Отбор, хранение и транспортирование проб

Пробы для санитарно-микробиологического анализа отбирают в стерильные емкости.

Для отбора проб воды используют специально предназначенную для этих целей одноразовую посуду или емкости многократного применения, изготовленные из материалов, не влияющих на жизнедеятельность микроорганизмов.

Емкости должны быть оснащены плотно закрывающимися пробками (силиконовыми, резиновыми или из других материалов) и защитным колпачком (из алюминиевой фольги, плотной бумаги) или завинчивающимися крышками. Многоразовая посуда, в т.ч. пробки, должна выдерживать стерилизацию сухим жаром или автоклавированием.

Стерильные емкости открывают непосредственно перед отбором, удаляя пробку вместе со стерильным колпачком. Во время отбора пробка и края емкости не должны чего-либо касаться. Ополаскивать посуду не следует.

После наполнения емкость закрывают стерильной пробкой, обеспечивающей герметичность и ненамокающей при транспортировании (ватные пробки не применять), и стерильным колпачком.

При заполнении емкостей должно оставаться пространство между пробкой и поверхностью воды, чтобы пробка не смачивалась при транспортировании.

Поверхностные пробы отбирают с глубины 10-15 см от поверхности воды или от нижней кромки льда. Придонные пробы отбирают в 30-50 см от дна. Отбор проб следует производить с использованием различных плавсредств, с мостов, помостов и т.п. в местах, где глубина водоемов не менее 0,5 м. Недопустимо производить отбор проб с берега.

Поверхностные пробы отбирают батометром с устройством для закрепления стерильных емкостей. Глубинные пробы отбирают специальным батометром, предназначенным для этих целей. Допускается использовать другие приспособления, установленные в приложении к ГОСТР 51592-00.

При отборе одним батометром нескольких проб, его каждый раз стерилизуют фламбированием. Из одной точки в первую очередь отбирают пробы для микробиологических исследований, а затем для других целей. Проруби делают, избегая внесения загрязнения со льда и инструментов. Руки перед отбором проб должны быть обеззаражены.

Для воды, содержащей токсичные металлы (бериллий, ртуть, кадмий, таллий) массовой концентрацией более 0,01 мг/л, в емкости до их стерилизации добавляют 0,3 мл 15%-ногораствора нитрилотриуксусной кислоты на 500 мл пробы.

Отбор проб производит специалист после прохождения инструктажа по технике выполнения отбора проб для микробиологического анализа.

Отобранную пробу маркируют и сопровождают документом отбора проб воды с указанием места, даты, времени забора, фамилии специалиста, отбиравшего пробу, и другой информации(температуры воды, погодных условий).

Объем пробы зависит оттого, какие микроорганизмы должны быть определены, например, при анализе воды:

- на индикаторные микроорганизмы - не менее 500 мл;

- на индикаторные и патогенные бактерии (сальмонеллы) - 1,5 л.

Доставку проб воды осуществляют в контейнерах-холодильниках при температуре (4-10) °С. В холодный период года контейнеры снабжают термоизолирующими прокладками, обеспечивающими предохранение проб от промерзания. В лаборатории, если анализ по каким-либо причинам откладывают, пробы следует поместить в холодильник.

При соблюдении указанной температуры транспортирования и хранения срок начала исследований от момента отбора проб не должен превышать 6 ч. Если пробы нельзя охладить, их анализ проводят в течение 2 ч после забора.

Если не может быть соблюдено время доставки пробы и температура хранения, анализ пробы по бактериологическим показателям не проводят.

 

 

 

Практическая работа 2.1

ЦЕНОЗЫ ПРИРОДНЫХ ВОД

Совокупность растений и животных, населяющих участок среды обитания с более-менее однородными условиями обитания, образовавшихся естественно или в результате деятельности человека и характеризующаяся определенными взаимоотношениями между ее членами и средой обитания носит название Биоценоз. Животные (зооценоз) и растения (фитоценоз) в биоценозе настолько связаны между собой, что составляют единое целое и зависят от окружающей среды (климат, почва, гидрологические условия, на которые в свою очередь влияют определяющим образом); биоценозы следует считать частью природного комплекса и среды, в которой они обитают. Биоценозы непрерывно развиваются в исторической перспективе как в результате разрешения межвидовых противоречий, так и в результате изменения среды обитания..В составе биоценозов достаточно возбудителей различных болезней, передающих возбуждение различных болезней от одного организма к другому по пищевым или контактным биоценотическим связям.

Взаимовлияние и связи биоценозов очень сложны и разнообразны: одни организмы создают необходимые условия для существования других, изменяя среду обитания; другие – служат сами или продуктами своего распада пищей для других (трофические или пищевые связи); третьи связаны размножением или гнездованием на одном пространстве.

Организмы, постоянно обитающие в воде (гидробионт ы), составляют: планктон (пассивно плавающий, обычно представлен мелкими формами), нектон (активно плавающие организмы, способные противостоять течениям вод) и бентос (живущий на дне).

Зоопланктон населяет обычно всю толщу пресных и соленых водоемов, в то время как фитопланктон, нуждающийся в солнечном свете – лишь в верхних слоях водоемов (до глубин 50 – 100 м.).

