Заглавная страница Избранные статьи Случайная статья Познавательные статьи Новые добавления Обратная связь КАТЕГОРИИ: АрхеологияБиология Генетика География Информатика История Логика Маркетинг Математика Менеджмент Механика Педагогика Религия Социология Технологии Физика Философия Финансы Химия Экология ТОП 10 на сайте Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрацииТехника нижней прямой подачи мяча. Франко-прусская война (причины и последствия) Организация работы процедурного кабинета Смысловое и механическое запоминание, их место и роль в усвоении знаний Коммуникативные барьеры и пути их преодоления Обработка изделий медицинского назначения многократного применения Образцы текста публицистического стиля Четыре типа изменения баланса Задачи с ответами для Всероссийской олимпиады по праву Мы поможем в написании ваших работ! ЗНАЕТЕ ЛИ ВЫ?
Влияние общества на человека
Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрации Практические работы по географии для 6 класса Организация работы процедурного кабинета Изменения в неживой природе осенью Уборка процедурного кабинета Сольфеджио. Все правила по сольфеджио Балочные системы. Определение реакций опор и моментов защемления |
Определение интенсивности микробиологических процессов
Обнаружение в воде или грунтах представителей различных физиологических групп микроорганизмов, осуществляющих трансформацию определенных веществ, еще не является доказательством того, что эти процессы протекают в природных условиях, поскольку на элективных средах микроорганизмы могут развиваться из покоящихся, неактивных форм. Только прямое определение интенсивности процессов в условиях, максимально приближенных к естественным, позволяет подойти к правильной количественной оценке микробиологической деятельности в природных местообитаниях. В настоящее время существуют различные методы измерения микробиологической активности в морской воде и донных отложениях. В основном они делятся на две большие группы: а) методы, прослеживающие судьбу отдельных субстратов и б) методы оценки изменений в пределах микробного сообщества. В данном разделе рассматриваются методы первой группы. 1. Измерение деструкции органического вещества. Основная роль бактерий в океане состоит в минерализации органического вещества и изучению этой стороны деятельности морских бактерий, или гетеротрофной активности, уделялось наибольшее внимание. 1.1.Кислородный метод. Один из первых, методов оценки деятельности, микроорганизмов в водоеме был предложен Винбергом (1934) для изучения интенсивности фотосинтеза и дыхания водорослей и бактерий. Метод состоит в том, что определяется изменение содержания кислорода в темных и светлых склянках, заполненных исследуемой водой и помещенных в водоем на сутки. Разница между содержанием кислорода в исходной пробе и его содержанием в темной склянку через сутки и соответствует количеству кислорода, пошедшего на окисление органического вещества. Чтобы перейти к количеству органического вещества, полученную величину умножают на коэффициент 0,93, а к количеству углерода - на 0,37 (массовые). Достоинства этого метода состоят, во-первых, в том, что он не требует применения сложной и дорогостоящей аппаратуры, и, во-вторых,- что очень существенно,- кислород является естественным и универсальным субстратом, потребляющимся при окислении органического вещества. Метод получил широкое распространение при изучении продукции и деструкции органического вещества в пресноводных водоемах. Однако, низкая чувствительность метода (им улавливаются изменения концентрации не менее 0,01 мг О2/сутки) позволяет использовать его только в эвтрофных прибрежных водах, лагунах и эстуариях и делает его непригодным для работы в открытом океане, где преобладают олиготрофные условия.
При применении этого метода невозможно разделить количество кислорода, идущего на дыхание бактерий, микрофлагеллят или простейших. Попытки же размерного разделения этих групп приводят к тому, что нарушается сложившееся в естественных условиях равновесие. 1.2. Радиоизотопные методы. Методы обычного химического анализа оказываются недостаточно чувствительными при регистрации изменений концентрации различных соединений, потребляемых или образуемых микроорганизмами в природных условиях. Новые возможности открылись благодаря разработке высокочувствительных радиоизотопных методов. Использование таких методов в водной микробиологии проводится по общей для различных изотопов схеме. Образец воды или ила инкубируется с меченым радиоактивным соединением (которое вводится непосредственно в образец) в течение непродолжительного времени в условиях, максимально приближенных к естественным. После этого проводится измерение радиоактивности микробной массы или продуктов ее жизнедеятельности, либо той и другой. Один из таких методов, предложенный Романенко (1965) и примененный им при работе на пресноводных водоемах, позволяет определить интенсивность деструкции органического вещества по гетеротрофной ассимиляции С14О2. В опытах как с чистыми культурами, так и с природной водой было установлено, что между потреблением кислорода и количеством ассимилированной углекислоты имеется постоянное соотношение: на 1 мг использованного на дыхание О2 ассимилируется 7 мкг С/СО2. Благодаря этому возможно определять потребление О2 на дыхание по гетеротрофной ассимиляции С14О2. Последнюю определяют, инкубируя пробы воды с меченым С14 карбонатом в темноте в течение суток. Следует при этом иметь в виду, что значительные трудности возникают при попытке разделить количество СО2, ассимилированного хемосинтезирующими и гетеротрофными бактериями. Поэтому к использованию этого метода в тех условиях, где можно ожидать присутствия обеих групп бактерий, следует подходить с большой осторожностью. Для анаэробных условий этот метод непригоден.
Некоторые зарубежные авторы (Banse, Overbeck) считают, что этот метод дает завышенные величины и полученное в условиях пресноводных водоемов соотношение между 02 и С, при переходе на тропические морские водоемы нуждается в перепроверке. За рубежом широкое признание получил метод определения гетеротрофной активности по потреблению низких концентраций органических субстратов (глюкозы, ацетата, гидролизата белка) меченых С14.. Метод был вначале введен Парсонсом и Стрикландом (.1962) и далее развит Хобби и Райтом (1966), которые показали, что низкомолекулярные органические соединения потребляются фитопланктоном и бактериями по-разному, при низких концентрациях субстрата бактерии получают преимущество благодаря особенностям транспортных систем. Потребление небольших количеств глюкозы и ацетата следует кинетическому уравнению Михаэлиса-Ментена. Максимальная скорость потребления субстрата (Vmax) была названа Хобби и Райтом относительным гетеротрофным потенциалом. Расчет быстроты потребления субстрата этим методом проводится графическим путем. При этом можно измерять природные концентрации субстрата, если они не поддаются измерению химическими методами. Время инкубации с субстратам должно быть кратким. К числу недостатков этого метода относится прежде всего то, что нет субстратов, которые бы использовались всеми бактериями, и отмечается потеря части С14 в процессе обработки фильтра. ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА 3
|
||||||
Последнее изменение этой страницы: 2017-02-07; просмотров: 205; Нарушение авторского права страницы; Мы поможем в написании вашей работы! infopedia.su Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Обратная связь - 3.135.246.193 (0.005 с.) |