Заглавная страница Избранные статьи Случайная статья Познавательные статьи Новые добавления Обратная связь КАТЕГОРИИ: АрхеологияБиология Генетика География Информатика История Логика Маркетинг Математика Менеджмент Механика Педагогика Религия Социология Технологии Физика Философия Финансы Химия Экология ТОП 10 на сайте Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрацииТехника нижней прямой подачи мяча. Франко-прусская война (причины и последствия) Организация работы процедурного кабинета Смысловое и механическое запоминание, их место и роль в усвоении знаний Коммуникативные барьеры и пути их преодоления Обработка изделий медицинского назначения многократного применения Образцы текста публицистического стиля Четыре типа изменения баланса Задачи с ответами для Всероссийской олимпиады по праву Мы поможем в написании ваших работ! ЗНАЕТЕ ЛИ ВЫ?
Влияние общества на человека
Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрации Практические работы по географии для 6 класса Организация работы процедурного кабинета Изменения в неживой природе осенью Уборка процедурного кабинета Сольфеджио. Все правила по сольфеджио Балочные системы. Определение реакций опор и моментов защемления |
Определение каталазного числа крови
Биологическая функция каталазы состоит в освобождении клетки от избытка пероксида водорода, образующийся при многих окислительно-восстановительных процессах, как, например, при действии ксантиноксидазы, уриказы, оксидазы аминокислот, диаминооксидазы и при ряде других ферментативных процессов. Образующаяся перекись водорода или расходуется в процессах катализируемых пероксидазой или же разрушается каталазой, причем образующийся кислород снова может быть использован в окислительных реакциях клетки. Таким образом, каталаза является важным элементом общей окислительно-восстановительной системы клетки. Как и пероксидаза, каталаза представляет собой протеид, содержащий в качестве активной группы железопорфириновый комплекс (содержание в кристаллической каталазы Fе=0,12%). По некоторым данным в молекуле каталазы наряду с гематиновыми группами содержится и желчно-пигментная группа. Каталаза угнетается NСN, Н2S, гидроксиламином. Она неустойчива: разрушается при рН=3. Разложение перекиси водорода при действии каталазы можно представить в виде следующих схем: Суммарно: 2Н2О2 = О2 + 2Н2О Принцип метода: Активность каталазы определяют по скорости разрушения перекиси водорода. Количество перекиси водорода определяют с помощью перманганатометрического титрования. 2КМnО4 + 5Н2О2 + 3Н2SО4 = 2МnSО4 + К2SО4 + 8Н2О + 5О2 Ход работы: При определении активности каталазы в крови в мерную колбу (100мл) примерно на половину наполняют дистиллированной водой, вносят 0,1мл крови, взятой из пальца. Пипетку промывают несколько раз водой из этой же колбы. Объем доводят до 100 мл дистиллированной водой. Таким образом, получают лизат крови, разведенной в 1000 раз. Для определения активности каталазы, берут 2 колбочки, наливают по 1мл разведенной крови, добавляют по 7 мл дистиллированной воды; в опытную колбу добавляют 2 мл Н2O2, а в контрольную 5мл 10%-ной серной кислоты. Действие каталазы в кислой среде прекращается, так как она действует при рН=7,4. Колбу оставляют при комнатной температуре на 30 минут. Затем в опытную колбу прибавляют 5мл 10% раствора Н2SO4, а в контрольную 2 мл Н2О2. Содержимое каждой колбы титруют 0,1 раствором КМnО4 до розовой окраски, неисчезающей в течение 1 минуты.
В-количество мл 0,1н раствора КМпО4, пошедшего на титрование опытной пробы; 1,7- количество мг Н2О2, соответствующие 1мл 0,1н КМnО4. Норма: КЧ=10-15ед. Активность каталазы выражается в единицах, показывающих количество мг расщепленного субстрата за 30 мин ферментом из 0,001. Клинико-диагностическое значение: определение активности каталазы крови имеет значение для диагностики рака, анемии, туберкулеза: при этом активность каталазы снижается. Контрольные вопросы по теме 1. Что такое метаболизм, катаболизм, анаболизм? 2. Макроэргические соединения. Роль АТФ в организме. 3. Современная теория окислительного фосфорилирования. 4. Что называют дыхательным ансамблем? Его локализация в клетке. 5. Перечислите все ферменты, которые принимают участие в транспорте водорода от окисляемого субстрата на кислород. 6. На каком принципе основано расположение компонентов дыхательной цепи. 7. Строение никотинамидных дегидрогеназ, механизм их участия в биологическом окислении. Напишите формулу НАД. 8. Строение флавопротеинов, механизм их участия в биологическом окислении. Написать формулу ФМН и ФАД. 9. Кофермент Q, его участие в биологическом окислении. Строение цитохромов, их свойства, роль и место в биологическом окислении. 10. Что такое железосерные белки и какова их роль в биологическом окислении? 11. Какие ферменты биоокисления локализируются в цитоплазме? Приведите примеры. 12. Какова последовательность переносчиков протонов и электронов в удлиненной цепи митохондриального окисления? 13. Что называют укороченной цепью митохондриального окисления? 14. Каковы современные представления о механизме сопряжения тканевого дыхания и окислительного фосфорилирования? 15. Что называют коэффициентом окислительного фосфорилирования? 16. Что такое разобщители? 17. Какова биологическая роль митохондриального окисления? 18. В каком виде выделяется энергия тканевого дыхания? 19. Что такое пероксимальное окисление? Его особенности. 20. Какие субстраты окисляются в пероксисомах? Напишите их формулы.
21. Что такое «активные» формы кислорода? Как они образуются? Какова их биологическая роль? 22. Понятие об оксидантной и антиоксидантной системах организма. 23. Напишите формулу субстратов: а) полной; б)удлиненной; в) укороченной цепей митохондриального окисления. 24. Что такое «дыхательный контроль»? 25. Напишите реакции, катализируемые каталазой, супероксиддисмутазой, глутатионпероксидазой.
|
||||||
Последнее изменение этой страницы: 2017-02-17; просмотров: 371; Нарушение авторского права страницы; Мы поможем в написании вашей работы! infopedia.su Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Обратная связь - 18.119.131.178 (0.005 с.) |