Сравнительная характеристика вирусных гепатитов

Гепатиты	А (HAV)	B (HBV)	С (НСV)	D (HDV)	Е (НЕV)	G (HGV)
Таксономия возбудителя	Сем. Picornaviridae Род. Hepatovirus	Сем. Hepadnaviridae Род. Ortohepadnavirus	Сем. Flaviviridae Род. Hepacivirus	Неклассифицирован, вирус-сателлит (вироид) HBV	Сем. Hepeviridae Род. Hepavirus	Сем. Flaviviridae неклассифицирован,
Морфология (форма, размер, наличие суперкапсида)	простой вирус, капсид икосаэдр 25-30 нм	сложный вируссферической и палочковидной формы 42 нм	сложный вирус сферической формы 55-65 нм	сложный вирус сферической формы 35-40 нм.	простой вирус икосаэдр 27-34нм	сложный вирус сферической формы 60 нм
Геном	+ РHK, линейная, нефрагментированная	ДНК кольцевая, двунитевая с однонитевым участком	+ РHK, линейная, нефрагментированная	- РHK, кольцевая	+ РHK, линейная, нефрагментированная	+ РHK, линейная, нефрагментрованная
Пути передачи	Фекально-оральный	Парентеральный	Парентеральный	Парентеральный	Фекально-оральный	Парентеральный
Инкубацион-ный период	14-45 дней	2- 6 месяцев	14 дней - 3 месяца	2 - 6 месяцев	14-45 дней	14 дней - 6 месяцев
Клинические проявления	Острые гепатиты	Часто хронический гепатит, цирроз, нередко рак	Часто хронический гепатит, цирроз, часто рак	Часто хронический гепатит, цирроз, нередко рак	Острые гепатиты, тяжело протекают у беременных	Часто хронический гепатит
Специфичес-кая профилак-тика	Инактивированная культуральная по эпид. с 3 лет, ревакцинация через 4 года	Рекомбинантная, плановая с 1996 года. 12час, 1месяц,3 месяца ревакцинация через 5 лет	Нет	Вакцина против гепатита В из-за общности поверхностного HBsAg	Инактивированная культуральная по эпид. с 3 лет.	Нет
Исследуемый материал	сыворотка крови, фекалии, вода и пищевые продукты.	сыворотка крови, биоптаты печени	сыворотка крови, биоптаты печени	сыворотка крови, биоптаты печени	сыворотка крови, фекалии, вода и пищевые продукты	сыворотка крови, биоптаты печени
Маркеры	HAV РНК, HAV Ag, anti-HAV IgM, IgG	HBV ДНК, HBsAg, HBeAg, anti-HBsAg, anti-HBeAg, anti-HBc IgM, IgG	HCV РНК, anti-HCV IgM, anti-HCV IgG	HDV РНК, HDAg, anti-HDV IgM, IgG	HEV PНК, HEV Ag, anti-HEV IgM, IgG,	HGV РНК, anti-HGV
Экспресс-диагностика	1) ПЦР - РНК вируса (HAVRNA) выявляют в сыворотке крови, фекалиях, воде и пищевых продуктах. 2) ИФА - антиген вируса (HAVAg) выявляют в экстрактах фекалий; 3) Иммунная электрон-ная микроскопия (ИЭМ).	1) ПЦР, метод молекулярной гибридизации - ДНК вируса (HBV DNA) в крови, биоптатах печени. 2) ИФА, РПГА в сыворотке крови определяют антигены вируса: поверхностный антиген (HВsAg), “антиген инфекционности” (HВеAg);	ПЦР, метод молекулярной гибридизации в сыворотке крови - РНК вируса (HCV RNA)2)	1) ПЦР, и метод молекулярной гибридизации - РНК вируса (HDV RNA); 2) ИФА, РИА, иммуноблотинг -антиген вируса (HDV Ag).	1) ПЦР обнаружение РНК вируса (HEV RNA) в сыворотке крови, испражнениях 2) ИФА - антиген вируса (HЕVAg),	ПЦР с предварительным этапом обратной транскрипции (RT-PCR)обнаружение РНК вируса (HGV RNA);
Вирусологичес-кие методы	Заражение клеточных культур, обезьян (шимпанзе) только для научных и производственных целей, в диагностике не применяют	Заражение обезьян (шимпанзе) только для научных целей, в диагностике не применяют	Нет	Нет	Нет	Нет
Серологическаядиагностика	ИФА, РИА в сыворотке крови выявляют Ig M-антитела (анти-HAV IgM) и Ig G-антитела (анти-HAV IgG).	ИФА, РПГА в сыворотке крови определяют противовирусные антитела: антитела к поверхностному антигену (анти-HВsAg); антитела к сердцевинному антигену (анти-HВсAg IgM, IgG; антитела к “антигену инфекционности” (анти-HВеAg);	ИФА,в сыворотке антитела к вирусу (анти-HCV IgM, анти-HCV IgG) В донорской крови 1) ИФА с раздельным определением антител к различным белкам вируса, 2) иммуноблоттинг с рекомбинантными антигенами к белкам капсида (С22) и функциональным белкам (NS3-NS5) для выявления антител.	ИФА в сыворотке крови- антитела к вирусу (анти-HDV IgM, анти-HDV IgG).	ИФА в сыворотке крови- антитела к вирусу (анти-HЕV IgM, анти-HЕV IgG	ИФА в сыворотке крови- антитела против вирусного белка Е2 (анти-HGV Е2)

Иммуноблоттинг— метод выявления белков, основанный на сочетании электрофореза и ИФА или РИА. Антигены возбудителя разделяют с помощью электрофореза в полиакриламидном геле, затем переносят их (блоттинг - от англ. blot, пятно) из геля на нитроцеллюлозную мембрану и проявляют с помощью ИФА. Полоски с “блотами” антигенов выпускаются различными фирмами. 1. На эти полоски наносят сыворотку больного. 2. Затем, после инкубации, отмывают от несвязавшихся антител больного и наносят сыворотку против иммуноглобулинов человека, меченную ферментом. 3. Образовавшийся на полоске комплекс [антиген + антитело больного + антитело против Ig человека] выявляют добавлением хромогенного субстрата, изменяющего окраску под действием фермента.

