Біохімічні та біофізичні властивості А-вірусу винограду

Антигенні властивості

Віріони є помірними або білними антигенами. Більшість видів є досить добре вивчені за рахунок використання серелогічних реакцій. Продуку.ться моноклональні антитіла А-вірусу винограду та рекомбінантні білкові антитіла для ймовірних білків руху.

Взаємозвязок між А, Б і Д – вірусами винограду є можливим завдяки декільком спільним внутрішнім антигенним детермінантам (криптотопи).

Частинки А-вірусу винограду містять виско структуровані епітопи, що зосереджені в спільній пептидній ділянці ланцюга капсидного білка [57].

Фізичні властивості

В клітинному соці N. clevelandii, вірус втрачає свою інфекційність, після нагрівання протягом 10 хв при температурі близько 50 °C,

- розчиняється в 10^-5,

- має здатність зберігатися при температурі 20 °C близько 6 днів або при температурі 5 °C - 15 днів [14].

Властивості частинок

Коевіцієнт седиментації (s₂₀,w) не екстраполюються на нескінченне розведення: 92 ± 2С [13].

Симптоматика

Головні хвороби

А-вірус винограду спричинює хворобу – ямковість стебла Кобера і є одним із компонентом комплексу складчастості деревини.

Складчатість деревини – це дуже серйозна хвороба, яка в цілому вражає щеплену лозу, і характеризується борознами і ямками на стовбурах і гілках як прищепи, так і підщепи [24] (Рис.1.6).

Рис.1.6 Симптоми А-вірусу винограду на прикладі винограду, а саме прояв складчастості деревини [64].

 

Вірус індукує яскраво вираженими повздовжними борознами на стеблі Американського гібриду підщепи Кобер 5ВВ (Рис.1.7), внаслідок щеплення з винограду або щепленн від Nicotiana spp.

 

Рис1.7 Повствожні ями на гілці зараженого підщепа Кобер 5ВВ [64].

А-вірус винограду може інфікувати безсимптомно виноград лише певних сортів або підщеп. Він також відповідальний за значні втрати врожаю, в загальному від 5 до 22% серед сортів винограду в Італії.

Рослини-господарі і симптоматика

Природні інфекція була виявлена лише на рослинах роду Vitis, і то разом з іншими вірусами.

Експерементальне коло рослин-господарів включає в себе кілька видів тютюну [14, 40, 47]. Ізолят із Ємена спровокував локальні ураження в Chenopodium quinoa і C. amaranticolor і інфікував, але без яскраво виражених симптомів, Datura stramonium [40]. Той же самий ізолят і ще один ізолят з Італії викликали локальні ураження також у Gomphrena globosa. Ізоляти вірусу легко передаються між травянистими-господарями (травами, бурянами) завдяки механічній інокуляції соку. Передача між винорадом є змінною, особливо якщо тканини вільно-вирощеного винограду використовуються як інокулюм. Вирожені в In vitro експланти винограду і загальні екстракти нуклеїнової кислоти є найкращими ресурсами для механічної передачі [40]. Для передачі, необхідні тканини були посаджені в 0,1 М фосфатний буфер, що містив 2,5% нікотину [64].

 

Діагностичні види

1) Nicotiana benthamiana і N. clevelandii.

Більшість відомих вірусних ізолятів спровоковує систематичне ураження жилок у вигляді ямок або пустот на 1-13 день, деформацію листків і карликовість (Рис.1.8 і Рис.1.9). Схожі симптоми проявляються й у N. occidentalis, N. cavicola, і N. Megalosiphon [64].

Рис.1.8 Затримка росту і систематичне в’янення на інфікованому N. benthamiana. Здорова рослина зображена праворуч [64].

 

Рис.1.9 Ураження жилок і деформація системно заражених листків N. Clevelandii [64].

2) Chenopodium quinoa і C. amaranticolor.

Хлоритичні або некротичні локальні ураження на 8-10 дні.

3) Gomphrena globosa.

Хлоритичні аюо некротичні локальні ураження на 708 день, іноді прояв плямистотсі і або в’янення на 10-15 дні.

Найголовнішим проявом А-вірусу винограду є комплекс борознистості деревини [64].

Комплекс борознистості деревини. Rugose wood complex (RWC) складається з чотирьох окремих захворювань, котрі дуже поширені у всьому світі, для них є характерним утворення ямок та борозен на здерев’янілому штамбі (рис. 1.10) [22, 41, 54].

Рис.1.10 Прояв борознистої деревини [54].