По размерам организмов различают:

· ультрапланктон (в основном бактерии) – величиной до нескольких микрон;

· нанопланктон (некоторые растения и многие простейшие животные) – до 50 микрон;

· микропланктон (большая часть планктонных растений и некоторая часть животных) – до 1 мм.;

· мезопланктон (некоторые планктонные растения и большая часть планктонных животных) – до 5 мм.;

· макропланктон (некоторые животные – высшие раки, черви, медузы) – до нескольких сантиметров;

· мегапланктон (некоторые медузы) – до 2 м

Обильное развитие планктонных организмов в природной воде (преимущественно растительных) вызывает ее цветение.

Состав и состояние биоценозов определяется не только ходом естественных процессов, но и процессов, протекающих под действием параметров технологии.

Процессы самоочищения природных водоемов происходит в результате воздействия на загрязнения физических химических и биологических факторов. При этом происходит отмирание микроорганизмов и биологическое окисление органических веществ. Искусственные сооружения для очистки сточных вод также всего лишь емкости, в которых формируются сообщества водных организмов – в основе индустриальных методов очистки все та же самоочистка, интенсифицируемая работой инженерных систем.

В процессе самоочистки могут присутствовать три фазы:

фаза с преобладанием восстановительных процессов (анаэробная фаза), протекающих при полном отсутствии кислорода за счет жизнедеятельности анаэробных бактерий,

фаза окислительно-восстановительная, где начинаются процессы окисления органических веществ за счет поступающего кислорода и аэробных бактерий, разлагающих органические вещества до углекислоты и воды, а белки до аммонийных соединений; к этому процессу подключаются и другие организмы,

фаза окислительная – аэробная, где содержание кислорода близко к насыщению и происходит полная минерализация органических соединений; азотистые соединения присутствуют в воде в виде нитратов и нитритов, свидетельствуя о интенсивно протекающих процессах, что и используется в качестве показателя степени очистки, наряду с показателем биологической потребности в кислороде (БПК).

Простейшие - тип одноклеточных, преимущественно микроскопических, организмов. Тип простейших делится на 4 класса: жгутиковые, корненожки, споровики, инфузории, Наиболее мелкие простейшие не превышают нескольких микрон, самые крцпные достигают 2 - 3 см.

Простейшие распространены по всему земному шару. Известно около 15 тыс. видов простейших, из них около 12 тыс. – свободно живущие формы, около 3 тыс. – паразиты различных животных и человека. Большинство свободно живущих форм (около 10 тыс.) обитают в морях, остальные – в пресных водоемах (всюду где емть влага): в реках, озерах, болотах, лужах, колодцах, во влажной земле, мхах и т.д. Роль простейших в самоочистке водоемов и процессах очистки сточных вод является весьми определяющей. Поэтому именно они будут находиться в центре нашего внимания.

Тип простейших делится на 4 класса: жгутиковые, корненожки, споровики, инфузории.

Тело простейших состоит из протоплазмы, ядра (или нескольких ядер) и различных плазменных включений. Протоплазма по своему строению неоднородна. В простейшем случае (у некоторых корненожек) протоплазма имеет 2 слоя: внутренний (эндоплазма) - жидкий зернистый слой и наружный (эктоплазма) - более вязкий и прозрачный. У большинства простейших слой эктоплазма уплотняется, превращаясь в тонкую эластичную пленку - пелликулу, позволяющую вместе с тем временно менять форму тела (метаболизировать).

У ряда форм поверхностный слой (эктоплазма) утрачивает свойства живой плазмы и превращается в продукт ее выделения (кутикулла) – биологическая система клетки изолируется от аналогичных систем, старается стать закрытой.

Ядро простейших является непременной их частью; без него любая жизнедеятельность клетки невозможна. Строение ядер разнообразно. Различаются ядра пузырьковые и массивные различных типов. Известны простейшие имеющие несколько ядер.

Помимо ядер, протоплазма простейших содержит ряд включений. Одни из вк5лючений являются продуктами жизнедеятельности клетки, запасные питательные вещества (крахмал, гликоген, парагликоген, лейкозин, жиры и др.) или продукты обмена, или гидростатические аппараты для выравнивания давления. С жировыми включениями связана способность некоторых простейших светиться в темноте.

У высших простейших (инфузории, некоторые жгутиковые) получили развитие фибриллы, пронизывающие протоплазму и образуя внутренний скелет, м числе из минеральных материалов, выделяемых плазмой из крекмнезема (у солнечников), углекислого кальция, сернистого стронция. У планктонных форм простейших иглы могут выходить на поверхность тела.

Многие планктонные организмы имеют наружный скелет (раковину) из хитина, клетчатки, извести или кремния,

Инцистирование простейших - переход простейшего в форму существования “циста”, характеризующаяся наличием оболочки. У животных организмов (жгутиковые корненожки, споровики, инфузории) различают цисты покоя и цисты размножения.

Цисты покоя - имеют толстые оболочки (студенистые или твердые); состоят из хитинообразных веществ, иногда минерализуются, цисты ыв данном случае выполняют защитные функции. Инцистирование наступает при возникновении неблагоприятных условий существования (например, при пересыхании водоема или его промерзании), а у паразитических форм - перед выделением из организма - хозяина, обеспечивая возможносмть перехода от одного организма - хозяина к другому через внешнюю среду. В состоянии цисты организм может существовать весьма долго.

Цисты размножения - имеют тонкую оболочку и образуются на короткий срок, в течении которого содержимое цисты делится на несколько самостоятельных организмов.

У растительных организмов цисты образуются в результате простого сжатия т5ела и выделения из него новой, особо плотной трудно проницаемой оболочки