Иммуноферментный анализ, или метод (ИФА) — выявление антигенов с помощью соответствующих им антител, конъюгированных с ферментом-меткой (пероксидазой хрена, бета-галактозидазой или щелочной фосфатазой). После соединения антигена с меченой ферментом иммунной сывороткой в смесь добавляют субстрат/хромоген. Субстрат расщепляется ферментом и изменяется цвет продукта реакции — интенсивность окраски прямо пропорциональна количеству связавшихся молекул антигена и антител

Иммунная электронная микроскопия – электронная микроскопия чаще вирусов, обработанных соответствующими антителами. Вирусы, обработанные иммунной сывороткой, образуют иммунные агрегаты (микропреципитаты). Вокруг вирионов образуется “венчик“ из антител, контрастированный фосфорно-вольфрамовой кислотой или другими электроннооптически плотными препаратами хорошо видимый в электронном микроскопе.

Радиоиммунный анализ (РИА), — высокочувствительный метод, основанный на реакции антиген — антитело с применением антигенов или антител, меченных радионуклидом (125J, 14С, 3Н, 51Сr и др.). После их взаимодействия отделяют образовавшийся радиоактивный иммунный комплекс и определяют его радиоактивность в соответствующем счетчике (бета- или гамма-излучение): интенсивность излучения прямо пропорциональна количеству связавшихся молекул антигена и антител.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) основана на амплификации, т. е. увеличении количества копий специфического (маркерного) гена возбудителя. Для этого двунитевую ДНК, выделенную из исследуемого материал а, денатурируют («расплетают» при нагревании) и достраивают (при охлаждении) к расплетенным нитям ДНК новые комплементарные нити. В результате из одного гена образуются два. Этот процесс копирования генов многократно по вторяется при заданных температурных режимах. Достраивание новых комплементарных нитей ДНК происходит при добавлении к искомым генам прай меров (затравки из коротких однонитевых ДНК, комплементарных 3'- концам ДНК искомого гена), ДНК - полимеразы и нуклеотидов. Для амплификации РНК вирусов применяют ПЦР с предварительным этапом обратной транскрипции (RT-PCR).

Маркеры гепатита В

Гепатит B (ГВ) – острое или хроническое заболевание печени, вызываемое вирусом гепатита В (ВГВ), протекающее в различных клинико-морфологических вариантах: от бессимптомных форм до злокачественных (цирроз печени, гепатоцеллюлярная карцинома). Гепатит В встречается гораздо чаще протекает более остро и о заканчивается без осложнений. Но у 10% больных ВГВ переходит в хроническое течение, а в 1 % случаев развивается цирроз и первичный рак печени. На долю ГВ приходится около 15% всех острых гепатитов и не менее 50% хронических. Безжелтушные и субклинические формы инфекции, в основном, остаются нераспознанными (до 95% случаев). Заражение ВГВ происходит от «здоровых» вирусоносителей с нераспознанными хроническими или острыми формами ГВ при переливании крови и ее компонентов, при медицинских манипуляциях и сексуальных контактах. Вирус может передаваться от инфицированной матери к ребенку во время родов при нарушении целостности плаценты. В семьях больных хроническими формами ГВ и носителей HBsAg вследствие реализации гемоконтактов в быту. Вирус гепатита В чрезвычайно устойчив, при комнатной температуре сохраняется в течение 3 мес., в замороженном виде – 15–20 лет.

ВГВ чаще всего поражает печень. однако ДНК и белки вируса обнаруживаются также в почках, селезенке, поджелудочной железе, коже, костном мозге и мононуклеарах периферической крови.

Маркеры ВГВ это ДНК вируса, вирусные антигены HBsAg и HBeAg, а также антитела к ним анти-HBs, анти-HBe, и к ядерному белку HBc -анти-HBc, которые могут бытьобнаружены в организме больного. Комплексное изучение маркёров позволяет правильно установить стадию инфекции ВГВ и прогнозировать ее дальнейшее развитие.

HBsAg -поверхностный антигенВГВ - б елок его внешней оболочки. Это сложный антиген, состоящий из несколько антигенных детерминант, определяющих субтип HBsAg. Известны десять субтипов HBsAg: 7 основных - ауw1, ayw2, ayw3, ayw4, ayr, adr, adw2, adw4, adrq+, adrq–, и 5 редких: awr, adrw, adyr и adywr. На территории РБ преобладает HBsAg субтипа ауw (ayw2 – 57%; ayw3 – 37%)

HBсAg (HBc ore Ag) - внутренний или сердцевинный (ядерный) антиген - белок нуклеокапсида, обеспечивающий репликативную активность ВГВ. HBeAg (HBprecoreAg) окружает ядерный, это конформационно измененный HBcAg. HBeAg обнаруживается исключительно в биоптатах печени в ядрах гепатоцитов, а HBeAg циркулирует в крови инфицированных лиц.