Рис.1.11 Повздовжні борозни стебла винограду

 

До складу RWC входять представники двох самостійних родів Foveavirus (RSPaV) та Vitivirus (GVA, GVB) родини Betaflexiviridae порядка Tymovirales [31, 37, 41]: Rupestris stem pitting associated virus (RSPaV) – вірус борознистості деревини Рупестріс (індикатор V. rupestris дю Ло); Grapevine virus B (GVB) – Corky bark – вірус В винограду – опробковіння кори (індикатор LN 33) [23]; Grapevine virus A (GVA) – Kober stem grooving – вірус A винограду – наявність виямок у деревині Кобера (індикатор Кобер 5ББ). LN 33 stem grooving – на­явність ямок у деревині ЛН (індикатор LN 33) [5].

Борознистість деревини є найпоширенішим у світі захворю­ванням серед захворювань комплексу RWC [41]. Захворювання можна чітко визначити на зараженому винограді, однак, часто його перебіг спостерігається у латентній формі, не викликає характерних симптомів і не впливає на ріст та урожайність кущів [22, 54]. На більшості європейських сортів хвороба не ви­кликає ніяких симптомів, окрім пригнічення росту [1].

Загальний стан уражених кущів залежить від ступеня розвитку хвороби. Слабко уражені кущі, без чітко виражених зовнішніх симптомів, порівняно добре розвинуті і плодоносять нормально. З розвитком хвороби відзначається затримка росту кущів і слабкий хлороз листя, спостерігається підвищення кислотності, зменшення урожайності, нечисленні грона [22]. Дуже уражені кущі значно пригнічені, з витонченими, здебільшого безплідними пагонами і хлоротичним листям.

Специфічним симптомом захворювання є утворення на штамбі, іноді рукавах і коренях ямок та видовжених борозен, що ідуть паралельно до їх вісі. Довжина борозен може досягати 50 мм, ширина має 1–4 мм і глибина 0,5–5 мм. При сильному розвитку хвороби декілька борозен можуть зливатися в одну, утворюючи довгі, широкі і глибокі канавки, котрі у більшості випадків сприяють розтріскуванню штамбу та рукавів. Часто на місці спайки щеплення прищепа утворює потовщення, а підщепа залишається набагато тоншою за прищепу. Кора під ділянками з симптомами борознистості потовщена, дірчаста.

На кореневласних кущах розвиток симптомів починається від п’ятки і поширюється як догори по штамбу, так і донизу по коренях. Симптоми захворювання на прищеплених кущах починаються з місця з’єднання прищепи з підщепою, потім поширюються на компоненти щеплення і можуть охопити рукава і корені. У більшості випадків симптоми захворювання спостерігаються або на прищепі, або на підщепі, але в окремих випадках на обох одночасно [1, 54].

Гістологічними дослідженнями встановлено, що лінія камбію має хвилясті обриси, тому у циліндра зазубрений контур. На рівні борозен елементи твер­дого луба і судини деревини не формуються; у місцях пошкодження луб’яно- деревний камбій погано діє і утворює луб’яну або деревну паренхіму, майже без судин. У корі відбуваються гіпертрофія, порушення її нормальної структури і некроз флоеми. Борознистість деревини – хвороба вторинних тканин, з причини ненормального функціонування камбію спостерігається гіпертрофія, гіпер- і гіпоплазія та паренхіматози у вторинній ксилемі та флоемі [1].

У свою чергу, на тлі опробковіння кори у деяких сортів спостерігається затримка початку росту та загибель окремих пагонів. Деревина уражених пагонів м’яка і каучукоподібна, внаслідок чого пагони поникають. Кора біля основи лози часто розтріскується, пагони визрівають нерівномірно: зелені ді­лянки не здерев’янілих пагонів часто чергуються з нормально здерев’янілою тканиною. Листя на хворих кущах дрібне, бліде; пізніше у червоних сортів воно червоніє повністю, включаючи жилки, і скручується краями до­низу. Восени таке листя опадає на три – чотири тижні пізніше, ніж звичайне. Часто у хворих кущів відзначають пригнічений ріст та зниження урожайності від 5 до 22 % [1, 3].

Вірусні інфекції спричиняють величезні втрати в виноградарстві. Часто спостерігається супресія росту кореневої системи, стебла, пагонів, листків, ягід і запилення. Також вірусні хвороби негативно впливають на метаболізм і спричиняють пігментацію різних органів рослини.

 

Передача А-вірусу винограду