на основе определения активности ферментов в биологических жидкостях человека. Принципы энзимодиагностики 1)при повреждении клеток в крови или других биологических жидкостях увеличивается концентрация внутриклеточных ферментов повреждённых клеток; 2)количество высвобождаемого фермента достаточно для его обнаружения; 3)активность ферментов, обнаруживаемых при повреждении клеток, стабильна в течение достаточно длительного времени И отличается от нормальных значений; 4)ряд ферментов имеет органоспецифичность;

Причины, приводящие к увеличению количества ферментов в крови

 Ферменты плазмы крови можно разделить на 2 группы. Первая группа ферментов активно секретируется в плазму крови определёнными органами. Ко второй относят большую группу ферментов, высвобождающихся из клеток во время их нормального функционирования. Обычно эти ферменты выполняют свою функцию внутри клетки и не имеют физиологического значения в плазме крови. У здорового человека активность этих ферментов в плазме низкая и достаточно постоянная.

 При многих заболеваниях происходит повреждение клеток, и ферменты высвобождаются в кровь. К причинам, вызывающим высвобождение внутриклеточного содержимого в кровь, относят нарушение проницаемости мембраны клеток или нарушение целостности клеток. Используют для диагностики заболеваний сердца, печени, скелетной мускулатуры. появление в плазме крови ферментов, имеющих только цитозольную локализацию, свидетельствует о воспалительном процессе; при обнаружении митохондриальных или ядерных ферментов можно говорить о более глубоких повреждениях клетки, например о некрозе.

 Однако повышение концентрации ферментов не всегда связано с повреждением тканей. При избыточной клеточной пролиферации, например при онкопролиферативных процессах, при повышенной скорости синтеза некоторых ферментов в клетках или при нарушенном клиренсе наблюдают повышение концентрации в крови определённых ферментов.

Энзимодиагностика при инфаркте миокарда и заболеваниях печени.

При инфаркте миокарда наблюдают достоверные изменения в крови активности ферментов КК, ЛДГ и аспартатаминотрансферазы, которые зависят от времени, прошедшего от начала развития инфаркта и от зоны тканевого повреждения. Обнаружение повышенной активности КК в плазме крови - основной энзимодиагностический критерий инфаркта миокарда. Дополнительным подтверждением диагноза инфаркта миокарда служит обнаружение активностей ферментов ACT и ЛДГ в крови больных. Активность ACT в норме составляет 5-40 МЕ/л. При инфаркте миокарда повышается через 4-6 ч; максимум активности наблюдают в течение 2-3 дней. Уровень ЛДГ также увеличивается в плазме крови через несколько часов после закупорки кровеносного сосуда; максимум активности наблюдают на 3-4-й день, затей наступает постепенная нормализация активности.

Печень. Нормальная активность АЛТ в крови мужчин равна 10-40 Ед/л, у женщин – 12-32 Ед/л. Резкое повышение активности АЛТ в 5-10 и более раз является признаком острого заболевания печени. Активность АСТ возрастает при некрозе печеночных клеток, острый инфекционный и острый токсический гепатит. Соотношение активности АСТ/АЛТ называется коэффициент де Ритиса. Нормальное значение коэффициента 1,3. При повреждениях печени значение коэффициента снижается.

Для диагностики инфекционного гепатита используют определение активности изоформ ЛДГ 4 и 5. При остром гепатите активность ЛДГ5 повышается в первые недели желтушного периода. Повышение совокупной активности изоформ ЛДГ4 и ЛДГ5 выявляется у всех больных инфекционным гепатитом в первые 10 суток. При развитии обтурационной желтухи активность щелочной фосфатазы в сыворотке крови возрастает в 10 и более раз. Увеличение концентрации глутаматдегидрогеназы в крови является признаком начала дистрофических процессов в печени.

35. Свертывающая система крови. Этапы образования фибринового сгустка. В остановке кровотечения различают 3 этапа. На первом этапе происходит сокращение кровеносного сосуда. Затем к месту повреждения прикрепляются тромбоциты, которые, наслаиваясь друг на друга, образуют тромбоцитарную пробку. На третьем этапе растворимый белок плазмы крови фибриноген превращается в нерастворимый белок фибрин, который откладывается между тромбоцитами, и формируется прочный фибриновый тромб. Образованию фибринового тромба предшествует протеолитических реакций, приводящий к активации фермента тромбина, который и превращает фибриноген в фибрин. Все белки, участвующие в свёртывании крови, называют факторами свёртывания. Они синтезируются в основном в печени и клетках крови в виде неактивных предшественников.

Образование фибринового тромба начинается с превращения растворимого белка фибриногена в нерастворимый фибрин.

1. Превращение фибриногена в мономер фибрина. Сначала молекулы фибриногена освобождаются от отрицательно заряженных фрагментов А и В, в результате чего образуются мономеры фибрина. катализирует фермент тромбин.

2.Образование нерастворимого геля фибрина. непрочен, так как молекулы фибрина в нём связаны между собой нековалентными связями.

3.Стабилизация геля фибрина. В результате образования амидных связей между остатками лизина одной молекулы фибрина и остатками глутамина другой молекулы гель фибрина стабилизируется. Реакцию катализирует фермент трансглутамидаза. Фактор XIII активируется частичным протеолизом под действием тромбина. тромб фиксируется в месте повреждения сосуда.

4. Ретракция фибринового сгустка. Ретракцию геля обеспечивает сократительный белок тромбостенин, обладающий АТФ-азной активностью.

 

 

36. Внутренний и внешний пути свертывания. Витамин К в свертывании крови. Процесс свертывания - на три фазы: первая включает комплекс последовательных реакций, приводящих к образованию протромбиназы, во вторую фазу осуществляется переход протромбина (фактор II) в тромбин (фактор IIа) и в третью фазу из фибриногена образуется фибрин.

Первая фаза — образование протромбиназы может происходить по внешнему и внутреннему механизму. Внешний механизм предполагает обязательное присутствие тромбопластина (фактор III), внутренний же связан с участием тромбоцитов. Вместе с тем внутренний и внешний пути образования протромбиназы активируются одними и теми же факторами (фактор ХIIа, калликреин.), а также приводят в конечном итоге к появлению фактора Ха, выполняющего функции протромбиназы.