Реакція Фоля (на сірковмісну амінокислоту – цистеїн).

Принцип методу. При нагріванні розчину білка, в якому є за­­­лишки сірковмісних амінокислот (цистеїн) з розчинами лугу та солі свинцю, сірка відщеплюєтся та утворює чорний осад PbS.

Хід виконання. У пробірку налити 0,5 мл розчину цистеїну, до­­­дати 1 мл реактиву Фоля. Нагрівати на водяній бані до утворення чорного забарвлення (5 хвилин).

 

Тема 9. СТРУКТУРНА ОРГАНІЗАЦІЯ БІЛКІВ. ФІЗИКО-ХІМІЧНІ ВЛАСТИВОСТІ БІЛКІВ. РЕАКЦІЇ ОСАДЖЕННЯ БІЛКІВ. ДЕНАТУРАЦІЯ.

 

Актуальність теми: білки відіграють центральну роль в процесах життєдіяльності. Вони виконують важливі функції, які складають основу життя (ферменти, скоротливі білки, захисні білки).

В клінічній практиці широко використовують визначення білка в крові та інших біологічних рідинах з діагностичними цілями (білкова недостатність, захворювання печінки, нирок, запалення серозних оболонок).

 

Конкретні цілі:

1. Пояснювати структурну організацію білків (первинної, вторинної, третинної і четвертинної структур), що необхідно для розуміння їх функцій та патологічних змін при багатьох захворюваннях.

2. Пояснювати фізико-хімічні властивості білків та використовувати ці знання у лабораторної діагностиці для їх виявлення і розподілу на фракції в біооб’єктах.

3. Уміти аналізувати біуретову реакцію для кількісного визначення білків.

 

Оpiєнтувальна каpтка для самостiйного вивчення студентами

Навчальної лiтеpатуpи пpи пiдготовцi до заняття.

Зміст і послідовність дій	Вказівки до навчальних дій
1. Білки як біополімери.	1.1. Функції білків. 1.2. Способи сполучення α-амінокислот в молекулах білків. 1.3. Зв’язки, що формують первинну, вторинну, третинну та четвертинну структури.
2. Рівні структурної організації білкових молекул.	2.1. Первинна, вторинна, третинна, четвертинна структура, типи зв’язків, що стабілізують ці структури. 2.2. Методи визначення структури білка (по Ф. Сенгеру та Едману).
3. Хімічний синтез пептидів та білків.	3.1. Прості і складні білки. 3.2. Класифікація білків у залежності від природи простетичної групи та просторової форми: глобулярні та фібрилярні. 3.3. Фактори стабільності існування білків в колоїдних розчинах.
4. Механізм осадження білків. Види осадження.	4.1. Зворотне осадження білків та його використання в медичний практиці. 4.2. Незворотне осадження білків, фактори що його викликають.
5. Денатурація білка, її ознаки.	5.1. Денатуруючи фактори (приклади). 5.2. Ренатурація білка.

 

Алгоритм лабораторної роботи.

Оцінити дію на білки сульфату амонію, ТХО та сульфасаліцилової кислоти. Дати аргументацію.

Хід работи:

· до 5 крапель 1% яєчного білку додаємо 20 крапель розчину (NH₄)₂SO₄. Утворюється осад, який розчинний у воді.

· до 5 крапель 1% яєчного білку додаємо 1 мл ТХО кислоти. Утворюється осад нерозчинний у воді.

· до 0,5 мл розчину білку додаємо 0,5 мл 20% сульфасаліцилової кислоти. Утворюється осад нерозчинний у воді.

 

Біуретова реакція.

Принцип методу. Іони міді (Cu²⁺) у лужному середовищі утворю­­­ють з пептидними группами (кислото-амідний або пептидний зв'язок) комплексну сполуку синьо-фіолетового кольору.

Хід работи:

До 5 крапель 1% яєчного білку додаємо 5 крапель 10% розчину NaOH та 2 краплі 1% розчину CuSO₄. Перемішати і спостерігати синьо-фіолетове забарвлення.

 

Тема 10. ВУГЛЕВОДИ. БУДОВА ТА ХІМІЧНІ ВЛАСТИВОСТІ МОНОСАХАРИДІВ.

Актуальність теми: вуглеводи поряд з білками і ліпідами є важливими хімічними з’єднаннями живих організмів. Вони широко використовуються в медичній практиці. Розчини 10%, 20%, 40% глюкози вводять в організм для покращення серцевої діяльності, підтримання тонусу нервової системи і в багатьох інших випадках.

 

Конкретні цілі:

1. Робити висновки щодо існування моносахаридів в різних таутомерних формах, що впливає на їх реакційну здатність і дає можливість лабораторного дослідження моносахаридів в біологічних рідинах.

2. Аналізувати принципи методів виявлення та визначення моносахаридів в крові, сечі, слині.

 

Оpiєнтувальна каpтка для самостiйного вивчення студентами